細胞融合技術電融合法
在直流電脈沖的誘導下,細胞膜表面的氧化還原電位發生改變,使異種細胞粘合并發生質膜瞬間破裂,進而質膜開始連接,直到閉和成完整的膜,形成融合體。優點:融合率高、重復性強、對細胞傷害小;裝置精巧、方法簡單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程;免去PEG誘導后的洗滌過程、誘導過程可控性強。......閱讀全文
細胞融合技術電融合法
在直流電脈沖的誘導下,細胞膜表面的氧化還原電位發生改變,使異種細胞粘合并發生質膜瞬間破裂,進而質膜開始連接,直到閉和成完整的膜,形成融合體。優點:融合率高、重復性強、對細胞傷害小;裝置精巧、方法簡單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程;免去PEG誘導后的洗滌過程、誘導過程可控性強。
細胞融合技術電融合法
在直流電脈沖的誘導下,細胞膜表面的氧化還原電位發生改變,使異種細胞粘合并發生質膜瞬間破裂,進而質膜開始連接,直到閉和成完整的膜,形成融合體。優點:融合率高、重復性強、對細胞傷害小;裝置精巧、方法簡單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程;免去PEG誘導后的洗滌過程、誘導過程可控性強。
電融合技術簡介
當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電融合,又叫電穿孔。
細胞融合技術物理振動法
離心振動物理方法之一,使用離心機等機器實現細胞之間的融合。
細胞融合技術離心振動法
物理方法之一,使用離心機等機器實現細胞之間的融合。
細胞電融合技術的簡介
當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法,電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型,包括細菌、酵母、植物和動物細胞;而且,它還能作為注射方法(稱為
細胞電融合技術的優點
與其他常用的導入外源物質的方法相比,電穿孔具有很多優點。首先,不必象顯微注射那樣使用玻璃針,不需要技術培訓和昂貴的設備,可以一次對成百萬的細胞進行注射。第二,與用化學物質相比,電穿孔幾乎沒有生物或化學副作用。第三,因為電穿孔是一種物理方法,較少依賴細胞類型,因而應用廣泛。實際上,對大多數細胞類型,用
電穿孔和電融合技術
實驗概要了解細胞電穿孔(electroporation)和電融合(Electrofusion Method)的基本原理。學習電穿孔和電融合基本技術。實驗原理當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括DNA、 ? RN
細胞電融合技術的方法步驟
除了能使細胞膜具有通透性,讓外界的分子擴散入胞液中以外,高強度的電場脈沖也能引起細胞融合,這一現象叫做電融合。然而,在用電脈沖融合前必須使細胞相互緊密接觸,這一電融合方法在原生質融合制取雜交植物,胚胎細胞相互融合制備動物克隆方面非常有用,尤其在制取雜交瘤細胞制備單克隆抗體方面用處很大。幾個實驗室已證
細胞融合技術仙臺病毒法融合
仙臺病毒法融合①兩種細胞在一起培養,加入病毒,在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝聚;②在37℃中,病毒與細胞膜發生反應,細胞膜受到破環,此時需要Ca2+和Mg2+,最適PH為8.0一8.2;③細胞膜連接部穿通,周邊連接部修復,此時需Ca2+和ATP;④融合成巨大細胞,仍需ATP。
細胞融合的方法有哪些
一、細胞融合的方法有三種:生物方法、化學方法、物理方法。二、細胞融合也稱細胞雜交?,?是指細胞通過介導和培養,?在離體條件下用人工方法將不同種的細胞通過無性方式融合(?合并)?成一個核或多核的雜合細胞的過程。體細胞融合后可形成四倍體或多倍體細胞,由此形成的雜交細胞,其特性會有很大的變化。三、化學誘導
細胞融合技術仙臺病毒法融合法
①兩種細胞在一起培養,加入病毒,在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝聚;②在37℃中,病毒與細胞膜發生反應,細胞膜受到破環,此時需要Ca2+和Mg2+,最適PH為8.0一8.2;③細胞膜連接部穿通,周邊連接部修復,此時需Ca2+和ATP;④融合成巨大細胞,仍需ATP。
細胞融合技術聚乙二醇(PEG)法
聚乙二醇(PEG)結構為:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小于6000者均可用作細胞融合劑。PEG經高壓滅菌后,與溫熱的Engle氏液混合。一般選用分子量為4,000,常用濃度為50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3調整),分子量小的PEG,融合效應差,又有毒
細胞融合技術聚乙二醇(PEG)法
聚乙二醇(PEG)結構為:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小于6000者均可用作細胞融合劑。PEG經高壓滅菌后,與溫熱的Engle氏液混合。一般選用分子量為4,000,常用濃度為50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3調整),分子量小的PEG,融合效應差,又有毒
細胞融合的基本原理和方法
1.病毒誘導助融:細胞融合在自然界是存在的,細胞融合研究第一也是基于自發的細胞融合,1957年,岡田善雄意外發現仙臺病毒,能誘導懸液中艾氏腹細胞融合,然后Harris、Kada等用于誘導種間細胞融合,獲得成功。2.化學助融:1972年,卡爾森第一用硝酸鈉進行煙草兩個種的細胞原生質體的融合,1974年
