2013生物制藥工程論壇在滬舉行

　　繼2012生物制藥工程論壇成功召開之后，由生物谷主辦的2013生物制藥工程論壇于2013年5月14日再次在上海舉行。本屆峰會將重點關注生物制藥工程之細胞大規模培養、過程工藝設計及單次使用系統等熱點主題，繼續邀請科研機構及明星企業等知名專家、教授發表演講并現場互動答疑，充分分析探討相關技術進展以及應用現狀，分享經典案例及成功經驗。

上海交通大學 李榮秀教授

　　來自上海交通大學的李榮秀教授介紹了《抗體藥物仿生親和純化工藝及其制造經濟性分析》。

　　抗體類藥物以其有效性、高特異性和安全性在重大疾病的治療中發揮越來越重要的作用。傳統親和技術存在很多缺點，首先成本昂貴，如單克隆抗體本身就需要高度純化；其次壽命較短，主要由于其生物與化學性的不穩定性和難于維持結合活性所造成的脫落與降解；再次不能耐受在線去熱源、清潔和消毒并難于滿足生產的需求。而利用現代分子設計和合成技術發展的穩定小分子仿生親和配基則很好的解決了這一難題，仿生親和介質由于具有成本低廉、易于合成和純化、使用壽命長、能夠耐受苛刻的在位清洗等優勢，在下游純化工藝中扮演了重要角色。

仿生配體技術研究平臺

　　新型親和介質對多克隆藥物和單克隆藥物純化條件，通過DOE進行，并進行驗證；對3種不同的CHO表達的單克隆抗體樣品一步純化，純度均已經達到95%（SDS-PAGE,SEC-HPLC）以上。多克隆抗體經過一步目標蛋白流穿，一步目標蛋白吸附，兩步仿生親和層析純度也達到了97%以上（SDS-PAGE）。同時得到的目標抗體總收率均在90%以上，洗脫條件（pH4.3-4.5）比常規蛋白A介質吸附抗體的洗脫條件溫和，降低了洗脫抗體聚集和失活的風險。在親和介質對抗體的解離系數Kd和理論最大吸附量Qmax分別為2.25×10-6M和87.99mg抗體/g介質；在150cm/h的流速下，動態吸附量Q10%可達到28mg/ml介質；用0.5M NaOH在位清洗5個柱體積重復60次以上并未發現柱效有明顯降低。通過ESI-MS檢測并未發現配基泄露。用小鼠測定配基毒性發現耐受量是總配體密度的數百倍。質譜測定抗體純化過程中的雜質蛋白殘留發現仿生親和介質與蛋白A親和介質相當。

　　仿生親和介質大規模純化抗體藥物能夠保證較高的抗體回收率和純度，具有工業運用前景。

華東理工大學 李素霞教授

　　來自華東理工大學的李素霞教授帶來了《生物制藥的非動物源性》的報告。

　　李老師報告的主要內容包括背景介紹、大腸桿菌表達系統中的動物源性問題、動物細胞表達系統中的動物源性問題以及AOF生物藥物的發展方向四個方面。1970年代的支原體污染；1980年代的內毒素問題；1990年代的瘋牛病恐慌等提高了人們對于動物園形原料醫藥工業總應用的安全性的認識，為了減少已知的污染物如BSE和未知的污染，生物制藥公司促使細胞培養基生產商在選擇原料的時候提高對無動物源性原料的關注度。截止目前，要求無動物源性的培養基等，基于對無動物源性的認識不同，要求提供不同規格的無動物源性的培養基等，就無動物源性而言，可分為三個水平primary level，secondary level和tertiary level。最高水平為tertiary level無動物源性。我國在2010版藥典中也提高了對于動物源性病毒的關注度，例如要求檢查細胞培養用胰蛋白酶的病毒和牛血清等等。

　　AOF生物藥物的發展方向可能會有：無血清培養基、無蛋白培養基及其其它無動物源性原料的深入研發、推廣和應用，降低其成本；在疫苗生產過程中，從政策上，限制或禁止小牛血清的使用以提高安全性；加快我國非動物源性生物藥物的研發，替代傳統的第一代的動物源性的生物藥物；無血漿重組蛋白替代血液制品，如重組凝血酶替代血漿提取凝血酶、重組白蛋白替代人血漿提取的白蛋白等……

京天成生物技術（北京）有限公司總裁 孫樂博士

　　來自京天成生物技術（北京）有限公司的孫樂博士帶來了《抗體—藥物交聯物：高效，平民化的靶向腫瘤藥》的報告。

　　報告內容主要包括了兩部分：抗體—藥物偶聯物和抗體藥質量分析試劑。由于單抗誘導的免疫細胞毒性通常還不足以殺死實體瘤且用的劑量很大（每劑100~200mg）、價錢又相當之昂貴（每個病人每年4萬美元），因此現有的單抗藥并不理想，而抗體—藥物偶聯物則成了解決這一問題的關鍵。抗體—藥物偶聯物的三個重要因素為單抗、化學藥與偶聯劑。

　　EGFR是原癌基因c-erbB1的表達產物，在一些腫瘤細胞中常過表達，使EGFR成為具有良好前景的腫瘤診斷和治療的靶點。批準上市的抗EGFR的靶向治療藥物有：艾必妥，泰欣生（CIM h-R3）等單克隆抗體，是與內源性配體競爭結合EGFR，通過抑制酪氨酸激酶的激活、促進EGFR內化等作用產生抗腫瘤效應。雖然腫瘤抗體藥物研究有著諸多獨特的優勢和誘人的市場前景，但現有的EGFR藥物療效都有限。美國基因泰克將腫瘤特異性單抗Herceptin與小分子化療物DM1結合后，大大提高了抗體藥的療效，今年有望上市。

