簡述雜交瘤技術選擇培養基的應用
細胞融合是一個隨機的物理學過程。在小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞混合細胞懸液中，經融合后細胞將以多種形式出現。如融合的脾細胞和瘤細胞、融合的脾細胞和脾細胞、融合的瘤細胞和瘤細胞、未融合的脾細胞、未融合的瘤細胞以及細胞的多聚體形式等。正常的脾細胞在培養基中僅存活5～7d，無需特別篩選；細胞的多聚體形式也容易死去；而未融合的瘤細胞則需進行特別的篩選去除。 細胞DNA合成一般有兩條途徑。主要途徑是由糖和氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA，葉酸作為重要的輔酶參與這一合成過程。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的催化作用合成DNA。細胞融合的選擇培養基中有3種關鍵成分：次黃嘌呤(hypoxanthine，H)、甲氨蝶呤(aminopterin，A)和胸腺嘧啶核苷(thymidine，T)，所以取三者的字頭稱為HAT培養基。甲氨蝶呤是葉酸的拮抗劑，可阻斷瘤細胞......閱讀全文
簡述雜交瘤技術選擇培養基的應用
細胞融合是一個隨機的物理學過程。在小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞混合細胞懸液中，經融合后細胞將以多種形式出現。如融合的脾細胞和瘤細胞、融合的脾細胞和脾細胞、融合的瘤細胞和瘤細胞、未融合的脾細胞、未融合的瘤細胞以及細胞的多聚體形式等。正常的脾細胞在培養基中僅存活5～7d，無需特別篩選；細胞的多聚體形式
簡述雜交瘤技術有限稀釋與抗原特異性選擇
在動物免疫中，應選用高純度抗原。一種抗原往往有多個決定簇，一個動物體在受到抗原刺激后產生的體液免疫應答實質是眾多B細胞群的抗體分泌，而針對目標抗原表位的B細胞只占極少部分。由于細胞融合是一個隨機的過程，在已經融合的細胞中有相當比例的無關細胞的融合體，需經篩選去除。篩選過程一般分為兩步進行：一是融
簡述雜交瘤技術的產生背景
科勒和米爾斯廷于1975年發明了淋巴細胞雜交瘤技術，終于使制備純一抗體的難題獲得了解決。雜交瘤技術是由細胞融合技術發展而來。抗體是由免疫的B淋巴細胞分泌的球蛋白，各個淋巴細胞分泌的抗體各不相同。因而，要獲得一種純一的抗體只有從一個B淋巴細胞產生的細胞群制取。然而，B淋巴細胞在體外不能長期存活，分
HAT培養基在雜交瘤細胞篩選的應用
1964年Littlefield首先發明了HAT(H-Hypoxanthine次黃嘌呤，A-Aminopterin氨基蝶呤，T--Thymidine 胸腺嘧啶核苷)培養基的選擇培養。?HAT培養基是指含有次黃嘌呤（hypoxantin）、氨基蝶呤（aminopterin）和胸腺嘧啶脫氧核苷（thym
關于雜交瘤技術的應用介紹
單克隆抗體不僅在生物學和免疫學基礎研究中具有重要的價值，而且在實踐中的應用范圍亦極為廣泛。在醫學中，單克隆抗體已用于疾病的診斷，其優點是診斷準確，無交叉反應。例如，單克隆抗體診斷乙型肝炎及潛伏的乙型肝炎病毒，則很少發生假陰性的漏診。單克隆抗體還可作為治療疾病的藥物載體。單克隆抗體對靶組織有專一親
關于雜交瘤技術細胞的選擇與融合
建立雜交瘤技術的目的是制備對抗原特異的單克隆抗體，所以融合細胞一方必須選擇經過抗原免疫的B細胞，通常來源于免疫動物的脾細胞。脾是B細胞聚集的重要場所，無論以何種免疫方式刺激，脾內皆會出現明顯的抗體應答反應。融合細胞的另一方則是為了保持細胞融合后細胞的不斷增殖，只有腫瘤細胞才具備這種特性。·選擇同
細胞培養基應用選擇
選擇培養基沒有固定的標準，有幾點建議可供您參考： （1） 建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首選的培養基。可以查閱參考文獻，或在購買細胞株時咨詢。 （2） 其它實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。 （3） 根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株
簡述選擇性培養基的性質
用于選擇分離微生物重組型、突變型或擇優分離自然界某類微生物的培養基。如在基本培養基上接種兩個不同的營養缺陷型株，可以選擇出原養型重組體。又如在含有某一抗生素的培養基上只有對此抗生素產生抗性的突變株能形成菌落。還可以通過選擇某些培養基成分使某種最能適應該種培養基的微生物能成功地競爭并超過接種物中存
發酵培養基的特點和應用選擇
