DEAE層析原理是什么
層析技術是以離子交換纖維素或以離子交換葡聚糖凝膠為固定相，以蛋白質等樣品為移動相，分離和提純蛋白質、核酸、酶、激素、多糖等的一項技術。在纖維素與葡聚糖分子上結合有一定的離子基團，當結合陽離子基團時，可換出陰離子，則稱為陰離子交換劑。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl，DEAE)纖維素。在纖維素上結合了DEAE，含有帶正電荷的陽離子纖維素—O—C6 H14N+H，它的反離子為陰離子(如Cl-等)，可與帶負電荷的蛋白質陰離子進行交換。當結合陰離子基團時，可置換陽離子，稱為陽離子交換劑，如羧甲基(Carboxymethy， CM)纖維素。纖維素分子上帶有負電荷的陰離子(纖維素－O－CH2－COO一)，其反離子為陽離子(如Na+等),可與帶正電荷蛋白質陽離子進行交換。溶液的pH值與蛋白質等電點相同時，靜電荷為0，當溶液pH值大于蛋白質等電點時，則羧基游離，蛋白質帶負電荷。反之，溶液的pH值小于蛋白質等電點時，則氨基電離，蛋......閱讀全文
磷酸酶制備實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 緩沖鹽清洗液抽提緩沖液實驗步驟 一、組織/細胞制備和提取1. 配制下列溶液：(1) 緩沖鹽清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 緩沖液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
UniGel高載量離子交換介質的特點和應用
UniGel：高載量離子交換層析的新選擇 UniGel 高載量離子交換介質采用區別于傳統離子交換層析基質的表面修飾技術，運用特殊的延長臂和鍵合技術，使其載量獲得極大提升。離子交換（IEX）是根據生物分子表面電荷（種類、數目和分布）差異實現對不同生物分子的分離的方法。常規的離子交換層析介質
UniGel高載量離子交換介質的特點和應用
UniGel：高載量離子交換層析的新選擇 UniGel 高載量離子交換介質采用區別于傳統離子交換層析基質的表面修飾技術，運用特殊的延長臂和鍵合技術，使其載量獲得極大提升。離子交換（IEX）是根據生物分子表面電荷（種類、數目和分布）差異實現對不同生物分子的分離的方法。常規的離子交換層析介質
DEAESephadex－A50提取法純化多克隆抗體
DEAE-Sephadex A-50（簡稱A-50）為弱堿性陰離子交換劑，經過NaOH處理將Cl-型轉為OH-型后，可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白屬中性蛋白，等電點為pH6.85～7.5，其余均屬酸性蛋白。在溶液為pH8.0時，酸性蛋白均被A-50 吸附。從而可分離純化IgG。?? ? 1. 批
磷酸酶制備實驗
蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
磷酸酶制備實驗
蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒緩沖鹽清洗液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
層析的常用層析
◆吸附層析吸附劑的吸附力強弱，是由能否有效地接受或供給電子，或提供和接受活潑氫來決定。被吸附物的化學結構如與吸附劑有相似的電子特性，吸附就更牢固。常用吸附劑的吸附力的強弱順序為：活性炭、氧化鋁、硅膠、氧化鎂、碳酸鈣、磷酸鈣、石膏、纖維素、淀粉和糖等。以活性炭的吸附力最強。吸附劑在使用前須先用加熱脫水
層析技術(Layeranalise－technique)(3)
3．平衡 將DEAE―纖維素放入0.0lMol/L pH 7.4 PB液中（即起始緩沖液），靜止1h，不時攪拌，待纖維素下沉后，傾去上清液或抽濾除去洗液，如此反復幾次至傾出液體的pH值與加入的PB液的pH值相近時為止。4．裝柱 層析柱的選擇要大小、長度適當。一般而言，柱長和柱直徑之比為10：1～20
小分子樣品采用柱層析的分離純化方法
在很多化學藥品的原料藥合成制備過程中，有可能遇到無法重結晶，只能靠過柱分離來純化的樣品。 目前，利穗科技純化過以及涉及到的化學藥品有數百種，使用到的填料種類和純化方法也有幾十種。目前比較有新意和比較常用的方法有：高效正相硅膠層析柱法、反相C18高效DAC柱層析法、大孔吸附樹脂法、高效樹脂純化法、DE
