電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038, China 摘 要 電穿孔技術利用電場造成細胞膜的改變從而將DNA導入細胞內，同時還可用于細胞融合以及動物克隆等。基因電轉移的效率通常比化學法提高1-2個數量級，主要與脈沖波形、長度、緩沖液等有關。方波直流電脈沖應用廣泛，在有關細胞核移植的多項研究報告中均指出其重要作用。關鍵詞 基因轉移，胚胎克隆，電穿孔。過去十年中，關于基因功能的研究取得了豐碩的成果，并因此帶動了基因工程、基......閱讀全文
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Insti
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
轉基因動物技術
從20世紀70年代中期開始，就有人嘗試用各種辦法向動物體內轉移外源基因。如將牛奶成分中特有的基因轉移到白鼠體內，這些外來基因在白鼠體內重組后，白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。這種通過人工方法獲得外來基因的白鼠，稱為轉基因鼠。 轉基因動物技術的核心，是把遺傳的功能單位──基因轉移到動物體內，
轉基因動物技術(一)
轉基因動物自1980--1981年產生后，迅速發展。它克服了物種之間的生殖隔離，實現了動物物種之間遺傳物質的交換和重組，這不僅為遺傳物質的研究提供了新的手段，豐富了物種的基因庫，也擴大了生命科學的視野，由于轉基因動物技術具有分子及細胞水平操作、整體表達的特點，使得人們能從更完整的系統中去認識生物分子
轉基因動物技術概述
從20世紀70年代中期開始，就有人嘗試用各種辦法向動物體內轉移外源基因。如將牛奶成分中特有的基因轉移到白鼠體內，這些外來基因在白鼠體內重組后，白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。這種通過人工方法獲得外來基因的白鼠，稱為轉基因鼠。 轉基因動物技術的核心，是把遺傳的功能單位──基因轉移到動物體內，使它成為動物
轉基因技術的發展及其在轉基因動植物的應用
自從人類學會蓄養動物、耕作植物以來，我們的祖先就從未停止過對物種的遺傳改良。過去的幾千年里改良物種的主要方式：針對自然環境造成的突變或無意的人為因素所產生的優良基因和重組個體進行選育和利用，從而通過隨機和自然的積累優化基因。然而這種極低幾率且無人類控制性的被動模式大大阻礙了農業的發展，迫切地需要
轉基因技術的發展及其在轉基因動植物的應用（一）
轉基因技術的發展自從人類學會蓄養動物、耕作植物以來，我們的祖先就從未停止過對物種的遺傳改良。過去的幾千年里改良物種的主要方式：針對自然環境造成的突變或無意的人為因素所產生的優良基因和重組個體進行選育和利用，從而通過隨機和自然的積累優化基因。然而這種極低幾率且無人類控制性的被動模式大大阻礙了農業的發展
基因印記與動物克隆技術
基因印記 (imprinting) 對核移植后基因組重新編程的影響。基因印記現象在哺乳動物的發育過程中普遍存在,它是指基因的表達與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有些印記基因只從母源染色體上表達,而有些則只從父源染色體上表達。基因印記與動物克隆技術的成功及不足有何關系值得深入研究。
動物轉基因技術的過程介紹
動物轉基因就是基因組中含有外源基因的動物。它是按照預先的設計，通過細胞融合、細胞重組、遺傳物質轉移、染色體工程和基因工程技術將外源基因導入精子、卵細胞或受精卵，再以生殖工程技術，有可能育成轉基因動物。 通過生長素基因、多產基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、角蛋白基因、抗寄生蟲基因、抗
轉基因技術的發展及其在轉基因動植物的應用
自從人類學會蓄養動物、耕作植物以來，我們的祖先就從未停止過對物種的遺傳改良。過去的幾千年里改良物種的主要方式：針對自然環境造成的突變或無意的人為因素所產生的優良基因和重組個體進行選育和利用，從而通過隨機和自然的積累優化基因。然而這種極低幾率且無人類控制性的被動模式大大阻礙了農業的發展，迫切地需要
轉基因技術的發展與轉基因動植物
1.轉基因技術的發展 自從人類學會蓄養動物、耕作植物以來，我們的祖先就從未停止過對物種的遺傳改良。過去的幾千年里改良物種的主要方式：針對自然環境造成的突變或無意的人為因素所產生的優良基因和重組個體進行選育和利用，從而通過隨機和自然的積累優化基因。然而這種極低幾率且無人類控制性的被動模式大大
轉基因技術的發展與轉基因動植物
1.轉基因技術的發展??? 自從人類學會蓄養動物、耕作植物以來，我們的祖先就從未停止過對物種的遺傳改良。過去的幾千年里改良物種的主要方式：針對自然環境造成的突變或無意的人為因素所產生的優良基因和重組個體進行選育和利用，從而通過隨機和自然的積累優化基因。然而這種極低幾率且無人類控制性的被動模式大大
電穿孔技術簡介
電穿孔（Electroporation）也叫電轉染，是通過高強度的電場作用，瞬時提高細胞膜的通透性，從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法，是一種有價值和有效的替代方法。
動物實驗技術：轉基因小鼠制備實驗
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3、第二天上午9:00前觀察供體、受體，
電穿孔轉染真核細胞實驗——電穿孔轉染哺乳動物細胞
電穿孔法應用高壓電擊短暫或穩定地將DNA導人細胞，是一種目前大受好評的方法。它適用于多數類型的細胞，既可產生高頻率的穩定轉染，又可產生短暫的基因表達，并且由于其所需步驟甚少，因而比其他技術更為容易。實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材電穿孔儀器電擊池實驗步驟1. ?在完全
