湖北農科院用CRISPR制備基因敲除克隆豬
來自湖北省農科院畜牧獸醫研究所、河南科技大學和中科院水生生物研究所的研究人員，用CRISPR/Cas9系統和Cre/LoxP，敲除了豬初生細胞中肌生成抑制蛋白（MSTN）的一個等位基因，制備了無選擇標記的MSTN基因敲除克隆豬。相關研究結果發表在8月17日的《Scientific Reports》雜志。湖北省農科院畜牧獸醫研究所的鄭新民研究員和河南科技大學動物科學學院的董發明教授，是本文共同通訊作者。 可預測的、無污染的轉基因家畜，對于可靠的表型和生物安全，都是很重要的。因為不想要的序列的引入，如SMGs（選擇標記基因），已經引起了公眾對于食品安全、生物多樣性和農業生態系統的強烈擔憂。SMGs經常用于細胞介導的轉基因，使我們能夠分離出轉基因細胞。但是一旦操作完成，它們在從這些細胞制備而來的GM家畜中，就沒有任何價值，相反，殘留在家畜中的SMGs還可能成為一種負擔。 有幾種方法可以用來制備無SMG的轉基因家畜。然而，到目前......閱讀全文
癌基因敲除可完全抑制肺癌發生
肺癌是所有腫瘤病癥中致死率最高的惡魔。日前，從中科院昆明動物研究所傳來了好消息，該所腫瘤干細胞生物學學科組已成功揭示癌基因維持肺癌的發生機制。該成果已在線發表于國際期刊《治療診斷學》。 據介紹，HUWE1基因是一種泛素化連接酶，它可通過調節底物的穩定性，控制著細胞內大量與腫瘤發生密切相關的生物
癌基因敲除可完全抑制肺癌發生
肺癌是所有腫瘤病癥中致死率最高的惡魔。日前，從中科院昆明動物研究所傳來了好消息，該所腫瘤干細胞生物學學科組已成功揭示癌基因維持肺癌的發生機制。該成果已在線發表于國際期刊《治療診斷學》。據介紹，HUWE1基因是一種泛素化連接酶，它可通過調節底物的穩定性，控制著細胞內大量與腫瘤發生密切相關的生物學過程，
癌基因敲除可完全抑制肺癌發生
科技日報訊 肺癌是所有腫瘤病癥中致死率最高的惡魔。日前，從中科院昆明動物研究所傳來了好消息，該所腫瘤干細胞生物學學科組已成功揭示癌基因維持肺癌的發生機制。該成果已在線發表于國際期刊《治療診斷學》。 據介紹，HUWE1基因是一種泛素化連接酶，它可通過調節底物的穩定性，控制著細胞內大量與腫瘤發
一步生成條件性基因敲除小鼠ESC
最近發展的基因組編輯工具，包括轉錄激活因子樣效應物核酸酶（TALENs）和CRISPR/Cas9，使我們能夠通過誘導雙鏈斷裂（DSBs）的非同源末端連接（NHEJ）修復，快速而有效的敲除靶向基因。然而，這種方法不能進行必需基因的功能研究，這類研究通常采用的策略是基于Cre-LoxP系統的條件性基
基因敲除技術
一．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA?同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較
基因敲除技術
一．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA 同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較
基因敲除簡介
基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成功的有基因
基因靶向的基因敲除
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
簡述p53基因的抑制腫瘤血管生成作用
腫瘤生長到一定程度后，可以通過自分泌途徑形成促血管生成因子，刺激營養血管在瘤體實質內增生。P53蛋白能刺激抑制血管生成基因Smad4 等表達，抑制腫瘤血管形成。在腫瘤進展階段，P53基因突變導致新生血管生成，有利于腫瘤的快速生長，常是腫瘤進入晚期的表現。
基因敲除技術簡介
基因敲除是一種遺傳工程技術，是指通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。基因敲除針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進一步對生物體造成影響，進而推測出該基因的生物學功能。基因敲除技術克服了隨機整合的盲目性和偶然性，是一種理
基因敲除技術簡介
動物實驗和實驗動物都要求達到實驗室操作規范（good laboratory practice, GLP）和標準操作程序（standard operating procedure, SOP）這些規范和操作對實驗動物和實驗室條件，工作人員素質，技術水平和操作方法都要求標準化。所有藥物的安全評價試
控制基因敲除法
【探針技術用于檢測由siRNA介導的基因調制】 為了研究基因功能，科學家們常常會有針對性地關斷某些特定的基因。 而要驗證這種基因沉默的有效性, 就需要運用適當的具特異性的檢測方法。理想的檢測方法不僅要測量準確, 而且還要能讓細胞保持完好無損。 ? 利用諸如RNA(核糖核酸)技
基因敲除技術簡介
基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成功的有基因