發酵培養基是供菌種生長、繁殖和合成產物之用。它既要使種子接種后能迅速生長，達到一定的菌絲濃度，又要使長好的菌體能迅速合成需產物。因此，發酵培養基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外，還要有產物所需的特定元素、前體和促進劑等。但若因生長和生物合成產物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高，或生長和
培養基滅菌技術應用
培養基滅菌技術應用1、種子罐、發酵罐、計量罐、補料罐等的空罐滅菌及管道滅菌從有關管道通入蒸汽，使罐內蒸汽壓力達0.147 MPa，維持45 min，滅菌過程中，羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒從所有液位以上的閥門、邊閥排出空氣，并使蒸汽通過這些閥門以防止出現死角。滅菌完畢后，關閉蒸汽，待罐內
雜交瘤培養基推薦使用方法
?雖然，雜交瘤細胞的生長依賴于外源性營養物質的補充，如：血清、白蛋白、水解產物、蛋白質等，但是，仍可應用化學合成的TurboDoma培養基進行細胞培養。總之，你目前使用的培養基中營養補充成分越少，細胞從這種蛋白依賴型培養基過渡到適應TurboDoma完全無蛋白培養基的速度就會越快。本文威正翔禹/締一
細胞雜交瘤技術
細胞雜交瘤技術?雜交瘤技術?雜交瘤技術是1975年Kohler和Milstein用于制備單克隆抗體而創建的一項重要技術，被譽為“免疫學上的一次革命”。此技術被廣泛用于各種單克隆抗體的制備。抗體是由B淋巴細胞分泌的，一個B淋巴細胞只能分泌一種抗體。把B淋巴細胞和骨髓細胞融合，即可形成在體外長期存活并分
雜交瘤技術原理
單克隆是指利用在細胞融合基礎上的B細胞雜交瘤技術。??????? 雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞（B淋巴細胞）的主要特征是它的抗體分泌功能，但不能在體外連續培養，小鼠骨髓瘤細胞則可在
抗體檢測以及雜交瘤細胞的選擇
（一）抗體檢測用檢測抗體的方法從雜交細胞中篩選出生產指定抗體的雜交株是很重要的。檢測抗體的方法很多，從沉淀反應到放射免疫測定。由于細胞培養液中的抗體濃度通常是很低的，而且傳統的檢測方法多是以多價抗原與多克隆抗血清相反應。雜交瘤產生的抗體則是單克隆的，所以并不是每項方法都能適用。一定要選擇敏感的、快速
抗體檢測及雜交瘤細胞的選擇
（一）抗體檢測用檢測抗體的方法從雜交細胞中篩選出生產指定抗體的雜交株是很重要的。檢測抗體的方法很多，從沉淀反應到放射免疫測定。由于液中的抗體濃度通常是很低的，而且傳統的檢測方法多是以多價抗原與多抗血清相反應。雜交瘤產生的抗體則是單的，所以并不是每項方法都能適用。一定要選擇敏感的、快速的、一次又能檢測
雜交瘤細胞技術分析
雜交瘤細胞技術分析克隆化的細胞可以在體外進行大量培養，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養法得到的單克隆抗體有限，其不能超過特定的細胞濃度，且每天要換培養液。而體內雜交瘤細胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細胞具有從親代淋巴細胞得來的腫瘤細胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能
分離培養基的選擇
分離培養基的選擇是檢驗主管技師考試輔導的部分內容，以下是醫學教育網對這塊內容的整理，希望對考生有所幫助： 臨床標本送往細菌實驗室后，應立即接種到適當的分離培養基上。依據衛生部臨床檢驗中心推薦，細菌實驗室應備有如下分離培養基： （一）血平板 適于各類細菌的生長，一般細菌檢驗標本的分離，都應接
細胞培養基的分類與選擇技術總結（二）
▼ 常見細胞系推薦培養基?因培養基種類繁多，因此，我們簡單列舉了幾種常見基礎培養基為大家進行介紹1.?MEMMinimal Essential Medium是最基本的培養基, 設計之初是為了培養HeLa細胞以及部分哺乳類的成纖維細胞。MEM含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素，適合多種細胞
細胞培養基的分類與選擇技術總結（一）
培養基是用來供給細胞營養，促使細胞增殖的，也是細胞賴以生長的環境。細胞培養實驗中用量最多的就是細胞培養基，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件，則會導致細胞表達不同的表型。培養基種類按照來源分類：在動物細胞體外培養實驗中，可使用天然培養基（
關于雜交瘤技術的基本介紹
