免疫膠體金銀細胞化學染色中固定劑選擇

免疫膠體金銀染色和其它免疫細胞化學方法一樣，要想得到好的染色效果，關鍵取決于標本處理是否適當，只有使抗原性及組織結構保存的好，才能使后續的染色成功成為可能，其次要用高特異性和高效價的一抗，選擇合適的稀釋度。由于免疫組化方法廣泛應用于不同的生物學科，所要檢出的抗原種類繁多，性質也各不相同。因此，不可能有一種適用于所有抗原的固定劑，而是根據不同的抗原性質區別對待。根據我們使用的固定劑介紹如下，僅供參考。

1、固定劑的選擇及其相應的固定時間

（1）酶：冰凍切片不固定，或用95%乙醇，固定時間為10min。

（2）激素：冰凍切片、涂片、印片，不固定或丙酮、甲醇、乙醇、PEG固定。固定時間為4℃*30min。

（3）免疫球蛋白：中性福爾馬林、四氯化碳（1%甲醛），固定時間為30min。 

（4）白蛋白：95%乙醇含1～5%冰醋酸。固定時間為30min。

（5）纖維蛋白原：95%乙醇含1%～5%冰醋酸。固定時間為30min。

（6）病毒：丙酮、100%乙醇、甲醇、乙醚。固定時間為30min。

（7）糖蛋白：PLP、丙酮。固定時間為30min。

（8）脂質： Forssman 中性福爾馬林。固定時間為20min。 

（9）抗原： 2.5%硫代硫酸鈉，冰凍切片不固定。固定時間為20min。

（10）免疫電鏡：PLP、戊二醛、戊二醛-多聚甲醛、ECD-G等。固定時間為30min。

2、切片的處理與粘附

免疫組化染色過程較復雜，洗滌的次數較多，而且均需振蕩洗滌，抗原片粘貼不牢，往往在最后的時刻，還沒有等顯色就會脫落導致前功盡棄，這個環節雖小卻會影響大局。因此，為了保證切片染色成功，必須把切片處理好，解除脫片的后顧之憂。