分光光度計應用蛋白質的直接定量(UV法)介紹
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的“背景”信息,設定此功能“開”。與測試核酸類似,要求A280的吸光值至少大于0.1A,最佳的線性范圍在1.0-1.5 之間。實驗中選擇Warburg 公式顯示樣品濃度時,發現讀數“漂移”。這是一個正常的現象。事實上,只要觀察A280的吸光值的變化范圍不超過1%,表明結果非常穩定。漂移的原因是因為Warburg 公式吸光值換算成濃度,乘以一定的系數,只要吸光值有少許改變,濃度就會被放大,從而顯得結果很不穩定。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋......閱讀全文
分光光度計應用蛋白質的直接定量(UV法)介紹
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的“背景”信息,設定此功能“開”。與測試核酸
蛋白質的直接定量(UV法)
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分光光度計用于蛋白質的直接定量(UV法)應用
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的“背景”信息,設定此功能“開”。與測試核酸
蛋白質的直接定量(UV法)簡述
這種方法是在280 nm波長,直接測試蛋白。選擇 Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除 320 nm的“背景”信息,設定此功能“開”。與
UV法蛋白質定量分析簡述
這種方法是在280 nm波長,直接測試蛋白。選擇 Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。 蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除 320 nm的“背景”信息,設定此功能“開”
使用分光光度計蛋白質的直接定量的過程介紹
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的“背景”信息,設定此功能“開”。與測試核酸
超微量分光光度計的蛋白質直接定量功能介紹
超微量分光光度計的蛋白質直接定量是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的“背景”信息,
關于UV分光光度計的應用介紹
物質的紫外吸收光譜基本上是其分子中生色團及助色團的特征,而不是整個分子 的特征。 如果物質組成的變化不影響生色團和助色團, 就不會顯著地影響其吸收光譜, 如甲苯和乙苯具有相同的紫外吸收光譜。另外,外界因素如溶劑的改變也會影響吸收 光譜,在極性溶劑中某些化合物吸收光譜的精細結構會消失,成為一個寬帶
超微量分光光度計的蛋白質直接定量敘述
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的“背景”信息,設定此功能“開”。與
分光光度計應用比色法蛋白質定量介紹
蛋白質通常是多種蛋白質的混合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。
蛋白質的定量測定——紫外(UV)吸收測定法
實驗原理蛋白質分子中所含酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,使蛋白質在280nm波長處有最大吸收值。在一定濃度范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量成正比關系,可用作定量測定。紫外線吸收法測定蛋白質含量的優點是迅速,簡便,不消耗樣品,低濃度鹽類不干擾測定。因此,廣泛應用在柱層析分離中蛋白
直接電導法的應用
直接電導法主要應用于在哪幾方面呢?接下來請大家認真了解一下。 1)水質檢驗 用于鍋爐用水、工業廢水、天然水、實驗室制備去離子水及蒸餾水的質量檢測。電導率越低,水的純度越高。但不能檢測水中的非導電性物質,如細菌、藻類、懸浮物等,以及非離子狀態的雜質。檢測時要針對不同情況選用合適的電導電極。
直接電位法的應用
直接電位法是一種簡便而快速的分析方法。電極電位與被測物質濃度之間的能斯特方程式(2.4-10)是定量分析的基本關系式。測量時,用離子選擇電極和參比電極浸人入試液中構成測量電池,測得電動勢。由于接液電位的存在,膜電極的不對稱電位存在以及活度系數難以計算,-般不能通過測得電池電動勢直接利用式(2.
分光光度計應用核酸的定量介紹
核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數。如:1OD 的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml
分光光度計用于比色法蛋白質定量應用
蛋白質通常是多種蛋白質的混合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。
蛋白質定量/蛋白質含量的測定(LOWRY法)
實驗概要運用LOWRY法測定蛋白質的含量。實驗原理Lowry法是雙縮脲法和福林酚法的結合與發展,其原理是:蛋白質溶液用堿性銅溶液處理,形成銅-蛋白質的絡合鹽,再加入酚試劑后,除使肽鏈中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等顯色外,還使雙縮脲法中肽鍵、堿性銅的顯色效果更強烈。因此,Lowry法的顯色效果比單獨使用
關于滴定量熱法的基本應用介紹
滴定量熱法在量熱學中是測定熱力學函數的有效手段,例如測定焓變ΔH。連續量熱滴定得到的典型圖譜。圖中從 D點開始加入滴定劑,P點代表至此點前加入的滴定劑總量所對應的表觀總熱效應。滴定曲線在圖上分為a、b、d三個區段。a段為熱實驗初期,圖線的斜率與攪拌熱、熱敏電阻自熱和熱漏值的大小有關;b段是滴定期
蛋白質定量實驗_胺衍生法
試劑、試劑盒OPA 儲存液實驗步驟1.于分析前至少 30 min 將 15uL 2-巰基乙醇加人到 5 mL OPA 儲存液中, 這一試劑可穩定維持一天。所有熒光樣品和相關反應在所有時間內都需要避光。2.蛋白質標準品 (0.2~10 ug/mL) 和未知濃度的待測樣品在分析前需要調節 pH 至 8.
