胡蘿卜素、葉黃素和葉綠素在反相超臨界色譜中分離初探

摘 要：在本項研究中，應用反相C18固定相超臨界CO2色譜對胡蘿卜素、葉黃素和葉綠素的分離進行了初步的探索。胡蘿卜素、葉黃素和葉綠素的下述色譜條件下被完全分開：色譜柱：Zorbax ODS；流動相：3%(V/V)正丙醇及超臨界CO2 流體；超臨界條件：壓力：4000psi；溫度：40℃；流速：2.0ml/min；檢測波長：435nm。與反相C18高壓液相色譜結果相比，這些組分的超臨界色譜呈正相洗脫行為。這一結果表明：超臨界CO2流體具有很強的非極性，同時，也證明了預裝的反相C18柱可以作為正相固定相來分離這些化合物．
關鍵詞：胡蘿卜素；葉黃素；葉綠素；超臨界流體色譜

    在完整的生物合成系統中，不含氧的類胡蘿卜素-胡蘿卜素(Carotene)- 和含氧的類胡蘿卜素- 葉黃素(Xanthophyll)- 通常是共存的。在光合組織中，類胡蘿卜素(Carotenoid)又總是與葉綠素(Chlorophyll)共存[1]。在對光和組織中的類胡蘿卜素進行分析與測定時，通常用有機溶劑將光合組織中的類胡蘿卜素與葉綠素同時萃取出。因此，在分析光合組織萃取物( 尤其是綠色蔬菜食品) 中的類胡蘿卜素時，將類胡蘿卜素和葉綠素進行分離是必需的要求。對于非光合組織的樣品，也需要分離胡蘿卜素和葉黃素。
    達到上述分離目的最有效手段是色譜(Chromatography)。色譜可以被形容為一個物理化學過
程。這個過程可以被描述為被分離的不同組分在兩相之間的分離。兩相之中的一相在分離過程中處于靜止的狀態，被稱為固定相，另一相則是不斷運動的，被稱為流動相。當一組混合物中的不同組分分布于流動相中達到平衡后，流經固定相時，混合物中的每一個組分在兩相之間達到新的分布平衡，結果導致不同組分在系統中具有不同的遷移率(Mobility)，最終使不同組分在流動
相中被分離。組分在固定相中的遷移可以用“容量因子(Capacity factor，見表達式1)”來描述。當混合物被分離時，不同組分在色譜系統中有不同的容量因子。