　　孫博士說到：過去幾年，我們研發出眾多針對腫瘤標志物比如EGFR,EGFR VIII，VEGF,PDGF,CEA,PSA,CA15-3等的特異性單抗。在此基礎上，我們將一株抗EGFR-LA22單抗與化療藥物偶聯，實驗表明這種新型抗EGFR腫瘤靶向藥物-LA22單抗藥物偶連體，在體內抑制腫瘤的生長明顯優于艾必妥-MMC，且這種新型抗EGFR腫瘤靶向藥物-LA22單抗藥物偶連體抑制腫瘤的生長不受K-RAS突變基因限制。

主題訪談

　　主題訪談《生物制藥過程工藝與質量控制》，來自甘肅萬洲健順生物科技公司總裁羅順先生、中美奧達生物技術（北京）公司生產總裁孫雷先生、上海交通大學李榮秀教授和華東理工大學生物工程學院李素霞教授參與討論。

上海復宏漢霖生物技術有限公司總裁 劉世高先生

　　來自上海復宏漢霖生物技術有限公司的劉世高先生介紹了《單次使用系統技術：質量和監管考慮》。

　　劉先生的報告內容包括了四個方面：單次使用系統技術的介紹及其優缺點；質量考慮：過程評估/產品通用性；監管考慮和總結。

　　制造生物制劑使用的單次使用系統技術的采用，包括治療性單克隆抗體，已成為在生物制藥行業的發展趨勢。由工業提高單次使用系統技術采用的主要原因有：強化質量成本率，減少交叉污染的風險，更大的操作靈活性，減少水和能源消耗，建立制造設施的速度。為了生物制劑GMP生產中單次使用系統技術的成功采用和實施，在產品開發早期階段建立一種健全完善的QA策略和計劃是非常關鍵，使質量可以在產品許可證的申請之前達到監管要求。

　　報告將列出各種單次使用系統技術相關的主要的質量問題和風險，并提出解決這些質量監管問題和風險的一些建議。報告尤其關注一下幾個方面：主要的安全和質量問題；如何解決萃取物和溶出物的問題；環保方面的問題以及動物源性。

藥明康德公司 李錦才博士

　　來自藥明康德生物技術有限公司的李錦才博士介紹了《一次性生物反應器的發展前景及挑戰》。

　　報告包括了背景介紹、一次性反應器技術的歷史及主要產品特點、藥明康德一次性反應器的應用、一次性反應器使用中的問題和挑戰以及技術發展前景。

　　一次性生物反應器的應用在過去的5年里得到了迅速的擴大。目前新添的50-2000升規模的動物細胞培養反應器中，一次性反應器已經占了大多數。小規模反應器中一次性技術也在迅速發展，隨著需求的不斷擴大，新的產品和技術也在不斷涌現，給生物制藥公司提供了越來越多的選擇。同時，隨著使用量和使用面的擴大，各方面的問題也陸續出現，尤其是細胞生長在一次性反應器中的問題。不同產品，不同袋子材料，甚至相同材質的不同規模袋子，都有可能導致不同的影響，基于這些和其它問題，供應商也在積極采取解決方案，并和袋子原材料的供應商加強合作，力求保障高質量，高穩定性的產品供應。

賽多利斯公司中國市場部總監 王旭宇女士

　　來自賽多利斯公司的中國市場部總監王旭宇女士介紹了《生物制藥工藝過程控制技術》。

　　PAT實施的主要目的是加深對工藝的理解進一步優化工藝節省成本，PAT是基于風險分析的結合工藝分析儀、工藝控制軟件、DoE（實驗設計）和MVA（多變量分析）的一個整體的系統，通過了解產品的關鍵屬性，確認工藝的關鍵參數，應用相關的工具對工藝進行控制，保證生產的安全性，穩定性并節省成本。賽多利斯提供前面的PAT工具，包括了感應器、分析系統和自動化軟件等，這些技術可以應用在藥物的研發、中試和生產的各個階段。

　　DoE的主要目的就是合理的設計實驗，用最少量的實驗快速找到影響實驗結果的關鍵因子及合適的水平范圍，達到優化實驗條件提高產量節約成本的目的。在生物技術上游工藝中主要用在培養基的優化，關鍵工藝參數的篩選和穩定性測試上。當然要增加DoE的自動化操作，有效整合的數據采集和統計學分析軟件是比不可少的。MVA多變量分析可以使整個生產過程的數據用統計學的手段進行分析，使數據壓縮并可視化，找到數據之間的相關性，趨勢及時發現潛在風險，從而控制整個生產過程，保證產品的質量。目前國際知名的制藥企業如Pfizer、Amgen及Bilgen Idec都不同程度的應用了相關技術。

主題談論

　　主題討論《單次使用系統（single-use）》，來自上海復宏漢霖生物技術公司總裁劉世高先生、藥明康德新藥開發公司高級主任李錦才先生、奧達國際生物技術（北京）公司副總監韓向宗先生和賽多利斯中國市場總監王旭宇女士參與談論，并回答了現場參會者的問題，各位嘉賓也互相交流了自己的觀點與想法，給到在場參會者許多有價值的參考。