細胞融合的基本原理和方法
1.病毒誘導助融:細胞融合在自然界是存在的,細胞融合研究第一也是基于自發的細胞融合,1957年,岡田善雄意外發現仙臺病毒,能誘導懸液中艾氏腹細胞融合,然后Harris、Kada等用于誘導種間細胞融合,獲得成功。2.化學助融:1972年,卡爾森第一用硝酸鈉進行煙草兩個種的細胞原生質體的融合,1974年
細胞電融合
細胞電融合的優勢在于(1)融合率高(2)無毒性(3)操作簡便(4)融合后的細胞繼續培養成活率高等。動物的游離細胞以及植物成微生物去壁后的原生質體,在電刺激下進行細胞融合,是細胞工程手段的又一進展。實驗方法原理將制備的游離細胞或原生質體,置于電融合室中,在高頻交流電場的作用下,細胞被極化,成為偶極子,
細胞電融合
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將制備的游離細胞或原生質體,置于電融合室中,在高頻交流電場的作用下,細胞被極化,成為偶極子,造成細胞之間相互連接,如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用時間過長,則細胞連接成串珠狀,應適當控制以上條件,盡量使兩細
細胞電融合
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將制備的游離細胞或原生質體,置于電融合室中,在高頻交流電場的作用下,細胞被極化,成為偶極子,造成細胞之間相互連接,如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用時間過長,則細胞連接成串珠狀,應適當控制以上條件,盡量使兩細
細胞融合技術
細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)是指真核細胞通過介導和培養,兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程。人工的細胞融合開始于20世紀50年代, 60年代到70代作為一門新興的技術, 發展非常快, 應用范圍也極為廣泛, 除了同種類細胞間可以
誘導動物細胞融合的方法介紹
誘導動物細胞融合的方法在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。病毒誘導融合?病毒是zui早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒zui常
誘導細胞融合的方法有哪些
在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。1.病毒誘導融合??病毒是最早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。用作融合劑的病毒必須
誘導細胞融合的方法有哪些
在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。1.病毒誘導融合??病毒是最早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。用作融合劑的病毒必須
誘導動物細胞融合的方法有哪些
在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。 病毒誘導融合 病毒是*早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒*常用。用作融合劑的病毒必
細胞融合技術簡介
細胞融合技術是用自然的或人為的方法,使種類不同的兩種生物細胞直接融合,產生能夠同時表達二者有益性狀新雜種細胞的技術。自然進行的細胞融合,即卵子和精子受精形成合體,只能發生在同一種生物或親緣關系很近的生物種之間。然而,細胞融合技術的問世不僅為細胞學、遺傳學的研究提供了有力的手段,而且開創了動物、植
動物細胞融合的主要方法
動物細胞融合的主要方法病毒法;聚乙二醇法;電融合法。相關內容:誘導動物細胞融合的方法有:物理法(離心、振動)、化學法(聚乙二醇)、生物法(滅活的病毒)。誘導植物原生質體融合的方法可分為物理法和化學法。(1)植物體細胞雜交技術中,誘導原生質體融合的方法基本分為兩類,物理法和化學法,物理法包括離心、振動
不同動物細胞融合的特點和誘導因素
1、病毒誘導融合病毒是最早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內酯滅活,使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性。優點:融合率較高,對各種動物細胞都適宜,且仙臺病毒能在雞胚中大量繁殖,容易培養;缺
什么是細胞電融合?
當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電融合,又叫電穿孔。
細胞融合技術誘發融合
異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合,稱誘發融合。
細胞融合技術的發展
19世紀30年代,科學家們相繼在肺結核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。細胞融合19世紀70年代,科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象,但是當時科學發展水平的限制,沒有給予足夠重視。1962年,日本科學家發現日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤細胞融合的現象。1965年,英國