DEAE葡聚糖轉染試劑的功能特點
DEAE-葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一，DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物，它與帶負電的核酸結合后接近細胞膜而被攝取，用DEAE-葡聚糖轉染成功地應用于瞬時表達的研究，但用于穩定轉染卻不是十分可靠。
DEAE離子交換劑純化血清IgG
原理離子交換是指液相中的離子與固定相上可解離基團的可逆交換反應。利用這個反應先將要分離的混合物在一定pH的溶液中解離，而后流經固定相，使之與固定相上的可解離基團進行離子交換，吸附于固定相上，凡不能進行交換吸附的成分，則流出層析柱外。再根據交換吸附于固定相上的各組分解離度的差別，運用不同的pH值或不同
DEAE葡聚糖凝膠的概念和用途
中文名稱DEAE-葡聚糖凝膠英文名稱diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定 義親水性交聯葡聚糖離子交換劑。是以交聯葡聚糖G25或G50為基質，通過化學方法引入電荷基團二乙氨乙基，制成外形呈珠狀的弱堿型陰離子交換劑，此類交換劑對核酸和蛋白質有較
化學轉染法DEAE葡聚糖法應用
DEAE-葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一，DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物，它與帶負電的核酸結合后接近細胞膜而被攝取，用DEAE-葡聚糖轉染成功地應用于瞬時表達的研究，但用于穩定轉染卻不是十分可靠。
從抗血清、腹水或雜交瘤上清液中純化免疫球蛋白G組分
DEAE-Affi-Gel Blue層析法分級分離IgG實驗材料抗血清、腹水或雜交瘤上清液試劑、試劑盒DEAE-Affi-Gel Blue、加樣緩沖液、洗脫緩沖液、晶體形式的NaN3儀器、耗材移液槍、燒杯實驗步驟1）根據制造商的說明準備DEAE-Aff1-Gel Blue柱子。于4℃用5倍柱床體積的
用高效液相色譜純化小鼠腹水中單克隆抗體
實驗概要本實驗介紹了高效液相色譜(HPLC)純化小鼠腹水中單克隆抗體的原理及操作步驟。實驗原理從小鼠腹水中純化mcab的方法有鹽析、離子交換層析、凝膠過濾和親合層析等。應用tsk deae-spw離子交換層析柱從小鼠腹水中純化mcab不僅純化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物學活性。根據離子
PPO粗酶液的純化
一、原理1.葡聚糖凝膠SephadexG-200凝膠柱層析利用大分子不能進入凝膠顆粒內部最先流出柱外，而小分子物質進入凝膠顆粒內部，流速慢而最后流出柱外，凝膠層析法能將不同分子大小的物質分離開。（G-200能分離800-80000D分子量的蛋白質）2.利用離子交換法，選取DEAE-陰離子纖維素DE5
PPO粗酶液的純化
實驗概要本實驗利用葡聚糖凝膠柱層析對PPO粗酶液進行了純化。實驗原理1. 葡聚糖凝膠SephadexG-200凝膠柱層析利用大分子不能進入凝膠顆粒內部最先流出柱外，而小分子物質進入凝膠顆粒內部，流速慢而最后流出柱外，凝膠層析法能將不同分子大小的物質分離開。(G-200能分離800-80000D分子量
層析技術(Layeranalise－technique)(2)
離子交換纖維素的優點為：①離子交換纖維素為開放性長鏈，具有較大的表面積，吸附容量最大；②離子基團少，排列稀疏，與蛋白質結合不太牢固，易于洗脫；③具有良好的穩定性，洗脫劑的選擇范圍廣。 2．離子交換交聯葡聚糖 離子交換交聯葡聚糖也是廣泛使用的離子交換劑，它與離子交換纖維素不同點是載體不同，常用交聯葡聚
血清γ球蛋白的分離純化與鑒定（凝膠層析法）2
（5）20%磺基水楊酸溶液（6）奈氏(Nessler)試劑應用液貯存液；稱取碘化鉀(KI)7.58g于250ml三角燒瓶中，用蒸餾水5ml溶解，再加入碘（I2） 5.5g溶解，加7～7.5gHg用力振搖10min(此時產生高熱，須冷卻)，直至棕紅色的碘轉變成帶綠色的碘化汞鉀液為止，過濾上清液傾入
PPO粗酶液的純化
