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一、沉淀法 沉淀法也稱溶解度法。其純化生命大分子物質的基本原理是根據各種物質的結構差異性來改變溶液的某些性質，進而導致有效成分的溶解度發生變化。 1、鹽析法 鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚并從溶液中析出。 2、有機溶劑沉淀法 有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。 3、蛋白質沉淀劑 蛋白質沉淀劑僅對一類或一種蛋白質沉淀起作用，常見的有堿性蛋白質、凝集素和重金屬等。 4、聚乙二醇沉淀作用 聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉淀作用。 5、選擇性沉淀法 根據各種蛋白質在不同物理化學因子作用下穩定性不同的特點，用適當的選擇性沉淀法，即可使雜蛋白......閱讀全文
淺述蛋白質分離純化的新技術摘 要： 本文主要介紹了濁點萃取法、置換色譜法、親和層析法、親和色譜法、凝膠電泳、雙水相萃取等蛋白質的最新分離純化技術，綜和近年來國內外的一些研究結果，結合實際應用的例子，分析了各種分離純化方法的優點，同時指出其不足之處。文章最后展望了蛋白質分離純化技術的發展趨勢。&nbs
科學家利用層析系統開發高效的蛋白分離介質 注射疫苗出現副作用，使用血液制品感染疾病，熱銷的生物制品緊急召回……這樣的消息接連見諸報端。這在國家生化工程技術研究中心(北京)首席科學家蘇志國看來，出現上述問題的背后，可能都是生物分離純化技術不過關在“搗鬼”。 “生物制藥對純度要求頗高，需要通
實驗步驟在評價樣品純度之前，首先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。
蛋白質純度測定實驗 實驗步驟 在評價樣品
確定沉淀蛋白質所需硫酸銨濃度的方法將少量樣品冷卻到0～5℃，然后攪拌加入固體硫酸銨粉末，見蛋白質產生沉淀時，離心除去沉淀，分析上清液確定所要蛋白質的濃度，如它仍在溶液中則棄去沉淀，再加更多的硫酸銨于上清液中，直到產生蛋白質沉淀時止。以所要提取的蛋白質在溶液中的濃度對硫酸銨濃度作圖，得沉淀曲線，找出蛋
MS/MS操作模式 串聯質譜儀通常使用的都是離子模式來鑒定蛋白質的氨基酸序列。目前所有的MS/MS質譜儀都具有該功能。不過其它特殊的質譜儀也具有MS/MS功能。如果要發現蛋白質中的某個功能基團則需要用到母離子掃描功能或者中性丟失掃描功能，而這就必須用到三重四級桿質譜儀，如Q-Q-Q質譜儀，或四
預計在新奇的一級分子和生物仿制藥實體方面將會有突出的增長。一些進步的是改良的分析、開發和相互作用。現在已有許多用于去除關的方法，包括凍干、反向萃取、溶質析出，precipitation、透析(溶劑交換） 、超濾和層析技術。值得注意的是，在眾多微和設備發展的支持下，小型化和高通量的蛋白質分析取得了極大
最近又有幾項有關質譜儀的最新進展問世，這些新成果的出現又給我們的生物大分子研究工作補充了“彈藥”。在蛋白質測序方面，基于碰撞誘導裂解技術（CID），又新出現了可變裂解技術（Alternate fragmentation technique），該新技術是基于處在碰撞池中的離子具有的電子傳遞特性開發出來
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗 實驗步驟 一、層
傳統的和最新的蛋白質組學研究策略雖然到目前為止，還沒有一種蛋白質組學研究策略能夠對某個蛋白質組進行常規的、完整的分析，但是現在的技術已經非常強大，我們相信，很快就能進行全蛋白質組學研究了。而且，對某個亞蛋白質組（比如某個細胞器或亞細胞結構的蛋白質組）進行研究早就已經不是什么難題了，這已經成為了一種常
（二）乳過氧化物酶法（LPO） 本法反應溫和，對抗原、抗體免疫活性影響小，已被廣泛應用。缺點是標記率較低，一般為20～40%。 1．原理此法是利用乳過氧化物酶（Lactoperoxidase）有促進微量過氧化氫對125I-的氧化作用，生成125I+，并標記在多肽、蛋白質酪氨酸分子上。 2．方法
實驗步驟一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況，而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進
實驗步驟 一、化學法和酶法細胞裂解 微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況，而且應用這些
酶的分離純化方法簡介生物細胞產生的酶有兩類：一類由細胞內產生后分泌到細胞外進行作用的酶，稱為細胞外酶。這類酶大都是水解酶，如酶法生產葡萄糖所用的兩種淀粉酶，就是由枯草桿菌和根酶發酵過程中分泌的。這類酶一般含量較高，容易得到；另一類酶在細胞內產生后并不分泌到細胞外，而在細胞內起催化作用，稱為細胞內酶，
