新研究實現轉基因小鼠腦內多基因的同時激活
1月15日，《自然-神經科學》（Nature Neuroscience）發表了題為《利用CRISPR/dCas9轉基因小鼠在腦內進行多基因的同時激活》的研究論文，該研究由中國科學院上海生命科學研究院神經科學研究所、腦科學與智能技術卓越創新中心、神經科學國家重點實驗室楊輝研究組與上海科技大學黃鵬羽實驗室合作完成。該研究建立了一種高效的基于CRISPR/dCas9的體內激活平臺，并且在小鼠腦中實現了包括基因和長鏈非編碼RNA在內的多個基因元件的同時激活。該體內激活系統的建立將為在腦內研究復雜的基因網絡以及獲得性的表型提供重要技術手段。 一直以來，擁有一種能夠隨意控制基因表達的技術是很多生物學家的夢想。CRISPR/Cas9系統的出現滿足了這種需要，Cas9就像是一把DNA剪刀，在sgRNA的帶領下，特異性地切割目的序列，并形成DNA雙鏈斷裂。后來的研究通過失活Cas9的核酸內切酶的活性而獲得了dead Cas9（即dCas9）......閱讀全文
轉基因小鼠制備實驗
實驗步驟 1. 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2. 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3. 第二天上午9:00前觀察
轉基因小鼠制備實驗
轉基因小鼠制備實驗可應用于：（1）動物發育研究；（2）研究細胞功能調控機制。實驗方法原理遺傳的基本物質是DNA，基因是位于染色體上有遺傳效應的DNA片段，對于儲存在生物全套染色體中的全部遺傳信息，可稱其為基因組。不同種類、不同個體的生物基因組成是不同的，對動物個體來說，非自身的基因成分屬于外源基因，
轉基因小鼠制備實驗
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。?2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。?3、第二天上午9:00前觀察供體、受
轉基因小鼠制備實驗
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 HCGPMSG透明質酸酶戊巴比妥鈉儀器、耗材 顯微鏡鑷子持卵針注射針實驗步驟 1. ?選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。?2. ?47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合
轉基因小鼠制備實驗方法
實驗概要掌握轉基因小鼠制備基本實驗方法。實驗步驟1. 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。 2. 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結
轉基因食物或危害小鼠健康
法國卡昂大學的一個研究小組近日宣布，他們發現被終身喂食一種普通轉基因玉米的小鼠易患上腫瘤，并且肝臟和腎臟也受到嚴重損害。目前，法國政府已經啟動了對轉基因玉米安全性的調查。 雖然之前的安全實驗已經證實在食用90天之后，這種轉基因玉米對動物沒有不良影響，《每日郵報》相關報道稱，新的實驗被認為是首次對
轉基因小鼠搭上西班牙軍隊“便機”
? 這些籠子里裝的是運抵大加那利島的Javier Castro Hern的轉基因小鼠，這些動物曾在西班牙馬德里被攔截數月。 被西班牙航空公司拒載運載的29只轉基因小鼠近日搭乘西班牙軍隊的便機飛往加那利群島，現在它們已經抵達目的地特納利夫島上的拉古納大學。 這些小鼠在美國培育，它們曾因伊
轉基因小鼠預言新流感病毒
德國的研究者開發了一種轉基因小鼠，這種小鼠可以幫助科學家們發現新的可能導致全球流行病的流感病毒株。在一項研究中對小鼠進行了描述。“禽流感病毒在體內逃避 MxA 蛋白限制需要病毒核蛋白具有人類特征”這將于 4 月 10 日在實驗醫學雜志上發表。 甲型流感病毒從豬、禽類或其他動物物種傳播給人類時，
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
