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  • 免疫熒光間接法測抗體法的原理和實驗步驟

    ⑴基本原理染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合,從而可鑒定未知抗體。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標記的抗人球蛋白抗體:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進行稀釋。搪瓷桶三只(內有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有蓋搪瓷盒一只(內鋪一層浸濕的紗布墊)熒光顯微鏡玻片架濾紙37℃溫箱等。⑶實驗步驟1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原標本片,10min后棄去,使標本片保持一定濕度。2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS適當稀釋的待檢抗體標本,覆蓋已知抗原標本片。將玻片置于有蓋搪瓷盒內,......閱讀全文

    免疫熒光間接法測抗體法的原理和實驗步驟

    ⑴基本原理染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結

    免疫熒光直接法測抗原法的原理和實驗步驟

    ⑴基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,p

    免疫熒光技術直接法測抗原實驗步驟

    直接法測抗原⑴基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01m

    免疫熒光技術直接法測抗原的實驗步驟介紹

      ① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。  ② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。  ③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按

    簡述免疫熒光的技術的間接法測抗體的實驗步驟

      1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原標本片,10min后棄去,使標本片保持一定濕度。  2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS適當稀釋的待檢抗體標本,覆蓋已知抗原標本片。將玻片置于有蓋搪瓷盒內,37℃保溫30min。  3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol

    直接法測抗原的實驗步驟

    ① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.0

    間接法測抗體的實驗步驟

    ⑴基本原理染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結

    直接法測抗原的實驗步驟

    ⑴基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,p

    間接法測抗體的實驗步驟

    1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原標本片,10min后棄去,使標本片保持一定濕度。2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS適當稀釋的待檢抗體標本,覆蓋已知抗原標本片。將玻片置于有蓋搪瓷盒內,37℃保溫30min。3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol/L,pH7

    免疫熒光補體法實驗

    實驗方法原理用特異性抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應,補體就結合在抗原-抗體復合物上,再用抗補體的熒光抗體與補體結合,從而形成抗原抗體補體復合物-抗補體熒光抗體復合物,在熒光顯微鏡下呈現陽性熒光的部位就是免疫復合物存在處,此法常用于腎穿刺組織活檢診斷等。實驗材料抗補體熒光抗體試劑、試劑盒PBS甘

    免疫熒光補體法實驗

    實驗方法原理 用特異性抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應,補體就結合在抗原-抗體復合物上,再用抗補體的熒光抗體與補體結合,從而形成抗原抗體補體復合物-抗補體熒光抗體復合物,在熒光顯微鏡下呈現陽性熒光的部位就是免疫復合物存在處,此法常用于腎穿刺組織活檢診斷等。實驗材料 抗補體熒光抗體試劑、試劑盒 P

    免疫熒光技術直接法測抗原的檢測原理介紹

      ⑴基本原理  將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。  ⑵試劑與儀器  磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.0

    間接法的原理和操作步驟

    間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體

    疫熒光技術間接法測抗體實驗步驟

    間接法測抗體⑴基本原理染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的

    關于免疫熒光的技術的間接法測抗體的原理介紹

      ⑴基本原理  染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體

    間接法測抗體的操作步驟

    間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:補體法原理和操...

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:補體法原理和操作指南一、原理與意義免疫熒光組織(細胞)化學染色方法——補體法,是一種熒光抗體染色法。本法之熒光抗體不受免疫血清的動物種屬的限制,因而一種熒光抗體可作更廣泛的應用,敏感性亦較間接法高,效價低的免疫血清亦可應用,節省免疫血清,尤其是對檢查形態小的如立克氏

    免疫熒光技術直接法測抗原的注意事項

      1)對熒光標記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應超過1:20,抗體濃度過低,會導致產生的熒光過弱,影響結果的觀察。  2)染色的溫度和時間需要根據各種不同的標本及抗原而變化,染色時間可以從10 min到數小時,一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于

    免疫熒光的技術的間接法測抗體注意事項

      1)熒光染色后一般在1h內完成觀察,或于4℃保存4h,時間過長 ,會使熒光減弱。  2)每次試驗時 ,需設置以下三種對照:  ① 陽性對照:陽性血清+熒光標記物  ②陰性對照:陰性血清+熒光標記物  ③ 熒光標記物對照:PBS+熒光標記物  3)已知抗原標本片需在操作的各個步驟中,始終保持濕潤,

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:直接法原理和操...

