蛋白濃縮(proteinconcentration)方法詳解
1,透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑配成30%-40%濃度的溶液,將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用過后,可放入溫箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。主要用于更換蛋白質的緩沖液,有透析袋即可,不需要特殊的儀器。2,冷凍干燥濃縮法這是濃縮蛋白質的一種較好的辦法,它既使蛋白質不易變性,又保持蛋白質中固有的成分。它是在冰凍狀態下直接升華去除水分。具體做法是將蛋白液在低溫下冰凍,然后移置干燥器內(干燥器內裝有干燥劑,如NaOH、CaCl2和硅膠等)。密閉,迅速抽空,并維持在抽空狀態。數小時后即可獲得含有蛋白的干燥粉末。干燥后的蛋白質保存方便,應用時可配成任意濃度使用。也可采用凍干機進行冷凍干燥。在冷凍狀態下讓揚品種的液體升華3,吹干濃縮法將蛋白......閱讀全文
蛋白濃縮方法
蛋白濃縮方法基本有:?丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……?1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法?試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。?2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!?3,硫酸銨沉淀法:利用高濃
蛋白的濃縮方法
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!3,硫酸銨沉淀法:利用高濃度鹽將蛋白質析出(鹽析)選擇
蛋白濃縮方法基本
蛋白濃縮方法基本有:?丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……?1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。?2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!?3,硫酸銨沉淀法:利用高濃
如何用蛋白濃縮管
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾
蛋白質的濃縮方法
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段,現介紹幾種常用的濃縮技術。(一)透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑
蛋白質的濃縮技術
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段,現介紹幾種常用的濃縮技術。(一)透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸
蛋白質沉淀濃縮方法
在生化制備中,沉淀主要用于濃縮目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑: 1.鹽析法 多用于各種蛋白質和酶的分離純化。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。 3.等電點沉淀法 用于氨基酸、
蛋白質的濃縮方法
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段,現介紹幾種常用的濃縮技術。(一)透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑
蛋白濃縮(protein-concentration)基本方法
蛋白濃縮方法基本有:丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法:得有特異性抗體! 3.硫酸銨沉淀法
蛋白質的濃縮技術
實驗概要蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段,現介紹幾種常用的濃縮技術。實驗步驟1. 透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。
蛋白濃縮(protein-concentration)方法詳解
1,透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑配成30%-40%濃度的溶液,將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用
miVac樣品濃縮儀可實現蛋白溶液的高效預先濃縮
蛋白溶液的高效預先濃縮?對于蛋白分離(尺寸排阻色譜法、電泳)或分析(x 射線晶體分析法)前的預先濃縮,Genevac公司的 miVac樣品濃縮儀可實現高效,低成本,且可替代傳統膜離心技術。?通常,采用膜離心技術會因為蛋白質附著在膜上而導致一些昂貴樣品的損失。 相比較使用miVac 樣品濃縮儀,即使蛋
蛋白質的濃縮技術方法
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段,現介紹幾種常用的濃縮技術。(一)透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑
蛋白質的濃縮技術方法
(一)濃縮膠濃縮法 濃縮膠是一種高分子網狀結構的有機聚合物,具有很強的吸水性能。每克干膠可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物質,如水、葡萄糖、蔗糖、無機鹽等,適宜濃縮10 000分子量以上的生物大分子物質。濃縮后,蛋白質的回收率可達80%~90%。比濃縮膠應用方便,直接加入被
Amicon?-Pro蛋白純化濃縮操作指南
蛋白從克隆表達到純化脫鹽濃縮,一路經過千山萬水,寶貴的活性蛋白產量是很多人的“命根子”。然鵝,努力的我們還是苦惱的時候多,欣喜的時候太少太少~~??純化黑科技,是時候放大招了?有沒有什么好方法能讓操作步驟少一點、再少一點,而同時蛋白的活性及產量損失也少一點、再少一點???讓我們看看那些蛋白操作高手的
蛋白質的濃縮技術方法
蛋白質濃縮技術是免疫學中常用的手段,現介紹幾種常用的濃縮技術。(一)透析袋濃縮法利用透析袋濃縮蛋白質溶液是應用zui廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸
馬鈴薯中優質濃縮蛋白的提取
?硫酸銨沉淀與等電點沉淀提取馬鈴薯濃縮蛋白的比較研究 中國農科院供圖 中國農業科學院農產品加工研究所薯類加工與品質調控創新團隊研究發現,利用硫酸銨沉淀與等電點沉淀的方法可從馬鈴薯加工漿液中提取得到功能特性、理化性質和營養品質良好的濃縮蛋白。相關論文發表在International Jour
有機溶劑濃縮蛋白質
蛋白質濃縮有多種方法,有鹽析,超濾,離子交換,有機溶劑沉淀等方法有機溶劑沉淀法在多肽分離中用的特別多,現簡要說明如下,希望對各位新蟲有所幫助有機溶劑沉淀法:有機溶劑能降低溶液的電解常數,從而增加蛋白質分子上不同電荷的引力,導致溶解度的降低;另外,有機溶劑與水的作用,能破壞蛋白質的水化膜,故蛋白質在一
蛋白質的濃縮技術方法
(一)濃縮膠濃縮法 濃縮膠是一種高分子網狀結構的有機聚合物,具有很強的吸水性能。每克干膠可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物質,如水、葡萄糖、蔗糖、無機鹽等,適宜濃縮10 000分子量以上的生物大分子物質。濃縮后,蛋白質的回收率可達80%~90%。比濃縮膠應用方便,直接加入被
蛋白質濃縮、干燥及貯存
一、樣品的濃縮生物大分子在制備過程中由于過柱純化而樣品變得很稀,為了保存和鑒定的目的,往往需要進行濃縮。常用的濃縮方法的: 減壓加溫蒸發濃縮 通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用于一些不耐熱的生物大分子的濃縮。 空氣流動蒸發濃縮 空
蛋白質的濃縮技術方法
(一)濃縮膠濃縮法濃縮膠是一種高分子網狀結構的有機聚合物,具有很強的吸水性能。每克干膠可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物質,如水、葡萄糖、蔗糖、無機鹽等,適宜濃縮10 000分子量以上的生物大分子物質。濃縮后,蛋白質的回收率可達80%~90%。比濃縮膠應用方便,直接加入被濃縮
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換層析裝置實驗步驟 1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂,不斷攪拌以促進平衡;2. 傾瀉掉大部分溶液,保留的溶液置要使樹脂能輕松的
批量層析法濃縮蛋白質實驗
批量層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換層析裝置實驗步驟1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂,不斷攪拌以促進平衡;2. 傾瀉掉大部分溶液,保留的溶液置要使樹脂能輕松的攪拌;3
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
實驗方法原理離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換樹脂層析柱實驗步驟1. 準備離子交換樹脂,裝配層析柱
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換樹脂層析柱實驗步驟 1. 準備離子交換樹脂,裝
透析法濃縮蛋白質溶液
透析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶
透析法濃縮蛋白質溶液
實驗方法原理透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶液盛在一個半透膜袋內,此膜能防止蛋白質丟失而無論在常壓或減壓下可與周圍的緩沖溶液進行溶質交換。除小體積樣品之外,根據擴散原理進行的透析法非常耗時,因此蛋
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的,2 mg/ml