雜交瘤技術（hybridoma technique） 即淋巴細胞雜交瘤技術，又稱單克隆抗體技術。它是在體細胞融合技術基礎上發展起來的。克勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）（1975）證明，骨髓瘤細胞與免疫的動物脾細胞融合，形成能分泌針對該抗原的均質的高特異性的抗體——單克隆抗體，
雜交瘤細胞的選擇性培養是什么？
將經過融合的細胞置于含有次黃嘌呤、甲氨蝶呤和胸腺嘧啶核苷的HAT培養基中。 1.脾細胞：在一般培養基中不能生長繁殖。 2.骨髓瘤細胞：采用的小鼠骨髓瘤細胞都是HGPRT或TK代謝缺陷型細胞，在HAT培養基中不能增殖。 3.雜交瘤細胞：骨髓瘤細胞與脾細胞融合，獲得HGPRT，可以利用次黃嘌呤
簡述基因轉染技術的應用
1 、用于建造疾病的動物模型和藥物篩選模型 2 、用于基因治療 3 、用于異種器官移植 4 、用于改良動植物品種和生產性能 5 、用于生產藥用蛋白和保健蛋白 6 、用于生產人抗體
生物雜交瘤技術平臺的優化策略
雜交瘤技術仍然是單克隆抗體發現的主要技術，尤其是在治療性抗體藥物治療領域，相比噬菌體、酵母等非天然文庫，具有成藥性好、特異性強等特點。由于雜交瘤獲得的單克隆抗體，系經過哺乳動物細胞自然進化篩選獲得的序列，因此其通常不會遇到表達困難、產量低、非特異性結合等問題。 雜交瘤技術具有以下挑戰：1. 對于免疫
雜交瘤技術的基本原理
雜交瘤抗體技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠B細胞和小鼠骨髓瘤細胞。脾淋巴細胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養基中生長（選擇原理見后），小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖，即所謂永生性。在選擇培養基的作用下，只有B細胞與骨
雜交瘤技術的基本原理
雜交瘤抗體技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠B細胞和小鼠骨髓瘤細胞。脾淋巴細胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養基中生長（選擇原理見后），小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖，即所謂永生性。在選擇培養基的作用下，只有B細胞與骨
雜交瘤技術的基本原理
雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞（B淋巴細胞）的主要特征是它的抗體分泌功能，但不能在體外連續培養，小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養基的作用下，
選擇培養基和鑒別培養基的區別
鑒別培養基：利用細菌分解糖類和蛋白質的能力及其代謝產物的不同，在培養基中加入特定的作用底物和指示劑，觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產物，通過指示劑的反應不同來鑒別細菌。例如糖發酵管、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素（MIU）培養基等。選擇培養基：在培養基中加入抑制
如何選擇分離培養基？
根據標本來源、培養目的、可能存在的病原菌。1.血平板：各類細菌檢驗標本的分離。2.營養肉湯：標本及各類細菌的增菌培養。3.麥康凱平板：篩選革蘭陰性桿菌和非發酵菌。4.SS瓊脂：篩選腸道致病菌，如志賀菌和沙門菌。5.巧克力血平板：疑有嗜血桿菌、奈瑟菌等的標本。6.血液增菌培養基：用于從血液、骨髓中分離
簡述單克隆抗體雜交瘤細胞的內容
克隆化的細胞可以在體外進行大量培養，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養法得到的單克隆抗體有限，其不能超過特定的細胞濃度，且每天要換培養液。而體內雜交瘤細胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細胞具有從親代淋巴細胞得來的腫瘤細胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小
厭氧菌的分離培養基的選擇
初次培養一般都使用選擇培養基和非選擇培養基。 1）非選擇培養基：本培養基使分離的厭氧菌不被抑制，幾乎能培養出所有的厭氧菌。常使用心腦浸液瓊脂（BHI）、布氏瓊脂（BR）、胰豆胨肝粉瓊脂（GAM）、胰胨酵母瓊脂（EG）、CDC厭氧血瓊脂等。 2）選擇培養基：為有目的選擇常見厭氧菌株，以便盡快確