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  • 生物實驗室那些事都是精華!

    1. 跑page膠的時候 小電壓跑會避免高電壓產生的熱量爾導致的膠層變形。低電壓泳道會比大電壓泳道跑的直一些,且分離效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分離。 2. 提取質粒的時候 最后一步的酒精揮發很關鍵,基本上是其后續的酶切反應的決定性因素。所以這一步盡量揮發長一點時間,最好是空調吹熱風,或是37度溫箱放長一點的時間,我試過室溫過夜,酶切很好。 3. 做WESTERN BLOT 的時候 大家往往會摸索一抗、二抗的濃度,封閉時間,曝光時間等等,而每次變換其中的一個條件就需要從新跑膠、轉膜,甚至重新提蛋白,這樣會浪費大量的時間。其實完全沒有必要這樣。一次轉膜后,將PVDF膜晾干,裁減成小塊,保存起來,用的時候取出一塊,沒有任何影響。這對于摸索條件的戰友來說,節約了大量的時間。 4. 有關緩沖液和培養基配置 1)將緩沖液配方中的成分分別以10-100倍配成母液儲存,需要的時候只需將相應的母液混合,補加水稀釋即可。......閱讀全文

    影響沉淀純度的因素

    1. 表面吸附:沉淀表面上離子的不完全等衡引起對雜質的吸附現象吸附規律:(1)首先 吸附構晶離子 或 與構晶離子半徑大小相近、電荷相同的離子;????????? (2)其次 吸附能與構晶離子生成溶解度小的化合物的離子易被吸附;? ????????? (3)離子的電荷越高,濃度越大,越易被吸附;???

    沉淀反應實驗:火箭電泳(rocket-electrophoresis)實驗

    火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為:在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。1、材料(1)診斷血清(抗體):抗人IgG或IgA免疫血清(2)待檢血清(抗原):

    沉淀反應實驗:對流免疫電泳

    對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎上結合電泳技術而建立的一種簡便而快速的方法。此方法能在短時間內出現結果,故可用于快速診斷,敏感性比雙向擴散技術高10-15倍。血清蛋白在PH8.6條件下帶負電荷,所以在電場作用下都向E極移動。但由于抗體分子在這樣的PH條件下只帶微弱的負電荷,而且它的分子量又較大(為r球蛋

    這些因素影響沉淀瓊脂擴散

      瓊脂擴散試驗包括瓊脂雙向單擴散試驗和瓊脂雙向雙擴散試驗,后者是最常用的瓊脂擴散試驗,一般用于抗體或抗原的定性檢測,其原理是可溶性抗原與相應的抗體(抗血清)在瓊脂凝膠中向四周自由擴散,如果抗原和抗體相對應,則在二者比例適當處形成肉眼可見的白色沉淀線,反之則不會出現沉淀線。常用已知抗原檢測未知的血清

    沉淀條件的選擇——根據沉淀類型及純度影響因素

      (一)晶形沉淀的條件   1. 在適當稀的溶液中進行   降低 (Q-S)/S ,易得到粗晶形ˉ 易洗滌、易過濾、吸附雜質量小;(但不宜過稀,否則被沉淀離子的損失量大。)   2. 在不斷攪拌下進行,慢慢加入沉淀劑溶液   防止局部過濃,以免生成大量晶核。   3. 在熱溶液中進行   增大 S

    影響電泳的因素

    1.電場強度?電場強度也稱電位梯度,它是指單位長度的電位降。電場強度對電泳起重要的作用。電場強度愈大,則帶電粒子的移動愈快。根據所用電場強度大小,可將電泳分為常壓電泳(100~500V)和高壓電泳(500~10000V)。常壓電泳分離時間長,多用于分離蛋白質等大分子物質;高壓電泳分離時間短,多用來分

    影響電泳的因素

    ?不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表 示。泳動度是指帶電? 顆粒在單位電場強度下泳的速度。影響泳動度的主要因素有:1、首先決定于帶顆粒的性質,即顆粒所帶凈電荷的數量,大小及形狀。  一般說來,顆粒帶凈電荷多,直徑小而接近于球形,則在電場中泳動速度快,反 之則慢。泳動

    影響電泳的因素

    1.電場強度 電場強度也稱電位梯度,它是指單位長度的電位降。電場強度對電泳起重要的作用。電場強度愈大,則帶電粒子的移動愈快。根據所用電場強度大小,可將電泳分為常壓電泳(100~500V)和高壓電泳(500~10000V)。常壓電泳分離時間長,多用于分離蛋白質等大分子物質;高壓電泳分離時間短,多用來

    沉淀反應實驗:免疫電泳(immune-electrophoresis)實驗

    免疫電泳實驗免疫電泳實驗是先將抗原物質在瓊脂凝膠中做電泳分離,然后于凝膠槽中加入抗體血清。使抗原抗體進行雙向擴散,在比例適宜部位形成特異的抗原抗體沉淀弧線。每條沉淀弧線代表一組抗原抗體復合物,故可用抗原成分分析;且可以根據其遷移率與抗體所出現的特異反應進行鑒定。1、材料(1)待檢標本(抗原):正常人

    關于沉淀反應—火箭電泳(rocket-electrophoresis)-的簡介

      火箭電泳(rocket electrophoresis) 若在單向瓊脂擴散基礎上,加入抗原后,將瓊脂板置電場中,使抗原置于負極即向正極定向擴散,在與板中的抗體結合而形成錐形沉淀峰,形似火箭,故名火箭電泳。沉淀峰的高度與抗原濃度成正比。由于在電場作用下,促使帶負電荷多的抗原泳動,故火箭電泳需時短,