在評價樣品純度之前，首-先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。純化過
生物細胞產生的酶有兩類：一類由細胞內產生后分泌到細胞外進行作用的酶，稱為細胞外酶。這類酶大都是水解酶，如酶法生產葡萄糖所用的兩種淀粉酶，就是由枯草桿菌和根酶發酵過程中分泌的。這類酶一般含量較高，容易得到；另一類酶在細胞內產生后并不分泌到細胞外，而在細胞內起催化作用，稱為細胞內酶，如檸檬酸、肌苷酸、味
質譜分析法是蛋白質研究領域和生物大分子研究領域中最重要的分析技術。由于我們對蛋白質鑒定、定量和分析的要求越來越高，希望檢測技術的靈敏度也越來越高，同時能夠對更為復雜的樣品進行分析處理，因此推動了質譜檢測技術的發展，出現了一大批新興的質譜分析方法和儀器。本文將對近幾年質譜技術的發展以及質譜技術在蛋白質
（一）大咖授課，機會難得 分離純化行業的泰斗級專家黃駿雄老師與擁有多年蛋白純化培訓和項目指導經驗的姜韜老師，作為主講嘉賓，親自授課。為確保培訓效果，姜韜老師與黃駿雄老師在九月上旬親臨納微科技，查看實驗培訓的設備與環境，為確保培訓課程能達到最佳效果，帶領工作人員完成預實驗。 （二）小班授課，最
在生命科學研究工作中有一個重要問題，就是發現、鑒定蛋白質并弄清楚它們的一級結構。知道了蛋白質的氨基酸序列信息，我們就可以通過遺傳密碼將其與編碼序列對應起來，從原則上來說，也就將細胞的生理學與遺傳學聯系起來了。發現、鑒定出了一個蛋白質就好像給我們打開了一扇窗，透過這個窗口，我們就能夠對復雜的細胞調控網
離子回旋加速器與軌道離子阱質譜儀 隨著功能強大的帶有外部離子源的傅里葉變換-離子回旋加速器(FT-ICR)質譜儀的出現以及商業化，我們在質譜儀的分辨率與準確性方面取得了質的飛躍。有了這種新型的質譜儀，我們現在可以對ppm級乃至亞ppm級的樣品進行分析了。該質譜儀的高分辨率特性不
串聯質譜儀通常使用的都是離子模式來鑒定蛋白質的氨基酸序列。目前所有的MS/MS質譜儀都具有該功能。不過其它特殊的質譜儀也具有MS/MS功能。如果要發現蛋白質中的某個功能基團則需要用到母離子掃描功能或者中性丟失掃描功能，而這就必須用到三重四級桿質譜儀，如Q-Q-Q質譜儀，或四級桿離子阱質
蛋白質、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補體、脂多糖、細菌外毒素和核酸等均為可溶性抗原，它們有相當部分來源于組織和細胞，成分復雜。制備這類免疫原時，首先須將組織和細胞破碎，然后再從組織和細胞勻漿中提取目的蛋白或其他抗原，提純的抗原需鑒定后才能用做免疫原。 一、組織勻漿的制備用于制備免疫原的材料必須是
分析測試百科網訊 2015年8月16日，中國儀器儀表學會分析儀器分會樣品制備專業委員主辦的第二屆全國樣品制備學術報告會在貴陽舉行。本次大會與中國儀器儀表學會分析儀器分會2015學術年會同期舉辦，參會200余人。張玉奎院士擔任會議名譽主席，關亞風研究員擔任會
質譜分析法是蛋白質研究領域和生物大分子研究領域中最重要的分析技術。由于我們對蛋白質鑒定、定量和分析的要求越來越高，希望檢測技術的靈敏度也越來越高，同時能夠對更為復雜的樣品進行分析處理，因此推動了質譜檢測技術的發展，出現了一大批新興的質譜分析方法和儀器。本文將對近幾年質譜技術的發展以及質
AKTAavant蛋白質分離純化系統獲得“2010中國國際工業博覽會銀獎” 承接世博會在上海成功舉辦，2010中國國際工業博覽會于11月9日 -13日在上海新國際博覽中心舉行。中國工博會是由國家發展和改革委員會、商務部、工業和信息化部、科學技術部、教育部、中國科學院、中國工程院
（一）醋酸纖維素薄膜電泳 醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄 膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小，幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象，又因為膜的親水性比較小，它所容納的緩沖液也少，電泳時電流的大部分由樣 品傳導，所以分離速度快，電泳時間短，樣品
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。 電泳技術的
電泳技術簡介 電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。
一、引言在八十年代以前，生物大分子（特別是核酸、蛋白）用離心方法分離純化占有很重要的地位。用分析超離心方法測定生物大分子的分子量、沉降系數、擴散系數、微分比容等在生物化學實驗中也占有一席之地。八十年代以后，由于離心技術的快速發展（微處理器的引入，變頻驅動的完善、轉速的提高等等），先進的制備用超速離心
2009年12月11日上午9時許，由北京理化分析測試技術學會色譜學會主辦的2009年北京色譜年會在京東賓館第一會議室隆重召開。來自全國色譜界專家、廠商技術專家、青年研究者和學生300余人參加了會議。 2009年北京色譜年會會場 中科院化學所 劉國詮教授 &