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  • 發布時間:2020-08-17 16:45 原文鏈接: 膽堿酯酶的測定

    實驗方法原理


    實驗材料 膽堿酯酶

    試劑、試劑盒 Tris-HCl氯化乙酰膽堿氯化鎂NaOH

    儀器、耗材 自動滴定器

    實驗步驟



    空白對照:保持 pH 7.4,持續記錄幾分鐘每次 0.01 mol/L 氫氧化鈉的用量。


    樣品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并記錄 5 min 每次 0.01 mol/L 氫氧化鈉的用量。


    計算 25℃ pH 7.4 時,每分鐘一個單位水解的 1 umol 乙酰膽堿。


    注意事項

    其他

    試劑:


    0.02 mol/L Tris-HCl,pH7.4


    2.2 mol/L 氯化乙酰膽堿(Mr=181.7;40 g 溶于 100 ml 水中,碘化丁酰膽堿,Mr=301.2)


    0.2 mol/L 氯化鎂(MgCl2·6H2O;Mr=203.3;4.1 g 溶于 100 ml 水中)


    0.01 mol/L 氫氧化鈉標準溶液作為滴定劑,加入自動滴定器的滴管中


    膽喊酯酶,溶于 H2O 中,1 mg/ml


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