PHA淋巴細胞轉化試驗的檢查過程
操作方法: 1.取無菌肝素抗凝血0.lml,加入1.8ml細胞培養液中,同時加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1,對照管不加PHA,將細胞置37℃、5%CO2培養3d,每天搖動1次。 2.培養結束時吸棄大部分上清液,加入8.5g/L NH4Cl 4ml混勻,置37℃水浴10min。 3.2500r/min離心10min,棄上清液,沉淀加5ml固定液,室溫作用5min。 4.2500r/min離心10min,棄上清液,留0.2ml沉淀細胞制片,迅速吹干。 5.吉姆薩染液染色 10-20min,水洗,干燥。 6.油鏡計數200個淋巴細胞中轉化的細胞數,計算轉化率。 結果判斷: 1.淋巴母細胞的形態學標準 細胞核的大小、核與胞漿的比例、胞漿染色性及核的構造與核仁的有無。 ⑴成熟的小淋巴細胞:與未經培養的小淋巴細胞大小一樣,為6-8μm,核染色致密,無核仁,核與胞漿比例大,胞漿染色為輕度嗜堿性。 ⑵過渡型......閱讀全文
PHA淋巴細胞轉化試驗的檢查過程
操作方法: 1.取無菌肝素抗凝血0.lml,加入1.8ml細胞培養液中,同時加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1,對照管不加PHA,將細胞置37℃、5%CO2培養3d,每天搖動1次。 2.培養結束時吸棄大部分上清液,加入8.5g/L NH4Cl 4ml混勻,置37℃水浴10min。
PHA淋巴細胞轉化試驗的注意事項及檢查過程
注意事項 1.培養基成分對轉化率影響較大,注意其有效期。 2.小牛血清用前需滅活。 3.培養時要保證有足夠的氣體,一般10ml培養瓶內液體總量不要超過2ml。 4.PHA劑量過大對細胞有毒性,太小不足以刺激淋巴細胞轉化,試驗前應先測定PHA轉化反應劑量。 5.實驗中要嚴格無菌操作,防止
什么是PHA淋巴細胞轉化試驗
PHA淋巴細胞轉化試驗 是 T淋巴細胞與有絲分裂原在體外共同培養時,受到后者的刺激可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細胞,并進行有絲分裂的試驗方法。
臨床化學檢查方法介紹PHA淋巴細胞轉化試驗介紹
PHA淋巴細胞轉化試驗介紹: PHA淋巴細胞轉化試驗 是 T淋巴細胞與有絲分裂原在體外共同培養時,受到后者的刺激可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細胞,并進行有絲分裂的試驗方法。PHA淋巴細胞轉化試驗正常值: 計數淋巴細胞200個,識別淋巴母細胞(超過正常淋巴細胞2-4
PHA淋巴細胞轉化試驗的臨床意義
PHA淋巴細胞轉化率下降,是細胞免疫功能降低的反應。此項檢查,皮膚科多用于疾病分型(如麻風)、病情判斷(如皮膚惡性腫瘤)、藥物療效觀察,以及某些免疫缺陷性和變態反應性皮膚病的研究。 異常結果: 免疫功能降低引發的各種癥狀 需要檢查的人群: 疑似麻風、皮膚惡性腫瘤癥狀的病人
PHA淋巴細胞轉化試驗的正常值
計數淋巴細胞200個,識別淋巴母細胞(超過正常淋巴細胞2-4倍,核膜清晰,核染質疏松而成細網狀,核仁明顯,胞漿豐富,呈嗜堿性)、過渡型淋巴細胞(體積變化不大,僅為上述明顯核變化)、小淋巴細胞(體積稍大于紅細胞,核染質致密,無核仁),統計其轉化率。皮膚科轉化率正常值大于58%。
PHA淋巴細胞轉化試驗的注意事項
1.培養基成分對轉化率影響較大,注意其有效期。 2.小牛血清用前需滅活。 3.培養時要保證有足夠的氣體,一般10ml培養瓶內液體總量不要超過2ml。 4.PHA劑量過大對細胞有毒性,太小不足以刺激淋巴細胞轉化,試驗前應先測定PHA轉化反應劑量。 5.實驗中要嚴格無菌操作,防止污染。 不
免疫學實驗PHA淋巴細胞轉化試驗介紹
PHA淋巴細胞轉化試驗介紹: PHA淋巴細胞轉化試驗 是 T淋巴細胞與有絲分裂原在體外共同培養時,受到后者的刺激可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細胞,并進行有絲分裂的試驗方法。 PHA淋巴細胞轉化試驗正常值: 計數淋巴細胞200個,識別淋巴母細
