HPLC法
氣相色譜/質譜檢測法
| 實驗材料 | 動物組織 |
|---|---|
| 試劑、試劑盒 | 乙酸乙酯 丙酮 甲醇 乙腈 |
| 儀器、耗材 | 離心管 雞心瓶 SCX柱 |
| 實驗步驟 |
1. 提取
稱取5 g(準確至0.01 g)樣品于50 mL離心管中,加入20 mL乙酸乙酯,均質1 min后,超聲提取5 min,再以3000 r/min的速度離心10 min,取上清液轉移至雞心瓶中。再用20 mL乙酸乙酯重復提取一次,合并上清液于同一雞心瓶中。
2. 凈化
將提取液于40 ℃下旋轉蒸發至近干(不能全部蒸干),用5 mL乙酸-乙酸乙酯(5 + 95)溶解,將溶液轉移到預洗過的SCX柱上的貯液器中,再用 5 mL乙酸-乙酸乙酯(5 + 95)洗雞心瓶,洗液一并轉移到SCX柱【經5 mL乙酸-乙酸乙酯(5 + 95)預洗】上的貯液器中,打開活塞,以2 mL/min流速滴下。依次用2.5 mL丙酮、5 mL甲醇、5 mL乙腈在2 mL/min流速下淋洗柱子,用5 mL氨水- 乙腈(5 + 95)洗脫。棄去前2 mL,收集后面的洗脫液于玻璃管中,在40 ℃水浴上用氮氣小心吹干,用水定容至1 mL,旋渦振蕩或超聲溶解,過0.45 um濾液膜后, 進行HPLC分析。
3. 液相色譜條件
流動相:
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