4）? 如果未見DNA溶液流，則輕輕摩擦持樣器鈍緣，漸漸的打開注射器針頭。針頭重新進入油內確定DNA溶液流的存在。5）? 移動持卵管回到受精卵下部。通過微分驅動水壓控制系統使持卵管內產生溫和的負壓，并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必須確保受精卵基底部與凹玻片基底部輕輕接觸。注意不宜吸得過緊，否則會使
轉基因小鼠的“三段進階”
小鼠轉基因的“三段進階”。這里我們說的轉基因小鼠是指：將一段外源基因隨機插入到小鼠基因組中，獲得過量表達目的基因的小鼠模型。轉基因1.0 顯微注射法構建完全隨機插入轉基因小鼠用顯微注射針將線性化的外源DNA片段直接注入小鼠受精卵的原核中，使外源基因整合到小鼠基因組中，從而獲得轉基因小鼠。優點：過程較
動物實驗技術：轉基因小鼠制備實驗
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3、第二天上午9:00前觀察供體、受體，
轉基因小鼠模型的建立(SOP)1
名稱：轉基因小鼠模型的建立(SOP)關鍵詞：轉基因小鼠目的：在動物體研究轉化基因原理：轉基因動物是指染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一類動物。整合到動物染色體基因組的外源基因稱為轉基因。轉基因技術則是指制備轉基因動物所需的一套技術，它涉及外源基因的構建、載體和受體的篩選、基因導人技術、供
轉基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之處]（1）外源基因隨機整合；（2）個別原核不清晰，需進行特殊處理；（3）需大型精密儀器，費用昂貴；（4）操作周期相對較長。（二）實驗器材的準備1．輸精管切除術用器材：彎式有齒鑷、直式有齒鑷、顯微鑷、手術剪、自動小夾涂藥器、自動小夾、帶彎針4/0絲線及持針器、直徑為10cm塑料 Petri氏培
轉基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受體母鼠的準備輸卵管轉移的受體鼠應該為4-6周齡大小，體重在20-25克左右，嚴禁用低體重以及超重母鼠，若體重較低，其體能不足以維持妊娠，可能導致受精卵的重新吸收；若體重較重，麻醉劑被吸收入脂肪組織，降低麻醉效果，可能使手術困難，而且脂肪組織的存在意味著靜脈的存在，所以手術時切掉脂肪組織可能導
轉基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6）? 為保暖包裹小鼠于紗布中或將其放置于熱墊內使其蘇醒，處于麻醉狀態下的小鼠應該嚴格監護直到其完全蘇醒。手術后小鼠飼養2周后確定手術是否成功。（7） 實驗性飼養：將1-2只母鼠與輸精管切除小鼠合籠飼養，次晨進行陰道栓檢查。有陰道栓的母鼠，用磷酸緩沖液處理后24小時，其輸卵管潮紅。卵細胞應該處于單
轉基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．顯微注射（1）導入DNA的制備：顯微注射首先涉及導入DNA的制備，顯微注射的轉入基因通常為去除載體序列的線狀DNA，轉基因所用載體是真核表達載體，即含有在哺乳動物細胞內表達的真核啟動子。所謂組織特異性的實現多是通過組織特異性啟動子來實現組織特異性表達的。制備轉基因小鼠，必須對待導入DNA進行分離
轉基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1）? 點燃酒精燈，調節火焰到最佳。捏持玻璃毛細吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋轉過火。2）? 當吸管開始變軟，快速撤離火焰，向外急劇扯拉使吸管變長，形成口徑大約200?l的吸管。注意制備過程中離開火焰的時間以及扯拉的力度，盡量保證制備吸管的一致性。3）? 為吸管評分，輕柔地折斷吸管，辨別
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
10）? 移卵操作完成后，撤回移卵管，去除器械，按原本位置將各器官重置于腹腔內。10）縫合切口，用小夾夾持皮膚。常用自動小夾代替縫線，這樣可以避免小鼠啃嘶縫線，切口裂開。11）若進行雙側手術，則于另一側子宮角重復上述操作。12）手術完成后，安置小鼠于清潔的籠中。麻醉狀態下，小型哺乳動物無法有效維持機
轉基因小鼠模型的建立(SOP)8
