農藥殘留量測定法

本法系用氣相色譜法(附錄Ⅵ E)測定藥材和飲片及制劑中部分有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類農藥，除另有規定外，按下列方法測定。

一、有機氯類農藥殘留量測定

色譜條件與系統適用性試驗彈性石英毛細管柱(30m×0.32mm×0.25μm) SE-54，63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度230℃;檢測器溫度300℃。不分流進樣。程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至 220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘。理論板數按α-BHC峰計算應不低于1×106，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

對照品儲備液制備精密稱取六六六(BHC)[α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC),滴滴涕(DDT)[ PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT]及五氯硝基苯(PCNB)農藥對照品適量，用石油醚(60～90℃)分別制成每1ml 約含4～5μg的溶液，即得。

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液0.5ml置10ml量瓶中,用石油醚(60～90℃)稀釋至刻度，即得。

混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品儲備液，用石油醚(60～90℃)制成每1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。

供試品溶液制備藥材和飲片取供試品于60℃干燥4小時，粉碎成細粉，取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，精密加丙酮 40ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補足減失的重量，再加氯化鈉約6g及二氯甲烷30ml，稱定重量，超聲處理15分鐘,再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，靜置(使分層)，將有機相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時。精密量取35ml，于 40℃水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醚(60～90℃)如前反復操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚(60～90℃)溶解并轉移至10ml具塞刻度離心管中,加石油醚(60～90℃)至5ml。小心加入硫酸1ml，振搖1分鐘，離心(3000轉/分)10分鐘。精密量取上清液2ml置具刻度的濃縮瓶中，連接旋轉蒸發器，40℃下(或用氮氣)將溶液濃縮至適量、精密稀釋至1ml，即得。

制劑取供試品，研成細粉(蜜丸切碎，液體制劑直接量取)，精密稱取適量(相當于藥材和飲片2g)，以下按上述供試品溶液制備，即得供試品溶液。

測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1μl，分別連續進樣3次，取3次平均值，按外標法計算供試品中9種農藥殘留量。

二、有機磷類農藥殘留量測定

色譜條件與系統適用性試驗彈性石英毛細管柱(30m×0.25mm×0.25μm)DB-17MS(或HP-5)，氮磷檢測器(NPD)。進樣口溫度 230℃;檢測器溫度300℃，不分流進樣。程序升溫：初始120℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘5℃升至240℃，保持2分鐘，每分鐘20℃升至 270℃，保持0.5分鐘。理論板數按敵敵畏峰計算不低于6000，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

對照品儲備液制備精密稱取對硫磷、甲基對硫磷、樂果、氧化樂果、甲胺磷、久效磷、二嗪農、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷農藥對照品適量，用乙酸乙酯分別制成每1ml約含100ug的溶液，即得。

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液1ml，置20ml棕色量瓶中,加乙酸乙酯稀釋至刻度，即得。

混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品儲備液，用乙酸乙酯制成每1mL含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的溶液，即得。

供試品溶液制備藥材和飲片取供試品粉末(過二號篩)約5g，精密稱定，加無水硫酸鈉5g，加入乙酸乙酯50~100ml，冰浴超聲處理3分鐘，放置，取上層液濾過，藥渣加乙酸乙酯30~50ml，冰浴超聲處理2分鐘，放置，濾過，合并兩次濾液，用少量乙酸乙酯洗滌濾紙及殘渣，與上述濾液合并。取濾液于40℃ 以下減壓濃縮至近干，用乙酸乙酯轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱[120~400目，0.25g,內徑0.9cm(如 Supelclean ENVI-carb SPE Tubes,3ml活性炭小柱)，乙酸乙酯5ml預洗]，置多功能真空樣品處理器上，用正己烷-乙酸乙酯(1：1)混合液5ml洗脫，收集洗脫液，置氮吹儀上濃縮至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得。

測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1μl，分別連續進樣3次，取3次平均值，按外標法計算供試品中12種農藥殘留量。

三、擬除蟲菊酯類農藥殘留量測定

色鋪條件與系統適用性試驗彈性石英毛細管柱(30m*0.32mm*0.25um)SE-54(或DB-5)，63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度 270℃，檢測器溫度330℃。分流比20：1;5：1(或根據儀器設置選擇最佳的分流比)。程序升溫：初始160℃，保持1分鐘，每分鐘10℃升至 278℃，保持0.5分鐘，每分鐘1℃升至290℃，保持5分鐘。理論板數按溴氰菊酯峰計算應不低于1*10〈5〉，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于 1.5。

對照品貯備液的制備精密稱取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯農藥對照品適量，用石油醚(60~90℃)分別制成每1ml約含20~25ug的溶液，即得。

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液1ml，置10ml量瓶中，用石油醚(60~90℃)稀釋至刻度，搖勻，即得。

混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品貯備液，用石油醚(60~90℃)稀釋制成每1L分別含0ug、4ug、8ug、40ug、200ug的溶液，即得。

供試品溶液的制備藥材和飲片取供試品于60℃干燥4小時，粉碎成細粉(過五號篩)，取約1~2g,精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加石油醚(60~90℃)-丙酮(4：1)混合溶液30ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣再重復上述操作2次后，合并濾液。濾液加入適量無水硫酸鈉脫水后，于 40~45℃減壓濃縮至近干，用少量石油醚(60~90℃)反復操作至丙酮除凈，殘渣加適量石油醚(60~90℃)溶解，置混合小柱[從下至上依次為無水硫酸鈉2g、弗羅里硅土4g、微晶纖維素1g、氧化鋁1g、無水硫酸鈉2g、用石油醚(60~90℃)-乙醚(4：1)混合溶液20ml預洗]上，用石油醚(60~90℃)-乙醚(4：1)混合溶液90ml洗脫，收集洗脫液，于40~45 ℃減壓濃縮至近干，再用石油醚(60~90℃)3~4ml重復操作至乙醚除凈，用石油醚(60~90℃)溶解轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，即得。

測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1ul，分別連續進樣3次，取3次平均值，按外標法計算供試品中3種擬除蟲菊酯農藥殘留量。