轉基因技術的發展及其在轉基因動植物的應用（二）
體細胞核移植是近些年來新出現的一種轉基因技術。該方法是先把外源基因與供體細胞在培養基中培養，使外源基因整合到供體細胞上，然后將供體細胞細胞核移植到受體細胞——去核卵母細胞，構成重建胚，再把其移植到假孕母體，待其妊娠、分娩，便可得到轉基因的克隆動物。在這一技術中，外源基因的穩定表達和重建胚的良好發育是
我國學者培育出可同時表達4種熒光蛋白的克隆豬
記者在中科院廣州生物醫藥與健康研究院獲悉，該院近期成功培育出一種特殊的轉基因克隆豬，這種克隆豬在特定波長的激發光下可分別發出紅、黃、綠、青4種熒光，這是國際上首次獲得能夠同時表達4種熒光蛋白的轉基因克隆豬。 據研究人員介紹，該項成果的運用，將極大地促進含多種優良性狀的轉基因克隆豬的研究與產業化
電穿孔技術物理機制
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子，例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明，該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的，所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中，阻擋材料被電離，產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔的技術特點
電穿孔（Electroporation）也叫電轉染，是通過高強度的電場作用，瞬時提高細胞膜的通透性，從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法，是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔技術的應用
當細胞置于非常高的電場中，細胞膜就變得具有通透性，能讓外界的分子擴散進細胞內，這一現象稱為電穿孔。運用這一技術，許多物質，包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法，電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型，包括細菌、酵母、植物和動物細胞；而且，它還能作為注射方法（稱為
電穿孔的技術簡介
電穿孔或電滲透是微生物學技術，其中將電場施加到細胞以增加細胞膜的滲透性，從而允許化學品，藥物或DNA被引入細胞。在微生物學中，電穿孔過程通常用于通過引入新的編碼DNA來轉化細菌，酵母或植物原生質體。如果細菌和質粒混合在一起后，質粒可以在電穿孔后轉移到細菌中，盡管取決于正在轉移的細胞穿透肽或CellS
電穿孔技術醫療應用
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所，由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下，他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖，并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔，2007年
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ 細胞系和細胞類型 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato，Tr
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？（一）
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ ? ? 細胞系和細胞類型 ? ? 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 ? ? 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, ?Rice, Tomato
電穿孔技術的技術優勢
與其他常用的導入外源物質的方法相比，電穿孔具有很多優點。首先，不必象顯微注射那樣使用玻璃針，不需要技術培訓和昂貴的設備，可以一次對成百萬的細胞進行注射。第二，與用化學物質相比，電穿孔幾乎沒有生物或化學副作用。第三，因為電穿孔是一種物理方法，較少依賴細胞類型，因而應用廣泛。實際上，對大多數細胞類型，用
歐盟提議禁止動物克隆和轉基因生物－以促進食品安全
據美聯社6月18日報道，歐洲議會17日通過初步法案，提議要在歐盟內部禁止克隆農場動物和轉基因生物。 據報道，歐盟委員會17日向歐洲議會提交了關于禁止動物克隆和轉基因食品的議案，希望能夠通過相關法案減輕歐盟各成員國對食品安全的擔憂。 歐洲議會環境和農業委員會稱，歐盟需要更加嚴格地限制農場動物
CRISPR重要成果:電穿孔技術
簡單的電穿孔似乎使T細胞更容易接受新的遺傳物質，這可以加速免疫療法的發展。 加州大學舊金山分校的研究人員發表了題為“Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting”的文章，指
電穿孔和電融合技術
實驗概要了解細胞電穿孔(electroporation)和電融合(Electrofusion Method)的基本原理。學習電穿孔和電融合基本技術。實驗原理當細胞置于非常高的電場中，細胞膜就變得具有通透性，能讓外界的分子擴散進細胞內，這一現象稱為電穿孔。運用這一技術，許多物質，包括DNA、 ? RN