檢測循環腫瘤細胞中miRNA的新技術

　　 越來越多的證據表明，循環腫瘤細胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預后的潛力。然而，檢測卻并非易事。近日，西班牙的研究人員在《Science Reports》上介紹了一種方法，能利用原位雜交檢測這種小的非編碼RNA。

　　CTC是從原發性腫瘤脫落，然后進入循環系統的一種細胞。它們到達其他的組織或器官，導致腫瘤轉移。鑒于近年來CTC檢測技術的進步，研究人員能夠利用這些上皮細胞來監測癌癥進展，并跟蹤患者對治療的反應。

　　盡管如此，大多數CTC分析的靈敏度較低。據GENYO研究團隊介紹，這主要是因為只有少量的上皮標志物可用來鑒定和分離全血中的循環腫瘤細胞，通常是上皮細胞粘附分子(EpCAM)和細胞角蛋白(CK)。然而，這些上皮細胞也可能來自其他上皮組織，而并非腫瘤。

　　讓事情更加復雜的是，最新數據表明存在一部分CTC，不表達EpCAM或CK。相反，這些細胞表現出上皮-間質轉化(EMT)的特征。這個過程與腫瘤轉移相關，其中上皮細胞呈現出間質特征，促進遷移、入侵和抗凋亡。

　　基于這些原因，探索CTC中miRNA的生物標志物潛力受到了限制。為了解決這個問題，GENYO的研究人員開發出一種稱為MishCTC的方法，將原位雜交方法以及基于CK表達的免疫磁性選擇和免疫細胞化學相結合，利用鎖核酸(LNA)探針來檢測miRNA。

　　為了驗證這種技術，研究人員選擇了miR-21，這種miRNA靶定多個腫瘤抑制基因，而且在癌細胞中表達而不在造血細胞中表達，因此是檢測CTC的理想標志物。

　　他們獲得了25例轉移性癌癥患者的外周血樣本，并利用MishCTC方法開展了分析。在這25個樣本中，11個樣本含有表達CK和miR-21的CTC。對于CK表達丟失的EMT誘導的上皮腫瘤細胞系(MCF-7)，MishCTC技術也成功追蹤了miR-21的表達，表明miR-21可能是檢測EMT表型的CTC的一個很好的標志物。

　　據作者介紹，這些數據第一次證明了原位雜交方法可以用于CTC中miRNA的鑒定。他們目前正在招募大批的癌癥患者，以便根據miRNA的表達來研究CTC的異質性。