小量制備
氯化銫法
| 實驗方法原理 | 提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS（十二烷基硫酸鈉）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質，再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質，得到的DNA溶液經乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 細菌 |
| 試劑、試劑盒 | TE 氯化銫 溴化乙錠 NaCl 乙醇 CTAB |
| 儀器、耗材 | 離心機 搖床 |
| 實驗步驟 |
1. 培養5 ml 的細菌培養物至飽和狀態，取1.5 ml 的培養物離心2 min。
4. 加入100 ul 5 mol/l NaCl充分混勻，再加入80 ul CTAB/NaCl溶液，混勻，于65℃溫育10 min。
5. 加入等體積的氯仿/異戊醇，混勻，離心4~5 min將上清液轉人一個新管中，如果難以移出上清，先用牙簽除去界面物質。
6. 加入等體積的酚/氯仿/異戊醇，混勻，離心5 min，將上清液轉入一只新管中。
7. 加入0.6體積異丙醇，輕輕混合直到DNA沉淀下來，用一個封口的巴斯德管將沉淀轉移至1 ml 的70%乙醇中洗滌。
8. 離心5 min，棄上清，用凍干機稍加干燥，重溶于的下100 ul TE緩沖液，每次酶切反應用10~15 μl。
展開 |
迄今規模最大的古代人類DNA研究表明，人類進化在過去1萬年里明顯加快。這項由美國哈佛醫學院的群體遺傳學家DavidReich聯合主導的研究，4月15日發表于《自然》。研究人員在涵蓋歐洲和中東地區的古代......
近日，湖北省農業科學院果樹茶葉研究所聯合華中農業大學園藝林學學院，在柑橘風味品質形成機制研究中取得新進展。研究團隊鑒定出一個可同時調控蔗糖積累與檸檬酸代謝的關鍵基因模塊，為柑橘風味品質定向改良提供了新......
球蟒得名于它的經典的防御姿態：它們會蜷縮成一個球狀，并將頭部緊緊收起。然而，它們的鱗片之下還隱藏著另一種遠為精妙的防御機制：一種能夠抑制細菌積聚的微觀尖刺。近日發表于《ACSOmega》的一項研究，有......
近日，中國科學院青島生物能源與過程研究所單細胞中心與中國科學院天津工業生物技術研究所合作，研究開發了一種集成的、高靈敏度且高通量的錯誤校正平臺eMBS。能夠通過理性設計工程化MutS蛋白并結合磁珠分離......
據報道，上個月法國發生的一起案件，在一把槍上發現了同卵雙胞胎兄弟的DNA，但他們擁有相同的DNA，所以傳統的DNA檢測方法，無法確定DNA屬于哪位兄弟。在法國一起刑事審判中，傳統的DNA檢測未能區分出......
近日，中國農業科學院茶葉研究所茶樹遺傳育種創新團隊利用多基因激活系統，在茶樹根系中實現了茶氨酸生物合成的2個關鍵基因同步激活，顯著提高了茶氨酸含量。相關結果發表在《園藝研究》（Horticulture......
27日的《科學》雜志發表了一項研究，揭示了人類基因組中一類可“跳躍”的DNA片段——被稱為遺傳“寄生蟲”的LINE-1（L1）元件，如何成為破壞癌癥基因組穩定性的主要力量。基因組的不穩定正是癌癥演化的......
一艘沉沒于150年前的船經歷了怎樣的航程？科研人員從出水瓷瓶內的沉積物中，“打撈”出了它的生命史。通過對長江口二號沉船出水青花雙耳瓶中的土壤沉積物進行環境因子與沉積物古DNA分析，來自復旦大學、華東師......
鞭毛是驅動細菌細胞運動的重要納米機器，在海洋等多種環境中協助細菌實現空間遷移與環境響應。不同細菌的鞭毛結構差異明顯，以往研究主要集中于結構簡單的模式菌株大腸桿菌和沙門氏菌的馬達。然而，自然界中大多數細......
美國威斯康星大學麥迪遜分校科學家開展的一項最新研究發現：在太空微重力環境中，病毒與細菌之間“生死較量”依然存在，但卻呈現出與地球不同的模式。這些發現有助于科學家設計出更高效的噬菌體療法，對抗日益嚴峻的......