肝臟細胞RNA的提取原理、材料和方法
一.原理 RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆和基因表達分析等實驗是至關重要的,如Northern印跡及雜交分析、cDNA合成等實驗的成效在很大程度上取決于RNA的質量。利用提取的 RNA人們可以對特定的基因表達進行定量的檢測,從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。通常一個典型的哺乳動物細胞約含有10-5μgRNA ,其中80%~85%為rRNA(主要是28S、18 S和5.8 S、5S四種類型);10%~15%為tRNA和核內小分子RNA。 這些高峰度的RNA的大小和序列確定,可通過凝膠電泳、密度梯度離心、陰離子交換層析和高壓液相層析(HPLC)分離。相反,占RNA總量1%~5 ......閱讀全文
肝臟細胞RNA的提取
一.原理RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是至關重要的,
肝臟細胞RNA的提取操作方法
一.原理RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是
肝臟細胞RNA的提取原理、材料和方法
一.原理?RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆和基因表達分析等實驗是至關重要的,如
Nature重磅!利用單細胞RNA測序構建人類肝臟細胞圖譜
肝臟是人體最大、功能最多的器官之一,在人體的新陳代謝及免疫過程中發揮著關鍵作用。更值得關注的是,肝臟還是人體唯一一種僅需原體積的25%,就能夠完全再生的內臟器官。另外,包括脂肪肝、肝癌及肝炎在內的各類肝病是當今世界最大的健康問題之一,也是導致死亡的主要原因。 盡管肝臟對人類健康極為重要,但健康
Nature重磅!利用單細胞RNA測序構建人類肝臟細胞圖譜
肝臟是人體最大、功能最多的器官之一,在人體的新陳代謝及免疫過程中發揮著關鍵作用。更值得關注的是,肝臟還是人體唯一一種僅需原體積的25%,就能夠完全再生的內臟器官。另外,包括脂肪肝、肝癌及肝炎在內的各類肝病是當今世界最大的健康問題之一,也是導致死亡的主要原因。 盡管肝臟對人類健康極為重要,但健康
動物肝臟RNA的制備(苯酚法)和純度測定2
試劑和器材試劑1.DNA標準溶液(須經定磷確定其純度):取小牛胸腺DNA鈉鹽以0.01mol/L氫氯化鈉溶液配成200 μg/mL的溶液。2.樣品待測液:準確稱取DNA干燥制品以0.01mol/L氫氯化鈉溶液配成100 μg/mL左右的溶液。在測定RNA制品中的DNA含量時,要求RNA制品的每mL待
動物肝臟RNA的制備(苯酚法)和純度測定1
原理細胞內大部分RNA 均與蛋白質結合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分離RNA時必須使RNA與蛋白質解離,并除去蛋白質。除去蛋白質的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液劇烈振蕩,使蛋白質變性。(2)在冷的2mol/L鹽酸胍溶液中沉淀RNA,大部分蛋白質仍處于溶解狀態。(3)以去污劑如十二烷基硫
Nature:揭示肝臟干細胞來源