（1）? RNA的分離：根據實驗者的需要從轉基因小鼠組織或細胞中提取總RNA或mRNA。分離總RNA比較簡單，且適合做基因做基因轉錄分析。實驗操作參見第一章的第四節。（2）? Northern 印跡分析：該技術用于定性檢測轉基因動物組織或細胞中轉基因轉錄的相對水平。其實驗操作參見第一章的第九節。（3
轉基因小鼠制備實驗方法（protocol)
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3、第二天上午9:00前觀察供體、受體，
最新RNAi技術可媲美轉基因小鼠模型
基因編輯技術一直都是生命科學的熱門研究領域，近來編輯領域出現了可與轉基因小鼠技術相媲美的新RNAi干擾技術，該技術由洛克菲勒大學的研究人員研制出，在全基因組水平上首次對小鼠進行RNAi篩查研究，并在數月內發現了導致表皮腫瘤生長的基因，研究成果發表在《自然》期刊上。 RNAi技術篩查致病基因
轉基因工程小鼠落戶強磁場中心
無特定病原體級動物中心引進多種基因工程小鼠。 中科院強磁場科學中心無特定病原體（SPF）級動物中心日前投入使用， 從美國引進的多種基因工程小鼠也喜遷新居。這標志著強磁場中心腫瘤分子遺傳和表觀遺傳學的研究正式起航。 能穩定遺傳且表達外源基因的小鼠即轉基因小鼠。目前該動物中心已有超過30個基因工程小
ace2轉基因小鼠的缺點
發育脊髓缺陷。ace2轉基因小鼠的缺點是轉基因小鼠的神經管問題異常嚴重，也就是發育脊髓缺陷。這類出生缺陷會導致脊柱裂和無腦畸形。轉基因小鼠被廣泛應用于基因表達、蛋白質間相互作用、癌癥研究、免疫學研究、干細胞研究、神經疾病研究、藥物研發與藥效評估等領域。
ace2轉基因小鼠的缺點
發育脊髓缺陷。ace2轉基因小鼠的缺點是轉基因小鼠的神經管問題異常嚴重，也就是發育脊髓缺陷。這類出生缺陷會導致脊柱裂和無腦畸形。轉基因小鼠被廣泛應用于基因表達、蛋白質間相互作用、癌癥研究、免疫學研究、干細胞研究、神經疾病研究、藥物研發與藥效評估等領域。
Cell:－CRISPR技術加快轉基因小鼠模型構建
Whitehead研究所的研究人員利用基因調控系統CRISPR/Cas，僅需一步操作就可將報告基因和條件性等位基因轉入小鼠基因組中。目前生成包含如此復雜工程等位基因的動物只需數周而非數年的時間，科學家可快速利用這些動物來構建疾病模型及研究基因功能。這一突破性的研究發表在《細胞》(Cell)雜志上
制備轉基因小鼠過程中的若干技巧
背景：當今轉基因技術迅速發展，作為模式動物的小鼠在上世紀就已經有完整的轉基因制備過程。雖然技術成熟但方法單一，所以需要進行發展和改進。 方法改進： 1.在小鼠品系的選擇上需要注意，盡量選擇容易受胎的品系。如ICR小鼠 2.在利用顯微注射法制備轉基因小鼠時，質粒濃度在1.5ng/
顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程
實驗概要本實驗詳細介紹了顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程。實驗原理轉基因小鼠制備的基本原理是將改建后的目的基因(或基因組片段)用顯微注射法注入供體小鼠的受精卵(或著床前胚胎細胞)，然后將此受精卵(或著床前胚胎細胞)再植入受體動物的輸卵管(或子宮)中，使其發育成攜帶有外源基因的轉基因動物，通過分
新研究實現轉基因小鼠腦內多基因的同時激活
1月15日，《自然-神經科學》（Nature Neuroscience）發表了題為《利用CRISPR/dCas9轉基因小鼠在腦內進行多基因的同時激活》的研究論文，該研究由中國科學院上海生命科學研究院神經科學研究所、腦科學與智能技術卓越創新中心、神經科學國家重點實驗室楊輝研究組與上海科技大學黃鵬羽
基因編輯CRISPR/Cas9技術構建轉基因小鼠的優勢
當當當！敲黑板！！看這里！！！ 2016年國家自然科學基金放榜已經有一段時間啦！各位老師是不是還沉浸在喜悅中不能自拔呢？O(∩_∩)O清醒一下，我們的目標是：基金年年有，明年中更多！ 每年的國家自然科學基金都是中國科研領域的風向標！通過分析國自然，可以看出最新的研究熱點、目前國家重視
基因編輯CRISPR/Cas9技術構建轉基因小鼠的優勢
當當當！敲黑板！！看這里！！！2016年國家自然科學基金放榜已經有一段時間啦！各位老師是不是還沉浸在喜悅中不能自拔呢？O(∩_∩)O清醒一下，我們的目標是：基金年年有，明年中更多！每年的國家自然科學基金都是中國科研領域的風向標！通過分析國自然，可以看出最新的研究熱點、目前國家重視的科目、臨床上亟待解