尿海藻糖酶的酶含量的測定
1. 原理利用抗海藻糖酶單克隆抗體的夾心ELISA方法檢測酶蛋白的含量。2. 步驟國外報導用重組海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制備出抗人海藻糖酶的單克隆抗體，然后經過包被、封閉等步驟，用夾心ELISA方法測定出酶蛋白的濃度。3. 結果IshiharaR等用ELISA法測定健康組尿海藻糖酶蛋白的濃度為466±343ng·gcreatinin-1。健康實驗者的尿海藻糖酶活性和含量之間有正相關（p<0.01，r=0.15）。這些數值均無性別及年齡差異。海藻糖酶在正常人尿液中的活性很低，而且尿液中該酶活性是否能反映真實酶濃度也不確定。急性腎衰患者尿液中存在75kDa和30kDa酶蛋白分子，30kDa酶蛋白分子也許是蛋白水解酶降解完整海藻糖酶的產物，盡管尿液中存在75kDa酶蛋白分子，該患者尿海藻糖酶活性并不升高，說明尿液中酶活性已喪失，由于經典測酶活性方法的影響因素多而且靈敏度和特異性均不及免疫學方法測酶質量。因此，尿海藻糖......閱讀全文
尿海藻糖酶的酶含量的測定
1. 原理利用抗海藻糖酶單克隆抗體的夾心ELISA方法檢測酶蛋白的含量。2. 步驟國外報導用重組海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制備出抗人海藻糖酶的單克隆抗體，然后經過包被、封閉等步驟，用夾心ELISA方法測定出酶蛋白的濃度。3. 結果IshiharaR等用ELISA法測定健康組尿海藻糖酶蛋白的
尿海藻糖酶的酶活性的測定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI
尿海藻糖酶的測定方法
一、酶活性的測定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。 2. 步驟 將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1
尿海藻糖酶的測定方法
酶活性的測定1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標
尿海藻糖酶定量測定的技術要點
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備 國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法（HPLC）分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性（反相）和電荷（離子交換）方面的差別來實現樣
尿海藻糖酶定量測定的技術要點
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法（HPLC）分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性（反相）和電荷（離子交換）方面的差別來實現樣品的分離
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備
國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法（HPLC）分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性（反相）和電荷（離子交換）方面的差別來實現樣品的分離的。反相HPLC的優點是分辨率大。利用分子生物學方法
海藻糖酶的臨床應用
急、慢性腎小球疾病慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說，急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論：急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的臨床應用
急、慢性腎小球疾病慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說，急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論：急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的特性介紹
理化特性 海藻糖酶是一種胞外酶，位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣，國際酶學編號為EC3.2.1.28，屬于水解酶類，它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37，在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物，腎臟中提純，經SDS-
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一種胞外酶，位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣，國際酶學編號為EC3.2.1.28，屬于水解酶類，它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37，在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物，腎臟中提純，經SDS-PAGE電泳顯示
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一種胞外酶，位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣，國際酶學編號為EC3.2.1.28，屬于水解酶類，它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37，在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物，腎臟中提純，經SDS-PAGE電泳顯示
海藻糖酶的基本信息
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一種，對海藻糖有特異作用，水解后成為2個分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人，除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外，在血漿α2-球蛋白部分中，也可檢出其活性，特別是在腎臟中活性很強。
關于海藻糖酶的臨床應用介紹
急、慢性腎小球疾病 慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說，急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論：急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍，
海藻糖酶的基本信息概述
