細胞劃痕實驗

細胞樣品

無血清培養基 PBS

6孔板 marker筆 直尺 槍頭

一.準備：
所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內）

二.流程：
1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X10⁵個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。
4.用PBS洗細胞3次，去處劃下的細胞，加入無血清培養基。
5.放入37度5%CO₂培養箱，培養。按0，6，12，24小時取樣，拍照。

下面是照片，細胞NIH3T3
0h

6h

12h

24h

1.劃痕法測量適用的細胞范圍較小，一般只適用于上皮細胞，纖維樣細胞。

2.雖然無血清培養可以忽略細胞增殖的影響，但是由于細胞內信號傳導系統整體性的下調節，細胞遷移的速度也會慢很多。