• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 發布時間:2022-08-17 10:22 原文鏈接: elisa都有什么類型,分別適用與檢測哪些物質

     夾心法

    夾心法常用于檢測大分子抗原,一般之操作步驟為:

    將具有專一性之抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體

    加入待測檢體,檢體中若含有待測之抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

    洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一之一次抗體,與待測抗原進行鍵結

    洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酵素之二次抗體,與一次抗體鍵結

    洗去多余未鍵結二次抗體,加入酵素受質使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果

      間接法

    間接法常用于檢測抗體,一般之操作步驟為:

    將已知之抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余之抗原。

    加入待測檢體,檢體中若含有待測之一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。

    洗去多余待測檢體,加入帶有酵素之二次抗體,與待測之一次抗體鍵結。

    洗去多余未鍵結二次抗體,加入酵素受質使酵素呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。

      競爭法

    競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:

    將具有專一性之抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體

    加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

    加入帶有酵素之抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酵素之抗原可鍵結的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來。

    洗去檢體與帶有酵素之抗原,加入酵素受質使酵素呈色,當檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內留下之帶有酵素的抗原越少,顯色也就越淺。

    當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA。


    相關文章

    毒蛇咬傷怎么辦?這些檢測方法來支招

    2025年6月2日,一名游客在海南三亞疑似遭遇蛇咬傷,自行處理傷口后就醫,仍因病情惡化最終不幸離世。6月3日,三亞市衛健委通報事件,引發公眾廣泛關注。這一事件令人痛惜,更提醒我們:毒蛇咬傷是對生命的直......

    可復美陷入EGF風波:ELISA檢測結果引爭議,真相竟然是……

    近日,關于可復美面膜產品被檢測出違禁成分EGF(表皮生長因子)的事件引發了廣泛關注。事件的發酵始于一位消費者在使用“可復美重組膠原蛋白修復敷料(G型)”后,面部出現疑似“饅化”現象。該消費者將產品送至......

    大觀霉素間接競爭性ELISA的建立及應用

    大觀霉素(spectinomycin,SPE)是一種氨基糖苷類廣譜抗生素,是Mason于1961年首次從鏈霉菌中分離得到[1]。從結構上講,氨基糖苷類抗生素分子中均含有氨基糖苷結構。而SPE(圖1)是......

    ELISA分析缺點

    ELISA實驗所有方法的缺點很明顯:1、重復性不好;2、收自身抗體、嗜異性抗體等干擾,易出現假陽性;3、不論儀器和手工操作,干擾因素較多。影響最大的是溫度和時間。1、直接法(directELISA)將......

    酒中的草甘膦對人體健康的影響

    最近,科學家們在啤酒和葡萄酒中發現了一種常見的雜草殺手—草甘膦。此前,它曾因其可能與癌癥有關而引起爭議。美國的研究人員測試了15種不同類型的啤酒和5種不同類型的葡萄酒,在20種飲料中的19種中發現了農......

    ELISA的原理

    ELISA的原理:(1)抗原或抗體能以物理性吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能......

    農業部公告第2593號牛支原體ELISA試劑盒等2種新獸藥

    根據《獸藥管理條例》和《獸藥注冊辦法》規定,經審查,批準中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所等6家單位申報的牛支原體ELISA抗體檢測試劑盒等2種獸藥產品為新獸藥,核發《新獸藥注冊證書》,并發布產品試行規程......

    ELISA實驗中常見問題和注意事項

    1臨床標本的收集和保存用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿)。本實驗室用ELISA測定乙肝兩對半,甲肝,戊肝,抗HIV的標本時,在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:1)要注意避免出現嚴重溶......

    消除ELISA假陽性的改進措施

    當你拿著化驗單詢問醫生,他/她卻告訴你需要做更多檢查,你的心情想必更加焦慮。例行公事的醫學檢查好比針對潛在疾病的一場排雷競賽。醫生和患者們都如履薄冰,盡管執行了正確的檢驗,但其結果卻錯誤地把不具備陽性......

    ELISA實驗的18條軍規,你知道嗎?

    ELISA實驗通用規則1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但最好有專業人員進行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體......

  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载