毛細管電色譜儀分析技術(一)
毛細管電色譜儀(CEC)整合了液相色譜(HPLC)和毛細管電泳(CE)的優點,在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以壓力和電滲流共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。在HPLC和CE雙重分離機理的作用下,CEC對樣品細微之處的分辨能力得到極大提高,既能分離帶電組分,又能分析中性分子,對復雜的混合樣品顯示出強大的分離潛力,代表微分離分析的趨勢。一、發展歷史:1974年,CEC出現,將電場施加到填充毛細管柱上,分離了數種溶質,顯示出以電滲流作為驅動力的優越性。但當時并沒有引起足夠的關注。1981年,將10μm ODS填料填入170μm內徑的毛細管柱中,在電場作用下成功分離了數種多環芳烴,獲得了31000TP/m的柱效,*次展示了CEC的巨大潛力。二、工作原理:CEC采用HPLC固定相,通過高壓輸液泵產生的液壓和在毛細管柱兩端加上高壓直流電場所產生的電場力,......閱讀全文
毛細管電色譜儀分析技術(一)
毛細管電色譜儀(CEC)整合了液相色譜(HPLC)和毛細管電泳(CE)的優點,在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以壓力和電滲流共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。在HPLC和CE雙重分離機理的作用下,CEC對樣品細微之
毛細管電色譜儀分析技術
效毛細管電色譜儀(CEC)整合了液相色譜(HPLC)和毛細管電泳(CE)的優點,在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以壓力和電滲流共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。在HPLC和CE雙重分離機理的作用下,CEC對樣品細微
毛細管電色譜儀分析技術(二)
②電動填充法:電動填充是利用電泳原理,使固定相在一定pH下帶電荷,在電場中定向移動而把固定相填充到毛細管中。與高壓勻漿填充法相比,電動填充法可有選擇地把荷質比相同的固定相填入毛細管中,柱床均勻。③超臨界CO2法:超臨界CO2法是在毛細管柱一端制作臨時柱塞后,另一端與貯液罐相連,將預填充的填料放入貯液
毛細管電色譜儀電色譜柱技術
毛細管電色譜儀(CEC)是在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。電色譜柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分為填充毛細管柱、開管毛細管柱和整體毛細管柱。一、填充
毛細管等電聚焦電泳色譜儀分析技術
毛細管等電聚焦電泳色譜儀(CIEF)是以載體兩性電解質為介質,根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、載體兩性電解質應具備的條件:載體兩性電解質是兩性分子,使其在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可作為載體,但兩性電解質不能用于等電聚焦。只有載體兩性電解質,即具有好的電導和緩沖
高效毛細管電色譜儀電色譜柱技術
? ??高效毛細管電色譜儀(CEC)是在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。電色譜柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分為填充毛細管柱、開管毛細管柱和整體毛細管
高效毛細管等電聚焦電泳色譜儀分析技術
高效毛細管等電聚焦電泳色譜儀(CIEF)是以載體兩性電解質為介質,根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、載體兩性電解質應具備的條件:??????? 載體兩性電解質是兩性分子,使其在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可作為載體,但兩性電解質不能用于等電聚焦。只有載體兩性電解質,即
毛細管電色譜儀整體柱技術
毛細管電色譜儀整體毛細管柱是采用有機和無機方法在毛細管中進行原位自由基聚合反應或固化,形成連續床固定相,不用柱塞,簡化了柱制備過程。通過改變單體可引入多種官能團,有更好的多孔性和滲透性,對流動相阻力小,溶質在固定相和流動相之間快速分配,有利于實現高速分離。整體毛細管柱按基質不同可分為無機基質整體毛細
毛細管電色譜儀開管柱技術
毛細管電色譜儀是在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。開管毛細管柱是將固定相鍵合或涂敷在毛細管壁上,引入色譜分配機理。一、制備方法:開管毛細管柱制備的關鍵是增大比表
毛細管電色譜儀電色譜柱的制備
毛細管電色譜儀(CEC)是在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。電色譜柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分為填充毛細管柱、開管毛細管柱和整體毛細管柱。一、填充
高效毛細管電色譜儀電色譜柱的制備
? ??高效毛細管電色譜儀(CEC)是在毛細管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數差異和本身淌度差異進行分離。電色譜柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分為填充毛細管柱、開管毛細管柱和整體毛細管
毛細管膠束電泳色譜儀分析技術
毛細管膠束電泳色譜儀(MECC)是在緩沖液中加入濃度高于膠束臨界濃度的表面活性劑,膠束相在分離中起到準固定相的作用,是電泳技術與色譜技術相結合的產物。一、工作原理:?MECC中,把離子型表面活性劑(如十二烷基硫酸鈉)加入緩沖液,當其濃度超過臨界濃度后形成有一疏水內核、外部帶負電的膠束。雖然膠束帶負
毛細管凝膠電泳色譜儀分析技術
毛細管凝膠電泳色譜儀(CGE)是20世紀80年代后期發展起來的毛細管電泳分離模式。它是將常規凝膠電泳儀對生物大分子的分離能力與毛細管電泳儀的快速、微量和定量分析相結合,是當今分離度極高的一種分離技術。一、載體特性:采用聚丙烯酰胺凝膠作為載體的目是防止CGE電泳過程中分子的對流和擴散,使待測組分得到更
