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  • 發布時間:2021-12-29 11:19 原文鏈接: westernblot轉膜是怎么做的

    蛋白免疫印跡( Western Blot) 是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是電轉印法,分為濕式轉印與半干轉印。
    濕式轉印是將膠塊垂直方向夾在濕式轉印槽內進行電轉印。以E-Blotter濕轉槽為例,一般使用垂直電泳槽的緩沖液槽體,將內部垂直電泳電極替換為濕轉的轉印芯,將膠塊、濾紙、轉印棉夾到轉印芯內部,將槽體倒滿緩沖液通電進行電轉印。
    半干轉印是將膠塊水平方向夾在半干轉印槽內進行電轉印。以Yrdimes半干轉印槽為例,將濾紙、轉印棉用緩沖液浸潤后,與膠塊一起夾到轉印槽內,通電進行電轉印。
    一般來說濕轉相對半干轉印速度上要慢,設備成本上半干轉印槽也相對更貴。通常小分子量的蛋白半干轉效果比較好,大分子量(100KD)以上建議濕轉。

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