PHA淋巴細胞轉化試驗的臨床意義及注意事項
臨床意義 PHA淋巴細胞轉化率下降,是細胞免疫功能降低的反應。此項檢查,皮膚科多用于疾病分型(如麻風)、病情判斷(如皮膚惡性腫瘤)、藥物療效觀察,以及某些免疫缺陷性和變態反應性皮膚病的研究。 異常結果: 免疫功能降低引發的各種癥狀 需要檢查的人群: 疑似麻風、皮膚惡性腫瘤癥狀的病人 注意
PHA淋巴細胞轉化試驗的正常值及臨床意義
正常值 計數淋巴細胞200個,識別淋巴母細胞(超過正常淋巴細胞2-4倍,核膜清晰,核染質疏松而成細網狀,核仁明顯,胞漿豐富,呈嗜堿性)、過渡型淋巴細胞(體積變化不大,僅為上述明顯核變化)、小淋巴細胞(體積稍大于紅細胞,核染質致密,無核仁),統計其轉化率。皮膚科轉化率正常值大于58%。 臨床意
淋巴細胞轉化率的檢查過程
傳統的檢測淋巴細胞轉化率的方法是將全血或所分離的淋巴細胞與促有絲分裂素一起培養一定的時間,觀察淋胞巴細胞轉化為母細胞的比例,從而確定淋巴細胞的轉化率。
用-PHA-刺激淋巴細胞
? ? ? ? ? ? 實驗材料 添加10%FBS的培養液或自體血清 植物血凝素 秋水仙酰胺 試劑、試劑盒 KCl
用-PHA-刺激淋巴細胞
實驗材料 添加10%FBS的培養液或自體血清植物血凝素秋水仙酰胺試劑、試劑盒 KCl儀器、耗材 試管或普通容器顯微鏡下使用的載玻片實驗步驟 1. 取在方案 27.1 中步驟 7 清洗的細胞,用 HEPES 或 CO2 緩沖的 DMEM、CMRL 1066 或添加 10 % 自體血清或 FBS 的 R
淋巴細胞轉化試驗
實驗方法原理 T、B細胞在抗原或有絲分裂原的刺激下可轉化為淋巴母細胞,借此可了解淋巴細胞對異物刺激的反應性。儀器、耗材 試管吸管細胞培養物PHA瑞氏染液載玻片實驗步驟 1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴細胞分離液分離淋巴細胞;2. 調整細胞濃度為2×106/毫升;3. 加PHA,使終濃度為1%;4
淋巴細胞轉化試驗
實驗方法原理T、B細胞在抗原或有絲分裂原的刺激下可轉化為淋巴母細胞,借此可了解淋巴細胞對異物刺激的反應性。儀器、耗材試管吸管細胞培養物PHA瑞氏染液載玻片實驗步驟1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴細胞分離液分離淋巴細胞;2. 調整細胞濃度為2×106/毫升;3. 加PHA,使終濃度為1%;4. 5
淋巴細胞轉換試驗檢查過程
1.備齊用物,標本容器上貼好標簽,核對無誤后向患者解釋以取得合作。露出患者手臂,選擇靜脈,于靜脈穿刺部位上方約4~6cm處扎緊止血帶,并囑患者握緊拳頭,使靜脈充盈顯露。 2.常規消毒皮膚,待干。 3.在穿刺部位下方,以左手拇指拉緊皮膚并固定靜脈,右手持注射器,針頭斜面向上與皮膚成15度~30
淋巴細胞轉化試驗(MTT)
(一)原理:四甲基偶氯唑鹽(MTT)可作為線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當有活細胞存在時,線粒體內琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成紫蘭色的甲臢,將結晶的甲臢溶解釋放后,可根據所測的OD值反映活細胞的數量和活性,從而推知待測樣品的水平。 (二)材料: MTT、電子天平、PBS液、二甲基亞砜、
T-淋巴細胞轉化試驗
實驗概要本文介紹了T 淋巴細胞轉化試驗(T Lymphocyte Transformation Test)的基本原理和操作步驟。實驗原理T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低
T-淋巴細胞轉化試驗
一、 基本原理T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一。淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法和同位素法三種。
