胰島素(INS)操作規程

1．檢驗目的

檢測血清INS主要是用于給糖尿病人提供輔助的診斷信息以及對胰島素瘤的鑒別診斷，可以動態觀察相關疾病的發生發展過程、療效及預后評估。

2．方法原理

采用了美國雅培公司的ZL技術——微粒子酶免疫分析（MEIA），即以anti-INS包被微粒子（M-Ab）與標本中的BNP形成M-Ab-Ag復合物，當復合物被轉移到纖維杯上時，微粒子就不可逆地結合到纖維杯表面的玻璃纖維上，并與加入的堿性磷酸酶標記anti-INS結合，洗去未結合的游離物質，加入底物——四甲基傘形酮磷酸鹽，堿性磷酸酶脫去底物的磷酸基而發出熒光，通過MEIA光路元件檢測而得到定量結果。

3．性能指標

MEIA定量檢測INS不精密度CVs為4.0-5.3%，檢出限>1.0μU/ml，靈敏度1.0μU/ml，白蛋白、a-1酸性糖蛋白、膽紅素等于22種體內相關成份對INS測定無干擾，攜帶污染率0.001%。

4．標本收集

4．1標本類型：靜脈血或動脈血的血清或血漿標本均可作為檢測標本（抗凝劑可用肝素鈉、枸櫞酸鈉或EDTA，抗凝劑的質量應符合化試藥品要求——化學純或分析純，使用的比例以廠家推薦為準）；其他體液如羊水、胸水、腹水等體液可以作為檢測標本，但加熱滅活的血清和血庫的庫存血則不宜作為檢測標本。

4．2標本留取：以空腹為宜，收到標本后最好立即離心留取血清或血漿（凝固血應待其充分凝固后收集血清），不能有殘留的紅細胞、纖維蛋白絲，明顯溶血的標本不宜采納,進行抗凝或血栓溶解治療的病人采血后宜適當延長凝固時間再進行離心分離血清，羊水中如混有胎兒紅細胞可能會導致較高的INS結果，因此抽取羊水應盡量不要混入胎兒紅細胞。

4．3標本保存：留取的標本最好在3小時內檢測，不能立即檢測的應放置于2-8℃最長達24小時（可以含有凝塊但要密閉以防蒸發），或者-20℃最長達12個月（不能反復凍融也不能含有凝塊和紅細胞）。

4．4標本容器：盛放標本的容器必須為潔凈的一次性真空采血管、玻璃試管、一次性的不同規格的塑料離心管

4．5標本外送：如涉及到需要外送的標本，必須以規定的容器（0.5ml塑料離心管）存放并密封，并根據郵寄規則和要求進行包裝，運送時還要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由專人運送至指定地點指定接收人。

4．6拒收標本：凡與4.1-4.5所述內容不符的標本，檢驗人員應向臨床或就診者說明拒收標本的原因，并提出解決的方案或建議。

5．分析系統

5．1分析儀器：為美國雅培公司提供的AXSYM全自動免疫分析儀，儀器校準請參見儀器操作規程。

5．2分析試劑：為美國雅培公司提供的配套的INS試劑盒，規格為100test/盒，2-8℃貯存，有效期6個月；在效期內使用試劑。

5．3定標試劑：為美國雅培公司提供的配套的INS試劑盒中所附帶，2-8℃貯存，有效期6個月；每換一次不同批號試劑均應進行重新定標。

5．4質控試劑：為美國雅培公司提供的配套的質控品，分為高、中、低三個濃度，2-8℃貯存，有效期6個月；每天隨常規工作一起檢測并保存質控結果，每月一次質控小結，失控要有記錄及糾正的結果。

5．5其他耗材：均為美國雅培公司提供，如MUP、Matrix cell液、4號液、探針清洗液、管道消毒液等，其中MUP為2-8℃貯存，其他均室溫存放。

6．定標程序

6．1儀器開啟后（開機程序參見儀器操作規程），從屏幕主菜單中選擇ORDERLIST。

6．2選擇F4（CAL）。

6．3選擇要定標的項目——INS。

6．4輸入標本架的位置。

6．5輸入標準品的批號和效期（可省略）。

6．6選擇定標類型——MASTER曲線。

6．7選擇F6（ADD）確認定標申請。

6．8返回主菜單，選擇STORED RESULTS。

6．9選擇CALIBRATION REVIEW。

6．10選擇F4-NEW LOT。

6．11選擇：F4-SCAN用條碼閱讀器掃描主校正曲線，先上后下移動條碼；或者用鍵盤手工輸入條碼數據。

6．12選擇F6-SAVE儲存主校正曲線數據。

6．13返回主菜單，按RUN鍵運行即可。

6．14查閱定標結果：從主菜單選擇STORED RESULTS/CALIBRATION REVIEW，選擇F5（VIEW ALL），選擇項目——INS，查看定標內容，F6——查看詳細內容。