蛋白質定量檢測方法——BCA法
BCA(Bicinchoninc acid procedure,4,4’-二羧-2,2’-二喹啉)法與Lowry法相似,主要差別在堿性溶液中,蛋白質使Cu2+轉變Cu+后,進一步以BCA 取代Folin試劑與Cu+結合產生深紫色,在波長562 nm有強的吸收。 它的優點在于堿性溶液中B
關于UV分光光度計的基本介紹
uv分光光度計是利用紫外可見吸收光譜法,根據在特定吸收波長處所測得的吸收度,來進行藥品的鑒別、純度檢查及含量測定的測量裝置。紫外可見吸收光譜法自問世以來,在應用方面有了很大的發展,尤其是在相關學科發展的基礎上,促使分光光度計儀器的不斷創新,功能更加齊全,使得光度法的應用更拓寬了范圍。
蛋白質合成的直接模板介紹
1、翻譯模板 protein biosynthesis 不同mRNA序列的分子大小和堿基排列順序各不相同,但都具有5ˊ-端非翻譯區、開放閱讀框架區、和3ˊ-端非翻譯區;真核生物的mRNA的5ˊ-端還有帽子結構、3ˊ-端有長度不一的多聚腺苷酸(polyA)尾。帽子結構能與帽子結合,在翻譯時參與
直接碘量法介紹
直接碘量法是用碘滴定液直接滴定還原性物質的方法。在滴定過程中,I2被還原為I:滴定條件:弱酸(HAc ,pH =5 )弱堿(Na2CO3,pH =8)溶液中進行;如果溶液pH>9,可發生副反應使測定結果不準確。強酸中: 4I-+ O2(空氣中) + 4H+= 2I2+ H2O強堿中: 3I2+ 6O
高分辨率,雜散光,液晶屏顯示的紫外可見分光光度計
掃描型紫外分光光度計(UV-759CRT)UV-759紫外分光光度計,以全新的光學系統與電子系統設計理念,精心打造出的新一代智能化儀器。有別于傳統的雙光束分光光度計,該儀器采用新型的不對稱分光技術,具有雙光束的高穩定性,其主光束的高光通量,確保了儀器的高信號噪聲比。UV-759CRT是一款高分辨率,
產品知識:超微量分光光度計
生命科學領域,通常使用紫外可見分光光度法分析核酸、蛋白質和細菌細胞培養。最常見的應用有核酸(DNA 和 RNA)的濃度測定與純度判定、直接法或比色法測定蛋白質的濃度、酶反應的研究以及細菌細胞懸液的生長曲線監測。 隨著時代的發展,紫外可見分光光度法在生命科學領域運用不斷深入,超微量分光光度計
蛋白質定量檢測方法——酚試劑法
取6支試管分別標號,前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,不加標準蛋白溶液,在室溫下放置30分鐘,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,于650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。優點:靈敏度高,對水溶性蛋白質含量的測定很有效。缺點:①費時,要精確控制操作時間;
蛋白質定量檢測方法——紫外吸收法
大多數蛋白質在280nm波長處有特征的最大吸收,這是由于蛋白質中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于測定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。取9支試管分別標號,前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,1號試管不加標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,而不加標準蛋白溶液,每支試管液體總
分光光度計的應用
分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。蛋白質的直接定量(UV法):比色法蛋白質定量,蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成
分光光度計的原理及使用注意事項
分光光度計是實驗室常規分析設備,主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。它利用光譜分析方法對樣品進行定性、定量分析,在現代分子生物實驗室中常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量等。分光光度計又稱光譜儀(spectrometer),是采用一個可以產生多個波長的光源,通過
示波器的直接測量法介紹
所謂直接測量法,就是直接從屏幕上量出被測電壓波形的高度,然后換算成電壓值。定量測試電壓時,一般把Y軸靈敏度開關的微調旋鈕轉至“校準”位置上,這樣,就可以從“V/div”的指示值和被測信號占取的縱軸坐標值直接計算被測電壓值。所以,直接測量法又稱為標尺法。 (1)交流電壓的測量 將Y軸輸入耦合開
蛋白質含量的定量測定——雙縮脲法(Biuret法)
實驗原理具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆有雙縮脲反應。在堿性溶液中雙縮脲與銅離子結合形成復雜的紫好色復合物。而蛋白質及多肽的肽鍵與雙縮脲的結構類似,也能與Cu2+形成紫紅色絡合物,其最大光吸收在540nm處。其顏色深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質的分子量及氨基酸的組成無關,該法測定蛋白質的濃度范圍