毛細管等速電泳色譜儀分析技術
毛細管等速電泳色譜儀(CITP)是采用先導電解質和尾隨電解質,利用待測離子淌度的不同進行分離。一、CITP條件:1、特殊的電解質系統:(1)前導電解質:淌度比樣品中任何離子的淌度都大并具有一定緩沖能力的離子。(2)尾隨電解質:淌度比樣品中任何離子的淌度都小并具有一定緩沖能力的離子。(3)對離子:以
毛細管電色譜及其在藥物分析中的應用(一)
毛細管電色譜[1~3](Capillary?Electrochromatography,CEC)是近10年來綜合了現代最新分離技術高效液相色譜(High?Performance?Liquid?Chromatography,HPLC)和毛細管電泳(Capillary?Electrophoresis,C
等電聚焦電泳色譜儀分離技術介紹(一)
等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同,在一個穩定、連續和線性的pH梯度中進行分離。按pH梯度的形成原理不同可分為載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳和固相pH梯度等電聚焦電泳。一、載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳:1、理想的載體兩性電解質應具備的條件:載體兩性電解質是兩性分子
?毛細管電色譜的技術優勢
毛細管電色譜(CEC)在中草藥分析中顯示出一些獨特的優勢,如:CEC流動相相對簡單、用量少、峰容量大、更易與質譜(MS)聯用。特別是植物提取物中活性成分復雜,需要對色譜峰進行精確的指認并控制峰純度;采用CEC—MS方法可在線提供中藥中各種化合物的質譜圖。
毛細管區帶電泳色譜儀分析技術
一、工作原理: CZE中,粒子的電荷性質不同,電泳方向不同;粒子的電荷數量不同,電泳速度不同;粒子的分子量不同,電泳速度不同。在毛細管中,由于電滲流的存在,所有粒子都隨電滲流一起向負極遷移,電滲流速度約是一般離子電泳速度的5~7倍。各種電性粒子在毛細管中的遷移速度分別為: 1、陽離子:vap
毛細管區帶電泳色譜儀分析技術
毛細管區帶電泳色譜儀(CZE)又稱自由溶液區帶電泳儀,整個系統采用同一種緩沖液充滿,以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異進行分離。一、工作原理:?CZE中,粒子的電荷性質不同,電泳方向不同;粒子的電荷數量不同,電泳速度不同;粒子的分子量不同,電泳速度不同。在毛細管
毛細管區帶電泳色譜儀與毛細管等電聚焦電泳色譜儀比較
毛細管區帶電泳色譜儀是利用溶質分子在毛細管內的背景電解質溶液中以不同速度遷移而形成一個個獨立的溶質帶而達到分離,毛細管等電聚焦電泳色譜儀是利用不同等電點的溶質分子分別聚集在毛細管內不同的位置上不作遷移而達到分離。兩者比較如下:一、分離原理:? 1、毛細管區帶電泳色譜儀:電泳淌度不同? 2、毛細管等電
毛細管電泳色譜儀分析的在線樣品富集技術
毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。由于CE溶質區帶的
毛細管電泳色譜儀毛細管技術指標詳解
毛細管電泳色譜儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,毛細管是分離的關鍵。毛細管技術指標包括材質、內徑、外徑、壁厚和長度等。一、材質:理想的毛細管必須是化學和電惰性,能透過紫外和可見光,有一定的韌性,富有彈性,易于彎曲,耐用而且便宜。目前使
毛細管電泳色譜儀檢測技術
毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用帶電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。CE的毛細管極細,
毛細管電泳和毛細管電色譜
毛細管電泳(capillary?electrophoresis,?CE):以高壓電場為驅動力,以電解質為電泳介質,以毛細管為分離通道,樣品組分依據淌度和分配行為的差異而實現分離的一種色譜方法。它有多種分離模式,可以采用液相色譜中的各種檢測方法。CE既可以分離帶電荷的溶質,也可以通過毛細管膠束電動色譜
毛細管等電聚焦電泳色譜儀分離蛋白質的原理
蛋白質是一種兩性電解質分子,當它在大于其等電點的pH環境中時,會解離成帶負電的離子,在電場中向正極泳動;當它在小于其等電點的pH環境中時,會解離成帶正電荷的離子,在電場中向負極泳動。這種泳動作用到達它的等電點的pH環境中,即它的凈電荷為零時才會停止,此時蛋白質在電場作用下的遷移運動與擴散運動達到平衡
色譜儀毛細管柱的制備(一)
色譜儀毛細管柱的制備包括毛細管柱材質的選擇、毛細管柱的拉制、毛細管柱內表面的改性、毛細管柱固定液的涂漬和毛細管柱的老化等。一、毛細管柱材質的選擇:色譜儀毛細管柱的材料應具有化學惰性、熱穩定性好、內表面光滑易潤濕和操作方便等性能。自毛細管柱發明以來,對塑料、銅、鎳和不銹鋼等多種材料進行過研究,目前普遍
毛細管電泳色譜儀填充柱技術
毛細管電色譜儀(CEC)填充毛細管柱是將固定相填充到毛細管中,通過兩端燒結柱塞將固定相保持在毛細管中而成。其zui大優點是可利用眾多的HPLC固定相,根據化合物與固定相的作用不同實現分離,在CEC中應用zui廣泛。一、固定相:固定相是影響填充毛細管柱分離選擇性、柱效和分離速度的重要因素,是發展新型C
毛細管電泳色譜儀的檢測技術
毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。由于CE溶質區帶的
毛細管電色譜及其在藥物分析中的應用(二)
4 研究進展4.1 柱制備 在CEC中,柱制備是很重要的環節,因為柱性能,如柱重復性、柱壽命、柱效等,是實際應用時最關鍵、最基礎的指標。常用方法是柱內填充固定相顆粒,即填充電色譜柱,主要方式有勻漿填充制備法、拉伸填充制備法、電動填充法。填充柱的柱容量大,但塞子效應、氣泡、填充均勻度也是無法回避的問題
毛細管電泳色譜儀分離分析模式
毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,正成為生物樣品zui重要的分離分析手段。CE分離分析模式有毛細管電色譜、毛細管區帶電泳、毛細管膠束電