什么是基因敲除？
基因敲除(gene knock-out)是利用細胞染色體DNA可與外源性DNA同源序列發生同源重組的性質，使特定靶基因失活，以研究該基因的功能.基因敲入(gene knock-in)是通過同源重組用一種基因替換另一種基因，以便在體內測定它們是否具有相同的功能，或將正常基因引入基因組中置換突變基因以達
基因敲除的定義
基因敲除(geneknockout),是指對一個結構已知但功能未知的基因,從分子水平上設計實驗,將該基因去除,或用其它順序相近基因取代,然后從整體觀察實驗動物,推測相應基因的功能。這與早期生理學研究中常用的切除部分-觀察整體-推測功能的三部曲思想相似。基因敲除可中止某一基因的表達外,還包括引入新基因
《科學》子刊：運動會誘導骨骼肌表預防、逆轉胰島素抵抗
現代社會中胰島素抵抗和2型糖尿病等代謝疾病的流行，與人體力勞動和運動的普遍缺乏密切相關。然而，運動的缺乏在2型糖尿病病理生理中的作用，以及運動如何改善胰島素抵抗，仍困惑著廣大醫學研究人員。 前不久，國際頂級期刊《科學》子刊Science Advances公布了澳大利亞莫納什大學Tony Tig
腫瘤治療新手段－研究用基因靶向抑制腫瘤血管生成
日前，5名罹患肝癌和大腸癌放、化療效果不佳的患者，在第三軍醫大學大坪醫院腫瘤中心接受基因靶向放、化療后，經檢驗腫瘤血管明顯得到抑制。這項以基因APE1為靶點的放、化療治療手段，首開繼手術、放療、化療以外的腫瘤治療先河，或可成為治療新途徑。 分子靶向治療針對腫瘤發病機制中的關鍵分子和關鍵事件
抑制尿酸生成的藥物介紹
抑制尿酸生成的藥物：通過抑制黃嘌呤氧化酶，阻斷次黃嘌呤、黃嘌呤轉化為尿酸，從而降低血尿酸水平。廣泛用于原發性及繼發性高尿酸血癥,尤其是尿酸產生過多型，以及不宜使用促尿酸排泄藥者。別嘌醇：通過抑制黃嘌呤氧化酶使尿酸生成減少。推薦成人初始劑量一次50 mg、1~2次/天，每次遞增50~100 mg，一般
條件基因敲除的定義
中文名稱條件基因敲除英文名稱conditional gene knockout定 義使靶基因在特定細胞類型或者特定發育階段完全喪失功能的實驗技術。應用學科遺傳學（一級學科），發育遺傳學（二級學科）
基因敲除的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
基因敲除的操作步驟
利用基因打靶技術產生轉基因動物的程序一般為：獲得干細胞基因敲除一般應用于鼠，而最常用的鼠的種系是129及其雜合體，因為這類小鼠具有自發突變形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的傾向，是基因敲除的理想實驗動物。而其他遺傳背景的胚胎干細胞系逐漸被發展應用，來自于C57BL/6×CBN/JNCrjF1小鼠的胚胎干細胞系成
基因敲除技術概述（四）
[13]。2.3.2 RNAi基因敲除的優點及應用①.比用同源重組法更加簡便，周期大大縮短。②.對于哺乳動物，如對于一些敲除后小鼠在胚胎時就會死亡的基因，可以在體外培養的細胞中利用RNAi技術研究它的功能。③.由于RNAi能高效特異的阻斷基因的表達，它成為研究信號傳導通路的良好工具。④.RNAi還被
基因敲除技術概述（二）
2.1.2條件性基因敲除法條件性基因敲除法可定義為將某個基因的修飾限制于小鼠某些特定類型的細胞或發育的某一特定階段的一種特殊的基因敲除方法[2]。它實際上是在常規的基因敲除的基礎上，利用重組酶Cre介導的位點特異性重組技術，在對小鼠基因修飾的時空范圍上設置一個可調控的“按鈕”，從而使對小鼠基因組的修
RNAi引起的基因敲除
RNAi引起的基因敲除：由于少量的雙鏈RNA就能阻斷基因的表達，并且這種效應可以傳遞到子代細胞中，所以RNAi的反應過程也可以用于基因敲除。
基因敲除的實驗步驟
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
基因敲除的實驗步驟
構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染色體靶位
基因敲除技術的分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
基因敲除的技術路線
基因敲除的技術路線如下:(1)構建重組基因載體﹔(2)用電穿孔、顯微注射等方法把重組DNA轉入受體細胞核內﹔(3)用選擇培養基篩選已擊中的細胞﹔(4)將擊中細胞轉入胚胎使其生長成為轉基因動物,對轉基因動物進行形態觀察及分子生物學檢測。
基因敲除技術概述（三）
2.1.2.2 誘導性基因敲除法誘導性基因敲除也是以Cre/loxp 系統為基礎，但卻是利用控制Cre 表達的啟動子的活性或所表達的Cre 酶活性具有可誘導的特點，通過對誘導劑給予時間的控制或利用Cre 基因定位表達系統中載體的宿主細胞特異性和將該表達系統轉移到動物體內的過程在時間上的可控性
基因敲除技術概述（一）
1．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成