免疫膠體金技術1
（一） 原理 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合，由于這種結合是靜電結合，所以不影響蛋白質的生物特性。 膠體金除了與蛋白質結合以外，還可以與許多其它生物大分子結合，如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應，加上結合物的免疫和生物學特性，因而使膠體金廣泛地應用于免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 （二） 膠體金的制備 根據不同的還原劑可以制備大小不同的膠體金顆粒。常用來制備膠體金顆粒的方法如下。 1．枸櫞酸三鈉還原法 （1）10nm膠體金粒的制備：取0.01％HAu......閱讀全文
常用的免疫膠體金檢測技術膠體金免疫層析法
膠體金免疫層析法將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結合墊上，當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后，通過毛細作用向前移動，溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應，再移動至固定的抗原或抗體的區域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在
免疫膠體金技術簡介
免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，英文縮寫為：GICT。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩
免疫膠體金技術3
為了得到顆粒均一的免疫金試劑，可將上述初步純化的結合物再進一步用10％～30％蔗糖或甘油進行密度梯度離心,分帶收集不同梯度的膠體金與蛋白的結合物。（2）凝膠過濾法：此法只適用于以BSA作穩定劑的膠體金蛋白結合物的純化。將膠體金蛋白結合物裝入透析袋，在硅膠中脫水濃縮至原體積的 1／5～1／10。再
免疫膠體金技術1
（一） 原理 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與
免疫膠體金技術介紹
一、免疫膠體金技術的基本知識1、膠體金的概念氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金。2、免疫金標記技術膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質
免疫膠體金技術簡介
免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，英文縮寫為：GICT。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩
免疫膠體金技術2
（3）配制膠體金溶液的pH以中性（pH7.2）較好。（4）氯金酸的質量要求上乘，雜質少。最好是進口的。（5）氯金酸配成1％水溶液在4℃可保持數月穩定，由于氯金酸易潮解，因此在配制時，最好將整個小包裝一次性溶解。 （三） 膠體金標記蛋白的制備 膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值，在
常用的免疫膠體金檢測技術免疫膠體金光鏡染色法
細胞懸液涂片或組織切片，可用膠體金標記的抗體進行染色，也可在膠體金標記的基礎上，以銀顯影液增強標記，使被還原的銀原子沉積于已標記的金顆粒表面，可明顯增強膠體金標記的敏感性。免疫膠體金電鏡染色法可用膠體金標記的抗體或抗抗體與負染病毒樣本或組織超薄切片結合，然后進行負染。可用于病毒形態的觀察和病毒檢測。
免疫膠體金的制備過程
1蛋白質的處理:由于鹽類成分能影響金溶膠對蛋白質的吸附,并可使溶膠聚沉,故致敏前應先對低離子強度的水透析。必須注意,蛋白質溶液應絕對澄清無細小微粒,否則應先用微孔濾膜或超速離心除去。一般情況下應避免磷酸根離子和硼酸根離子的存在,因為它們都可吸附于顆粒表面而減弱膠體金對蛋白質的吸附。2蛋白質最適用量的
免疫電鏡膠體金標記法
第四節 免疫電鏡膠體金標記法 金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，
免疫膠體金技術的應用
膠體金標記技術由于標記物的制備簡便，方法敏感、特異，不需要使用放射性同位素，或有潛在致癌物質的酶顯色底物，也不要熒光顯微鏡，它的應用范圍廣，除應用于光鏡或電鏡的免疫組化法外，更廣泛地應用于各種液相免疫測定和固相免疫分析以及流式細胞術等。 1．液相免疫測定：將膠體金與抗體結合，建立微量凝集試驗檢
免疫膠體金的應用特點
1971年Faulk 和Taytor將膠體金引入免疫化學，此后免疫膠體金技術作為一種新的免疫學方法，在生物醫學各領域得到了日益廣泛的應用。在醫學檢驗中的應用主要是免疫層析法( immunochromatography)和快速免疫金滲濾法(Dot-immuogold filtration assay
免疫膠體金技術測試原理
層析法免疫膠體金檢測試劑實際上是免疫金標記技術和抗原抗體反應相結合而形成的一種應用形式，相比ELISA試劑，除標記物不同外，同樣服從于抗原抗體反應的特性。此種檢測方法具有明顯的優點：*方便使用，體現在操作簡單，不需經過特殊培訓。*短時間獲得檢測結果，一般10－15分鐘即可得出結論。*不同環境下的穩定
免疫膠體金技術的應用
膠體金標記技術由于標記物的制備簡便，方法敏感、特異，不需要使用放射性同位素，或有潛在致癌物質的酶顯色底物，也不要熒光顯微鏡，它的應用范圍廣，除應用于光鏡或電鏡的免疫組化法外，更廣泛地應用于各種液相免疫測定和固相免疫分析以及流式細胞術等。1．液相免疫測定：將膠體金與抗體結合，建立微量凝集試驗檢測相應的
免疫膠體金(Immune－colloidal－gold)
原理??免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（?HAuCl4?）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與蛋白質分子的正電荷基
免疫膠體金技術的簡介
免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，英文縮寫為：GICT。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一
免疫組化方法免疫膠體金技術