    影響環狀沉淀試驗結果的因素

    沉淀法中要求沉淀完全程度大于99.9 %.而沉淀完全與否是根據反應達平衡后,沉淀的溶解度來判斷。影響沉淀溶解度的主要因素有以下幾種:1. 同離子效應:當沉淀達平衡后,若向溶液中加入組成沉淀的構晶離子試劑或溶液,使沉淀溶解度降低的現象。沉淀劑用量:一般——過量50%~100%為宜,非揮發性——過量20

    免疫沉淀的影響因素介紹

    免疫沉淀的成功依賴于抗原的純度以及制備抗體的難易,主要受兩方面因素的影響:1、抗原原液的豐度,2、抗體對抗原的親和力。

    影響膠體電泳的因素

    影響電泳泳動度的因素:1、顆粒性質:顆粒的直徑、形狀及所帶靜電荷量對泳動速度有較大影響。一般來說顆粒帶凈電荷量越多,或其形狀越接近球形,在電場中的泳動速度就越快。反之則越慢。2、電場強度:電場強度是指每一厘米的電位降。又稱為電位梯度或電勢梯度。它對泳動速度起著十分重要的作用。電場強度越高,帶電顆粒的

    電泳技術介紹及影響電泳的因素

      一、基本知識和種類   電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極

    電泳技術介紹及影響電泳的因素

    一、基本知識和種類電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。電泳現

    影響電泳分析儀電泳的因素

      1. 電場強度  電場強度越大,電泳速度越快。但增大電場強度會引起通過介質的電流強度增大,從而造成電泳過程中產熱過多,引起介質溫度升高,影響電泳效果。降低電流可以減少產生熱量,但會延長電泳時間,減慢待分離生物大分子的擴散而影響分離效果。  2. 溶液性質  主要體現為樣本溶液的pH、離子強度和黏

    電泳技術介紹及影響電泳的因素

      一、基本知識和種類   電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極

    沉淀的溶解度及其影響因素

    (一)沉淀的溶解度(S)?? 對 MA 型沉淀:? ??????????????????? ?? MA的溶解度: S = [MA(水)]+[M+] = [MA(水)] + [A-]= S0 + [M+] = S0 + [A-]?? 式中: S0——分子溶解度或固有溶解度???? 因許多沉淀物的固有

    電泳技術的影響因素

    1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過

    有機溶劑沉淀法的影響因素

      (一)有機溶劑的選擇 在實際生產中,常用的有機溶劑有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小,沉淀能力強;而乙醇無毒,廣泛應用于藥品生產中。  (二)溫度的控制 有機溶劑沉淀時,溫度是重要的控制指標。根據沉淀對象不同,采用的溫度不同,為防止生物大分子在較高溫度時發生變性,一般要求在低溫下進行

    關于沉淀反應—對流免疫電泳(counter-immunoelectrophoresis)-的簡介

      對流免疫電泳(counter immunoelectrophoresis) 若在雙擴基礎上加電泳,將抗原孔置負極端,抗體孔置正極端。由于抗原所帶的負電荷較抗體多,且抗原分子小于抗體,在電場中能夠克服電滲的作用而由負極泳向正極;抗體卻克服不了電滲作用,從正極向負極移動,二者形成對流,并在比例適宜處

    影響有機溶劑沉淀法的因素分析

      (一) 有機溶劑沉淀法的因素— 有機溶劑的選擇 在實際生產中,常用的有機溶劑有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小,沉淀能力強;而乙醇無毒,廣泛應用于藥品生產中。  (二)?有機溶劑沉淀法的因素—?溫度的控制 有機溶劑沉淀時,溫度是重要的控制指標。根據沉淀對象不同,采用的溫度不同,為防止

    凝膠電泳儀影響因素

    瓊脂糖主要在DNA制備電泳中作為一種固體支持基質,其密度取決于瓊脂糖的濃度。在電場中,在中性pH值下帶負電荷的DNA向陽極遷移,其遷移速率由下列多種因素決定:  1、 DNA的分子大小:  線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在

    影響電泳(遷移率)的因素

    在電場中被分離物質的泳動速度除受本身性質如所帶電荷的性質和數量、分子本身的大小和形狀、分子的水化程度、解離趨勢等影響外,還與其他外界環境因素有關,這些環境因素影響著帶電顆粒的泳動速度。不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表示。泳動度是指帶電顆粒在單位電場強度下泳動的速度

    影響電泳技術的因素介紹

    1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過

    影響電泳(遷移率)的因素

    在電場中被分離物質的泳動速度除受本身性質如所帶電荷的性質和數量、分子本身的大小和形狀、分子的水化程度、解離趨勢等影響外,還與其他外界環境因素有關,這些環境因素影響著帶電顆粒的泳動速度。不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表示。泳動度是指帶電顆粒在單位電場強度下泳動的速度

    影響電泳的主要因素

    影響電泳的主要因素為:1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少.對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有

    影響電泳的因素:電場和溶液

    不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表示。泳動度是指帶電顆粒在單位電場強度下泳的速度。影響泳動度的主要因素有:1、首先決定于帶顆粒的性質,即顆粒所帶凈電荷的數量,大小及形狀一般說來,顆粒帶凈電荷多,直徑小而接近于球形,則在電場中泳動速度快,反之則慢。泳動度還與分子的形狀

    影響電泳(遷移率)的因素

    在電場中被分離物質的泳動速度除受本身性質如所帶電荷的性質和數量、分子本身的大小和形狀、分子的水化程度、解離趨勢等影響外,還與其他外界環境因素有關,這些環境因素影響著帶電顆粒的泳動速度。不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表示。泳動度是指帶電顆粒在單位電場強度下泳動的速

    影響電泳現象的因素有哪些?

    1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過

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