霍華德休斯醫學研究所(HHMI)的科學家們發現了生成功能性肝細胞的肝臟干細胞。這一研究工作解開了關于肝臟中新細胞起源的一個長期的謎題,即便在健康器官中隨著細胞的死亡肝臟也必須不斷地補充新細胞。 研究的領導者、HHMI研究員、斯坦福大學Roel Nusse說:“我們解開了一個很老的問題。我們證實
參與肝臟修復的細胞來源
參與肝臟修復的細胞可能有三個來源:一是通過肝細胞自身的有絲分裂來彌補死亡的肝細胞,這在正常的肝細胞代謝及輕度的肝臟損傷中起主要作用;二是在比較較嚴重的肝損情況下,肝臟的干細胞被激活并向肝細胞分化以修復肝臟;最近的研究顯示骨髓中的造血干細胞也具有向肝細胞分化能力,提示可作為肝臟細胞修復第三個潛在來源1
人類發育中肝臟的細胞圖譜揭秘人類胎兒肝臟造血
在一項新的研究中,英國研究人員在世界上首次構建出人類發育中肝臟的細胞圖譜,它提供了關于胎兒中血液和免疫系統如何產生的重要見解。這種圖譜描繪了在妊娠的頭三個月和第二個三個月之間的發育中肝臟的細胞景觀變化,包括來自肝臟的干細胞如何播種到其他組織,以支持生長所需的高氧氣需求。相關研究結果近期發表在Na
日開發高效培育肝臟細胞技術
日本科學家開發出一種用胚胎干細胞高效培育肝臟細胞的技術,能夠使90%的小鼠胚胎干細胞發育成肝臟細胞,效率相當于原有方法的約9倍。 這項技術是日本東京工業大學教授赤池敏宏率領的研究小組開發的,研究成果發表在最新一期《生物材料》雜志上。新技術的關鍵是利用特殊的培養基,使胚胎干細
修復受損肝臟的新型細胞發現
顯微鏡圖像顯示,“領導細胞”會快速遷移到傷口邊緣,其中“領導細胞”的細胞核呈白色,細胞膜呈紅色。圖片來源:美國趣味科學網站科技日報訊?(記者劉霞)英國科學家在肝臟內發現了一種被稱為“領導細胞”的新型細胞。它們在肝臟受損后進行自我修復方面發揮了重要作用。研究人員表示,這一發現有望催生新的肝病療法。相關
Cell子刊綜述:肝臟干細胞
肝臟是人體內具有獨特再生能力,維持體內平衡的一個關鍵器官。成熟肝細胞具有明顯的損傷修復功能,因此科學家們一直希望能了解這一過程中成體肝臟干細胞的作用。同時發育中肝臟的干細胞或者說祖細胞也是一個研究熱點,解析這些具體的分子機制將有助于在細胞治療和藥物篩選過程中,體外生成功能性肝細胞。 來自日本
肝臟上皮樣血管周細胞瘤
患者男性,65歲。主訴因“丙肝抗體陽性15年余,間斷肝區不適3年余,加重1個月”入院。患者15年前體檢時發現肝功能異常,丙肝抗體陽性,查病毒復制活躍,予干擾素抗病毒治療6個月,丙肝RNA轉陰。其后每年定期復查肝功能正常、丙肝RNA<測定值。3年前患者無明顯誘因出現肝區隱痛不適,呈間斷發作,持續約數秒
細胞RNA含量檢測
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 展開
提取懸浮細胞RNA
提取RNA器械:離心管2支,吸管4個,酒精燈,打火機,記號筆,200ul,1000UL槍,DEPC泡過的槍頭EP管,紫外照過的手套。濾紙,DEPC純水(750ml無水乙醇+150mlDEPC水,劇烈振蕩,使勁的搖晃,直至混勻),氯仿,75%酒精,異丙醇,Trizol,預冷的離心機(兩種),EP管架(
細胞RNA含量檢測
實驗步驟展開
細胞RNA含量檢測
細胞RNA含量檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 ? ? ? ?