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:直接法原理和操作流程一、原理與意義免疫熒光組織(細胞)化學染色方法——直接法,是一種熒光抗體染色法。該方法比較簡單,適合做細菌、螺旋體、原蟲、真菌及濃度較高的蛋白質抗原如腎、皮膚的檢查和研究。此法每種熒光抗體只能檢查一種相應的抗原,特異性高而敏感性較低。二、操作流程

    免疫熒光標記技術的方法分類及技術特點

    根據抗原抗體反應的結合步聚的不同,免疫熒光標記技術可分為直接法、間接法、補體法和雙重免疫熒光法四種。直接法是將熒光素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合,以檢查出相應的抗原成分。間接法是先用特異性抗體與相應的抗原結合,洗去未結合的抗體,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結合,

    細胞表面抗原檢測實驗_免疫熒光抗體法

    細胞表面有糖蛋白,這種蛋白質上有多糖,起到識別作用,當無法識別的糖蛋白進入血液就會引起身體的免疫反應引來嚴重后果,直接輸血才會引起,如果喝就不會,因為胃都將其降解成氨基酸了,進入身體合成自身蛋白質就不會有事故。實驗方法原理用人結腸癌細胞為免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人結腸癌細胞表面抗原(Ag)的單克隆

    免疫熒光染色(間接法)

    1、切片固定后用毛細滴管吸取經適當稀釋的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的濕度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗兩次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液體。?2、再滴加間接熒光抗體(如兔抗人 -球蛋白熒光抗體等),同上步驟,染色30min,37℃,緩沖鹽水

    免疫熒光技術——直接法

    免疫熒光技術可應用于:(1)研究特異蛋白抗原在細胞內分布;(2)對抗原進行細胞定位;(3)對特定抗原進行定量檢測。內容來源:組織培養和分子細胞學技術。(北京出版社)實驗方法原理直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存

    免疫熒光技術——間接法

    實驗方法原理基本原理是先用特異性抗體與細胞內相應抗原結合,再用熒光素標記的二抗與特異性抗體相結合,形成抗原-特異性抗體-標記熒光抗體的復合物。因為在復合物上帶有比直接法更多的熒光標記物,所以比直接法更敏感。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBS伊文氏蘭儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定后,PBS洗滌3

    直接免疫熒光抗體法的定義

    中文名稱直接免疫熒光抗體法英文名稱direct immunofluorescence antibody method定  義直接用熒光素標記的抗體檢測抗原的一種免疫標記技術。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)

    直接免疫熒光抗體法的定義

    中文名稱直接免疫熒光抗體法英文名稱direct immunofluorescence antibody method定  義直接用熒光素標記的抗體檢測抗原的一種免疫標記技術。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)

    間接法測抗體基本原理

    間接法測抗體基本原理:將抗原連接到固相載體上,樣品中待測抗體與之結合成固相抗原-受檢抗體復合物,再用酶標二抗(針對案檢抗體的抗體,如羊抗人ICG抗體)與固相免疫復合物中的抗體結合,形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二抗復合物,測定加底物后的顯色程度,測定待測抗體含量。

    間接法測抗體基本原理

    間接法測抗體基本原理:將抗原連接到固相載體上,樣品中待測抗體與之結合成固相抗原-受檢抗體復合物,再用酶標二抗(針對案檢抗體的抗體,如羊抗人ICG抗體)與固相免疫復合物中的抗體結合,形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二抗復合物,測定加底物后的顯色程度,測定待測抗體含量.

    直接法測抗原的基本原理

    將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。

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