免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩定地吸附蛋白，對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對組織或細胞內的抗原進行定性、定位，甚至定量研究。由于膠
膠體金的穩定性因素及免疫膠體金貯存
膠體金有很高的動力學穩定性,在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢,可放置數年。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚,但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩定性
免疫膠體金技術的使用優點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；(2)成本低，不需要特殊的儀器設備；(3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件；(4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本；(5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰減現象；(6)膠體金
常用的免疫膠體金檢測技術
（1）免疫膠體金光鏡染色法細胞懸液涂片或組織切片，可用膠體金標記的抗體進行染色，也可在膠體金標記的基礎上，以銀顯影液增強標記，使被還原的銀原子沉積于已標記的金顆粒表面，可明顯增強膠體金標記的敏感性。免疫膠體金電鏡染色法可用膠體金標記的抗體或抗抗體與負染病毒樣本或組織超薄切片結合，然后進行負染。可用于
免疫膠體金技術的使用優點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；(2)成本低，不需要特殊的儀器設備；(3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件；(4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本；(5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰減現象；(6)膠體金
免疫膠體金技術的使用優點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；(2)成本低，不需要特殊的儀器設備；(3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件；(4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本；(5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰減現象；(6)膠體金
免疫膠體金技術的使用優點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；(2)成本低，不需要特殊的儀器設備；(3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件；(4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本；(5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰減現象；(6)膠體金
免疫膠體金技術的測試原理
層析法免疫膠體金檢測試劑實際上是免疫金標記技術和抗原抗體反應相結合而形成的一種應用形式，相比ELISA試劑，除標記物不同外，同樣服從于抗原抗體反應的特性。此種檢測方法具有明顯的優點：*方便使用，體現在操作簡單，不需經過特殊培訓。*短時間獲得檢測結果，一般10－15分鐘即可得出結論。*不同環境下的穩定
免疫膠體金技術的測試原理
層析法免疫膠體金檢測試劑實際上是免疫金標記技術和抗原抗體反應相結合而形成的一種應用形式，相比ELISA試劑，除標記物不同外，同樣服從于抗原抗體反應的特性。此種檢測方法具有明顯的優點：*方便使用，體現在操作簡單，不需經過特殊培訓。*短時間獲得檢測結果，一般10－15分鐘即可得出結論。*不同環境下的穩定
免疫膠體金技術的使用優點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；(2)成本低，不需要特殊的儀器設備；(3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件；(4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本；(5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰減現象；(6)膠體金
免疫膠體金技術的測試原理
層析法免疫膠體金檢測試劑實際上是免疫金標記技術和抗原抗體反應相結合而形成的一種應用形式，相比ELISA試劑，除標記物不同外，同樣服從于抗原抗體反應的特性。此種檢測方法具有明顯的優點：*方便使用，體現在操作簡單，不需經過特殊培訓。*短時間獲得檢測結果，一般10－15分鐘即可得出結論。*不同環境下的穩定
免疫膠體金技術的使用優點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成； (2)成本低，不需要特殊的儀器設備； (3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件； (4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本； (5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰
免疫膠體金技術的顆粒制備
根據不同的還原劑可以制備大小不同的膠體金顆粒。常用來制備膠體金顆粒的方法如下。 1．枸櫞酸三鈉還原法 （1）10nm膠體金粒的制備：取0.01%HAuCl4水溶液100ml，加入1%枸櫞酸三鈉水溶液3ml，加熱煮沸30min，冷卻至4℃，溶液呈紅色。 （2）15nm膠體金顆粒的制備：取0.
免疫膠體金技術的應用特點
(1)使用方便快速，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；(2)成本低，不需要特殊的儀器設備；(3)應用范圍廣，可適應多種檢測條件；(4)可以進行多項檢測，若陽性樣本比較難獲得，多項檢測可以節省樣品，降低成本；(5)標記物穩定，標記樣品在4℃貯存兩年年以上，無信號衰減現象；(6)膠體金