7．標本申請操作程序

7．1開機以后檢查庫存是否足夠（包括纖維杯、bulk soIUtions、標本架的有效性）和垃圾桶是否需要清理。

7．2從主菜單選擇ORDERLIST。

7．3選擇F6——PATIENT。

7．4輸入標本架的位置編號，如果系統設定自動標本位置定義，則無須此步驟。

7．5輸入標本編號，如果系統自動設定標本編號定義，則無須此步驟。

7．6輸入以下信息（可選擇）：病人編號、病人姓名、病人說明，根據需要可以不輸。

7．7選擇該標本要檢測的項目或項目組合（同時檢測多個項目的也可以手工選擇），在此還可選擇稀釋模式、檢測次數和是否急診。

7．8選擇F6——ADD，確認病人標本申請。

7．9如果還有標本需要申請，重復2-7步驟，如無則選擇F1——EXIT返回病人項目申請（這時可以查看申請是否正確）。

7．10選擇F1-EXIT返回主菜單，按RUN鍵運行。

8．質量控制操作程序

8．1質控品申請參照7“標本操作”步驟執行，即隨常規標本一起申請檢測。

8．2質控結果登記到本年度的“免疫室定量檢測項目室內質控登記表”。

8．3每天將測定的質控結果與質控允許范圍進行比較：INS質控血清一共有三個濃度（8μU/ml、40μU/ml、120μU/ml），質控范圍分別為6μU/ml –10μU/ml、32μU/ml– 48μU/ml、96μU/ml –144μU/ml。

8．4一旦發現失控，應即時查找和分析原因，并在該結果欄作詳細的批注和記錄解決的過程；失控情況處理及原因分析詳見9“失控處理”。

8．5每月進行質控小結。并將原始數據打印和存盤留檔。

9．失控處理操作程序

9．1失控情況處理：操作者在分析質控結果時，如發現質控違背了控制規則，應填寫失控報告單，上交專業室主管（組長），由專業室主管（組長）做出是否發出或重測與質控品相關的該批次病人標本檢驗報告的決定。

9．2失控原因分析：失控信號的出現受多種因素的影響，這些因素包括操作上的失誤、試劑、校準物的存貯條件改變、質控品的失效、儀器維護不良以及采用的質控規則、控制范圍、一次測定的質控標本數等等。失控信號一旦出現就意味著與測定質控品相關的該批病人標本報告可能作廢，此時首先要查明導致失控的原因，是質控品本身的原因還是質控品以外的原因。如是質控品以外的原因則應判為真失控，與質控品相關的同批次病人標本重新檢測；如是質控品本身的原因，則判為假失控，與質控品相關的同批次病人標本不必重測，可以發出報告。當失控信號出現時，可以采取以下步驟去尋找原因：

9．2．1立即重測同一質控品。此法主要用于查明人為誤差，每一步都應該認真仔細的操作，以查明失控的原因；另外，這一步還可以查出偶然誤差，如是偶然誤差，則重測的質控結果應在允許范圍（在控），可以認為該批次的病人標本不必重測。如仍不在允許范圍則可以進行下一步。

9．2．2新開一瓶質控品，重測失控項目。如果新開的質控血清結果正常，那么原來那瓶質控血清可能過期或在室溫放置時間過長而變質，或者被污染，此時可以認為該批次病人標本不必重測。如仍不在允許范圍則可以進行下一步。

9．2．3新開另一批質控品，重測失控項目。如果結果在控，則說明前一批血清可能都有問題，檢查它們的有效期和貯存環境，以查明問題所在，可以認為該批次病人標本不必重測。如仍不在允許范圍則可以進行下一步。

9．2．4進行儀器維護，重測失控項目。檢查儀器狀態，檢查光源是否更換，對儀器進行清洗維護，然后再測質控品，如在控，則說明是儀器原因，該批次的病人標本應重測。如仍不在允許范圍則可以進行下一步。