(一)有機溶劑的選擇 在實際生產中,常用的有機溶劑有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小,沉淀能力強;而乙醇無毒,廣泛應用于藥品生產中。 (二)溫度的控制 有機溶劑沉淀時,溫度是重要的控制指標。根據沉淀對象不同,采用的溫度不同,為防止生物大分子在較高溫度時發生變性,一般要求在低溫下進行,同時還要考慮有機溶劑與水混合時的放熱現象。 (三)pH值 等電點時,蛋白質的溶解度最低。在有機溶劑沉淀時,應選擇pH值在等電點附近,但是pH值的控制還必須考慮目的藥物的穩定性條件,一般生產中常用緩沖液來控制溶液的pH值。 (四)離子強度 在有機溶劑和水的混合液中離子強度是一個特別重要的因素。因為鹽在一定的濃度范圍內能增加蛋白質或酶在有機溶劑中的溶解度,使有機溶劑沉淀收率降低,因此當采用鹽析沉淀法得到蛋白質或酶后,如需進一步用有機溶劑沉淀法純化,一定要先透析除鹽[2]。......閱讀全文
(一)有機溶劑的選擇 在實際生產中,常用的有機溶劑有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小,沉淀能力強;而乙醇無毒,廣泛應用于藥品生產中。 (二)溫度的控制 有機溶劑沉淀時,溫度是重要的控制指標。根據沉淀對象不同,采用的溫度不同,為防止生物大分子在較高溫度時發生變性,一般要求在低溫下進行
實驗方法原理將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時,和高濃度鹽類似產生沉淀,這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性,所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭(0 ℃~4 ℃ 為佳),建議離子強度為 0.05~0.2 mol/L。有機溶劑的濃度按體
有機溶劑沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時,和高濃度鹽類似產生沉淀,這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左
實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時,和高濃度鹽類似產生沉淀,這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性,所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭(0 ℃~4 ℃ 為佳),建議離子強度為 0.05~0.2 mol/L。有機溶劑
多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化 有機溶劑的沉淀機理是降低水的介電常數,導致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,最后析出。 該法優點在于: 1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉淀; 2)沉淀不用脫鹽,過濾較為容易; 3)在生化制備中應
1.電場強度?電場強度也稱電位梯度,它是指單位長度的電位降。電場強度對電泳起重要的作用。電場強度愈大,則帶電粒子的移動愈快。根據所用電場強度大小,可將電泳分為常壓電泳(100~500V)和高壓電泳(500~10000V)。常壓電泳分離時間長,多用于分離蛋白質等大分子物質;高壓電泳分離時間短,多用來分
?不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表 示。泳動度是指帶電? 顆粒在單位電場強度下泳的速度。影響泳動度的主要因素有: 1、首先決定于帶顆粒的性質,即顆粒所帶凈電荷的數量,大小及形狀。 一般說來,顆粒帶凈電荷多,直徑小而接近于球形,則在電場中泳動速度快,反 之
1.電場強度 電場強度也稱電位梯度,它是指單位長度的電位降。電場強度對電泳起重要的作用。電場強度愈大,則帶電粒子的移動愈快。根據所用電場強度大小,可將電泳分為常壓電泳(100~500V)和高壓電泳(500~10000V)。常壓電泳分離時間長,多用于分離蛋白質等大分子物質;高壓電泳分離時間短,多用來
影響海水鹽度的主要因素: 1.降水量與蒸發量的對比關系。降水量大于蒸發量,則鹽度較低; 2.有暖流經過的海區鹽度較高,有寒流經過的海區鹽度較低; 3.有大量淡水注入的海區鹽度偏低; 4海區形狀越封閉,鹽度就會越趨向于更高或更低。
影響移液器精度的因素 1、溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發生誤差; 2、氣密性:移液器頂部和移液器的結合部,以及頂部柱體之間的長期磨損,造成誤差; 3、吸速:容易造成頂部內氣泡產生,而且會污染頂部; 4、試劑的揮發:吸揮發性高的試劑時,蒸汽進入頂部,內壓增大,結果