如何提取細胞線粒體

提取新鮮心肌組織細胞內線粒體的方案：
心肌組織切碎后在4 ℃介質（0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4，0-4℃）中制備心肌組織勻漿。勻漿經750g、離心10 min后留上清，以9000 g離心20 min 后留沉淀，重新懸浮后以9000 g再離心20 min，棄上清得線粒體.全部操作于4 ℃進行。
培養細胞提取線粒體.細胞棄去培養液后，用細胞收集液作用2到3 min，用scraper,將細胞收集起來，6000 g離心15 min。棄上清，之后加細胞勻漿液，用勻漿器或手動勻漿管勻漿，將裝有勻漿液的離心管配平后放入普通離心機，以2500 rpm，離心15 min,緩緩取上清液，移入高速離心管中，保存于有冰塊的燒杯中.以17000 rpm離心20 min，棄上清，留取沉淀物。加入0．25mol/L蔗糖與0．003 mol/L氯化鈣液l ml，用吸管吹打成懸液，以17000 rpm離心20 min，將上清吸入另一試管中，留取沉淀物，加入0.1ml 0．25mol/L蔗糖與0.003mol/L氯化鈣溶液混勻成懸液.即得線粒體。