通過抑制內源海藻糖酶水平來修飾海藻糖-6-磷酸水平從而調節代謝。 本發明在細胞代謝碳流調節領域內。已經發現導入細胞內糖類海藻糖-6-磷酸（T-6-P）有效來源的變化會誘導體內細胞、組織和器官的發育和/或組成的變化。這些變化可通過抑制內源海藻糖酶來誘導，該酶能夠將海藻糖水解成兩個葡萄糖組分。
海藻糖酶的國內應用前景
近年來的研究發現，腎小管-間質損害是決定腎功能減退的主要因素，而近端腎小管的損害義是腎功能惡化的重要原因。早期發現腎小管損害是錳床診斷和治療的關鍵，而尿海藻糖酶在腎近端小管損害方面具有早期、特異、靈敏的診斷價值，目前國內實驗室尚未開展此項檢測，臨床應用前景很大。當前首要的工作是用分子生物學方法制
海藻糖酶的生物學特性
在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用，有報道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉，而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報道說，尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關。
概述海藻糖酶缺乏的發病機制
嬰兒因為遺傳的因素可有蔗糖酶及異麥芽糖酶缺乏。蔗糖-異麥芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖，而異麥芽糖缺陷是繼發的。有研究顯示該酶在細胞內的處理有缺陷，堆積在內質網內。酶復合物在高爾基復合體內被阻斷，而改變了的酶卻被轉運至細胞表面。由于以上各種因素，這種單基因疾病可呈異質性。該酶基因定位于染色體3q，
海藻糖酶的生物學特性
在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用，有報道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉，而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報道說，尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關。
海藻糖酶的基本信息介紹
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一種，對海藻糖有特異作用，水解后成為2個分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人，除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外，在血漿α2-球蛋白部分中，也可檢出其活性，特別是在腎臟中活性很強。
關于海藻糖酶缺乏的基本介紹
海藻糖酶缺乏，是屬于二糖酶缺乏癥臨床分類之一。本病又稱雙糖不耐受癥，系指各種先天性或后天性疾病，使小腸黏膜刷狀緣雙糖酶缺乏，使雙糖的消化、吸收發生障礙，進食含有雙糖的食物時發生的一系列癥狀和體征。 海藻糖酶缺乏：正常人小腸黏膜內有多種二糖酶，如乳糖酶能將乳糖分解為半乳糖及葡萄糖；麥芽糖酶能將麥
概述海藻糖酶缺乏的發－病機制
嬰兒因為遺傳的因素可有蔗糖酶及異麥芽糖酶缺乏。蔗糖-異麥芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖，而異麥芽糖缺陷是繼發的。有研究顯示該酶在細胞內的處理有缺陷，堆積在內質網內。酶復合物在高爾基復合體內被阻斷，而改變了的酶卻被轉運至細胞表面。由于以上各種因素，這種單基因疾病可呈異質性。該酶基因定位于染色體3q，
抗海藻糖酶單克隆抗體的制備
通過腹腔注射加佐劑的重組蛋白或合成的多肽來免疫8周齡的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫問隔兩周后，每周連續注射3-4次。最后一次注射后3-4天殺死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法將脾細胞與B細胞瘤株P3-X63-Ag8融合。細胞融合產生8種雜交瘤克隆株：KM2275、KM2276、K
關于海藻糖酶缺乏的發病原因分析
正常人小腸黏膜內有多種二糖酶，如乳糖酶能將乳糖分解為半乳糖及葡萄糖；麥芽糖酶能將麥芽糖分解為葡萄糖及異麥芽糖；異麥芽糖酶能將異麥芽糖分解為兩個分子的葡萄糖；蔗糖酶能分解蔗糖為葡萄糖及果糖；還有海藻糖酶能分解海藻糖為兩個分子的葡萄糖。因為某些原因使二糖酶缺乏，從而二糖的消化吸收發生障礙導致腹瀉。臨
海藻糖酶的基本信息及分布情況
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一種，對海藻糖有特異作用，水解后成為2個分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人，除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外，在血漿α2-球蛋白部分中，也可檢出其活性，特別是在腎臟中活性很強。
氟尿苷的含量測定
照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液,搖勻。對照品溶液取氟尿苷對照品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.1mg的溶液,搖勻。系統適用性溶液、色譜條件與系統適用性要求見有關物質項下,進樣體積1
木聚糖酶酶活測定方法
對酶制劑中各種酶活性進行定量分析具有重要意義。首先，它是酶制劑和飼料產品質量檢測的依據。酶制劑是生命活性物質，其活性隨飼料的加工保存時間與條件以及飼料中其它成分的變化而變化，因此應對各個生產環節添加酶制劑的實際效價進行檢測。其次，準確的酶活檢測方法也是根據飼料中NSP含量和組成來合理調整添加酶的種類
木聚糖酶酶活測定方法
對酶制劑中各種酶活性進行定量分析具有重要意義。首先，它是酶制劑和飼料產品質量檢測的依據。酶制劑是生命活性物質，其活性隨飼料的加工保存時間與條件以及飼料中其它成分的變化而變化，因此應對各個生產環節添加酶制劑的實際效價進行檢測。其次，準確的酶活檢測方法也是根據飼料中NSP含量和組成來合理調整添加酶的種類
氟尿苷的含量測定方法
氟化物緩沖液取氯化鈉55g和枸櫞酸鈉0.5g,置1000m量瓶中,加水約350ml使溶解,小心加入氫氧化鈉75g,振搖使溶解,放冷,邊攪拌邊小心加入冰醋酸225ml,放冷,加異丙醇300ml,用水稀釋至1000ml,搖勻(pH值為5.0~5.5)。供試品溶液取本品1.0g,精密稱定,置100ml量瓶
昆蟲海藻糖酶(trehalase)ELISA試劑盒簡介
昆蟲海藻糖酶(trehalase)ELISA試劑盒適用于檢測人動植物組織勻漿、細胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關生物液體中濃度。檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被抗體的微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色