RNA提取心得(組織RNA提取和培養細胞的RNA提取)
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后
干細胞與肝臟修復和再生2
肝臟干細胞的提出研究發現,肝臟的再生能力很強。1958年 wilson等證實了肝臟干細胞的存在。在肝受損情況下,肝臟干細胞被激活,維持了肝臟的正常功能。但是在肝臟持續受損時,肝臟干細胞的再生能力被抑制和耗竭。近年來,骨髓干細胞的研究獲得了巨大進展,也為慢性肝病的治療帶來了新的希望。1999年,美國學
調控肝臟癌變的細胞因子找到
記者從廈門大學獲悉,該校細胞應激生物學國家重點實驗室周大旺教授團隊發現和鑒定了血液中存在的一種細胞因子,能夠通過特定機制調控膽汁酸代謝,進而控制肝臟再生、尺寸大小及癌變,為調控肝臟再生臨床應用及預防肝癌產生提供了重要理論依據。該最新研究成果日前在國際期刊《發育細胞》上發表。 近年來,Hippo
干細胞與肝臟修復和再生1
我國是一個肝病大國,除慢性乙肝感染者9300萬外,還有丙肝、脂肪肝、免疫肝、藥物肝等。估計大約平均每6-7個人就有一個慢性肝病患者。這中間會有一部分人由于各種原因由慢性肝病發展為肝硬化,最后成為終末期肝病。而終末期肝病的臨床治療中,肝移植被認為是唯一有效的治療手段。但是由于供肝缺乏,只有約萬分之一的
干細胞與肝臟修復和再生3
干細胞的作用機制目前,干細胞具體的作用機制仍不十分明確。韓英教授綜合以往的研究,提出了自己的觀點。她認為:干細胞主要通過三方面在肝病治療中發揮作用:1.通過轉分化為肝細胞發揮替代作用;2.細胞融合機制;3.干細胞可分泌多種細胞因子,參與肝損傷修復,即干細胞的旁分泌機制。
“定居肝臟”的自然殺傷細胞的發現
自然殺傷細胞(NK細胞)是固有免疫系統的重要成員,被譽為腫瘤和病毒的“天生殺手”。科學家以往對NK細胞的研究以骨髓、胸腺、脾臟、淋巴結等“專職”淋巴器官和血液為主體,但這些部位與疾病高發組織器官的免疫特性相差甚遠。在國家自然科學基金重大研究計劃“組織器官區域免疫特性與疾病”支持下,我國學者發現了“定
Science:內皮細胞可控制肝臟再生
內皮細胞并不僅僅只會對外源性刺激做出被動響應,它們自身還以一種非常積極的方式控制了器官功能。現在來自德國癌癥研究中心和海德堡大學的科學家們發現,在遭受損傷或部分手術切除之后內皮細胞可通過一種復雜的生長調控機制來控制肝臟再生。 密集的動脈、毛細血管和靜脈網絡使得身體內的每個細胞距離最近的血管
肝病患者皮膚細胞培育出肝臟細胞
英國劍橋大學8月25日發布公報說,該校研究人員成功利用肝病患者的皮膚細胞培育出肝臟細胞,這樣得到的肝臟細胞與病人肝臟中的細胞高度相似,將有助于對特定肝病患者進行研究并開展治療。 公報說,研究人員從7名有遺傳性肝臟疾病的患者身上提取了皮膚細胞,先將其改變為誘導多功能干細胞,然后培
日本首次利用皮膚細胞制造出肝臟干細胞
日本國立癌癥研究中心日前說,該中心研究員石川哲也率領的研究小組,利用人體胃和皮膚細胞,成功制造出肝臟干細胞。據稱,這在世界上尚屬首次。 研究人員介紹說,肝臟細胞難以在體外培養,但他們制造出的這種干細胞可以在體外大量增殖,因此可以用于肝炎病毒研究,推動個性化新藥開發。
日首次利用皮膚細胞制造出肝臟干細胞
日本國立癌癥研究中心日前說,該中心研究員石川哲也率領的研究小組,利用人體皮膚和胃細胞,成功制造出肝臟干細胞。據稱,這在世界上尚屬首次。 研究人員介紹說,肝臟細胞難以在體外培養,但他們制造出的這種干細胞可以在體外大量增殖,因此可以用于肝炎病毒研究
細胞化學詞匯RNA沉默
中文名稱:基因沉默外文名稱:RNA silencing定?????? 義:基因沉默是指在真核生物(植物、動物、真菌)中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。
細胞化學詞匯核RNA
中文名稱:核RNA英文名稱:nuclear RNA定 義:細胞核內的RNA。如核內不均一RNA、核小RNA、核仁小RNA等。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)