一、原理1.葡聚糖凝膠Sephadex G-200凝膠柱層析 利用大分子不能進入凝膠顆粒內部 最先流出柱外，而小分子物質進入凝膠顆粒內部，流速慢而最后流出柱外，凝膠層析法能將不同分子大小的物質分離開。（G-200能分離800-80000D分子量的蛋白質）2.利用離子交換法，選取DEAE-陰離子纖維素
真核細胞利用DEAE葡聚糖的轉染實驗
用小鼠L型成纖維細胞來進行條件優比的，但只需稍做修改即可適用于幾乎任何細胞。根據所研究的細胞類型進行方法優化十分關鍵。實驗材料DNA試劑、試劑盒TBSDMEM葡聚糖DMSOPBS儀器、耗材培養箱離心管實驗步驟1. ?接種約5×105小鼠L型成纖維細胞/10 cm培養皿，培養3天至30%~50%匯片。
真核細胞利用DEAE葡聚糖的轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
DEAE纖維素膜的結構特點和應用
中文名稱DEAE纖維素膜英文名稱diethylaminoethyl cellulose membrane;DEAE-cellulose membrane定 義將二乙氨乙基(DEAE)引入纖維素分子后制成的紙狀薄膜，是一種弱堿型陰離子交換材料。可用于核酸的回收等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學
真核細胞利用DEAE葡聚糖的轉染實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 TBSDMEM葡聚糖DMSOPBS儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?接種約5×105小鼠L型成纖維細胞/10 cm培養皿，培養3天至30%~50%匯片。?2. ?對每個待轉染培養皿，用乙醇沉淀4 μg 待轉染的質粒DNA，在組織培養櫥中晾干沉淀，重懸于40 μl
DEAE葡聚糖凝膠的主要用途
中文名稱DEAE-葡聚糖凝膠英文名稱diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定 義親水性交聯葡聚糖離子交換劑。是以交聯葡聚糖G25或G50為基質，通過化學方法引入電荷基團二乙氨乙基，制成外形呈珠狀的弱堿型陰離子交換劑，此類交換劑對核酸和蛋白質有較
?β葡萄糖苷酶的純化方法
粗提的β-葡萄糖苷酶可采用硫酸銨沉淀或用乙醇、丙酮等有機溶劑沉淀等方法初步分離。β-葡萄糖苷酶的進一步純化，往往是根據具體情況，采用多種方法逐步分離。目前分離β-葡萄糖苷酶的方法較多，其中離子交換柱層析和凝膠過濾柱層析兩種手段結合使用最為普遍，多數是先離子交換柱層析，后用凝膠過濾柱層析。離子交換柱層
β葡萄糖苷酶的純化方法
粗提的β-葡萄糖苷酶可采用硫酸銨沉淀或用乙醇、丙酮等有機溶劑沉淀等方法初步分離。β-葡萄糖苷酶的進一步純化，往往是根據具體情況，采用多種方法逐步分離。目前分離β-葡萄糖苷酶的方法較多，其中離子交換柱層析和凝膠過濾柱層析兩種手段結合使用最為普遍，多數是先離子交換柱層析，后用凝膠過濾柱層析。離子交換柱層
紙層析和柱層析薄層層析高效液相層析各有什么特點
紙層析：英文為thin layer chromatography 又稱薄層色譜，色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術，屬固—液吸附色譜，兼備了柱色譜和紙色譜的優點，一方面適用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離；另一方面在制作薄層板時，把吸附層加厚加大，因此，又
同系層析的應用特點
在核酸分析中，將樣品經核酸酶部分裂解成不同長度的核苷酸片段，用同位素標記后，在DEAE纖維素薄層上分離，用含有未標記的相同的核苷酸片段作展層溶劑，這樣，未標記的核苷酸把標記過的核苷酸推進，使按分子量大小不同把標記核苷酸片段，按由小到大的次序排列，達到分離的目的。于是把這種層析法稱為同系層析。同系層析
同系層析的基本概念
在核酸分析中，將樣品經核酸酶部分裂解成不同長度的核苷酸片段，用同位素標記后，在DEAE纖維素薄層上分離，用含有未標記的相同的核苷酸片段作展層溶劑，這樣，未標記的核苷酸把標記過的核苷酸推進，使按分子量大小不同把標記核苷酸片段，按由小到大的次序排列，達到分離的目的。于是把這種層析法稱為同系層析。同系層析