淋巴細胞轉化試驗的目的
淋巴細胞轉化試驗是檢測細胞免疫功能的經典試驗。基本原理是采用T淋巴細胞敏感 的刺激物在體外刺激T淋巴細胞,T淋巴細胞受到刺激后可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細 胞,并進行有絲分裂。用形態學法或放射性?核素法檢測T細胞的增殖程度,并以此評定相應的細胞功能。
淋巴細胞轉換試驗(ltt)的檢查過程
淋巴細胞轉換試驗的技術:形態學檢查法。加分裂原共同培養后,在油鏡下,觀察淋巴細胞的形態變化。計算轉換 為母細胞的百分數。
淋巴細胞毒試驗的檢查過程
本試驗方法有形態檢查法和同位素釋放法兩種。前者不需特殊設備,只需用顯微鏡計數靶細胞的存活數,操作比較方便。后者則是用125I-脫氧脲嘧啶核苷或51Cr標記靶細胞,以放射性同位素的釋放作為靶細胞受損傷的指標。此法需要特殊設備如液閃儀等,但可自動測量,結果重復性好。
方案27.2-用-PHA-刺激淋巴細胞
? ? ? ? ? ? 實驗材料 添加10%FBS的培養液或自體血清 植物血凝素 秋水仙酰胺 試劑、試劑盒 KCl
方案27.2-用-PHA-刺激淋巴細胞
實驗材料添加10%FBS的培養液或自體血清植物血凝素秋水仙酰胺試劑、試劑盒KCl儀器、耗材試管或普通容器顯微鏡下使用的載玻片實驗步驟1. 取在方案 27.1 中步驟 7 清洗的細胞,用 HEPES 或 CO2?緩沖的 DMEM、CMRL 1066 或添加 10 % 自體血清或 FBS 的 RPMI
淋巴細胞轉化率的注意事項及檢查過程
注意事項 不合宜人群:一般無特殊人群 檢查前禁忌:一定要配合醫生把姓名寫正確,工整,避免同名或相類似名混淆帶來不便。注意了這些,抽血會更方便、更迅速,能更好地為自己節約診斷時間。 檢查時要求:不要穿袖口過小、過緊的衣服,以避免在抽血時衣袖卷不上來或抽血后衣袖過緊,引起手臂血管血腫。不同的化
淋巴細胞轉化試驗是什么
人類淋巴細胞在體外與特異性抗原(如結核菌素)或非特異性有絲分裂原(如植物血凝素,PHA)等一起孵育,T細胞即被激活而向淋巴母細胞轉化。T細胞轉化過程可伴隨有DNA、RNA、蛋白質的合成增加,最后導致細胞分裂。 在光學顯微鏡下可計數轉化后的淋巴母細胞數,也可用氚標記的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)
什么是淋巴細胞轉化試驗
淋巴細胞轉化試驗是檢測細胞免疫功能的經典試驗。基本原理是采用T淋巴細胞敏感 的刺激物在體外刺激T淋巴細胞,T淋巴細胞受到刺激后可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細 胞,并進行有絲分裂。用形態學法或放射性 核素法檢測T細胞的增殖程度,并以此評定相應的細胞功能。
T淋巴細胞轉化試驗介紹
T淋巴細胞轉化試驗:體外培養時,T淋巴細胞在有絲分裂原如植物血凝素(PHA)或刀豆素A(CONA)的刺激下,代謝活躍,增加蛋白質、RNA和DNA的合成,從而轉化為母細胞,部分細胞發生有絲分裂。從而反應T淋巴細胞的免疫功能。T淋巴細胞轉化試驗(T lymphocyte transformation
淋巴細胞轉化試驗方法
T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)或特異性抗原刺激后,可出現代謝旺盛、蛋白質和核酸合成增加、細胞體積增大并能進行分裂的淋巴母細胞,此稱為淋巴細胞轉化現象。淋巴細胞轉化率的高低,可以反映機體的細胞免疫水平,因此,可作為測定機體免疫功能的指標之一。本實驗采用形態學方法進行淋
混合淋巴細胞培養試驗的檢查過程
檢查過程(1)供體淋巴細胞的制備 新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中,輕穩加在液面上 2000 r/min離心20 min,吸取中間霧狀淋巴細胞層,生理鹽水洗滌2次,臺盼藍染色,計數板計數。調整細胞密度為2×10^9/L,分成3管,各自離心,留取沉淀。 每