毛細管電泳SELEX技術(CESELEX)技術篩選適配體的介紹
不同組分間的荷質比存在一定差異,導致物質的電泳遷移率有所不同,從而實現不同組分的分離。CE-SELEX 能在2-4輪內實現高親和力適配體的篩選,常被用于篩選蛋白質、脂多糖、多肽等大分子物質。Yang等首次利用 CE-SELEX 實現了對小分子物質甲基嗎啉的適配體的篩選,經過3輪篩選后獲得了8條高親和力適配體,其解離常數為到幾百nM 到幾uM,其中兩條序列能夠催化中卟啉的金屬插入反應,催化強度分別為1.7倍和2倍。針對親和力較弱的適配體與靶標體系存在動態解離平衡這一問題,科研工作者發展了平衡混合物的非平衡毛細管電泳(NECEEM)、平衡混合物的平衡毛細管電泳(ECEEM)和 Non-SELEX 毛細管電泳技術。Ashley 等應用 Non-SELEX 技術篩選獲得過氧化氫酶的適配體,作者應用熒光分光廣度計與毛細管親和力電泳表征了其親和力與特異性,結果顯示適配體對靶標的親和力比與其他四種蛋白的親和力高至100倍,也顯示了其高特異......閱讀全文
毛細管電泳SELEX-技術(CESELEX)技術篩選適配體的介紹
不同組分間的荷質比存在一定差異,導致物質的電泳遷移率有所不同,從而實現不同組分的分離。CE-SELEX 能在2-4輪內實現高親和力適配體的篩選,常被用于篩選蛋白質、脂多糖、多肽等大分子物質。Yang等首次利用 CE-SELEX 實現了對小分子物質甲基嗎啉的適配體的篩選,經過3輪篩選后獲得了8條高
細胞-SELEX(CellSELEX)技術篩選適配體的方法介紹
該方法的主要靶標物質是細胞、細菌或病毒等,操作過程中采用離心、沉淀的方法分離去除未結合適配體,再通過熱解離或酶切作用獲得特異性適配體序列。Liang 等針對感染狂犬病毒的活細胞,應用 Cell-SELEX 經過35 輪重復篩選獲得了 5 條 DNA 適配體。病毒效價測定與實時定量反轉錄 PCR
熒光磁珠-SELEX(FluMagSELEX)技術篩選適配體的介紹
熒光磁珠 SELEX(FluMag-SELEX)技術。FluMag-SELEX 是結合應用磁珠與 SELEX技術篩選熒光適配體的一種方法,該方法需要靶標量少且可通過熒光直觀測定結合適配體的量。Kim 等應用FluMag-SELEX 技術篩選獲得廣譜抗炎性藥物布洛芬的5條特異性適配體。其中三條是外
適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是
適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是
適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是
【卡梅德生物】SELEX技術|核酸適配體文庫篩選服務
? ?核酸適配體文庫篩選是一項關鍵的技術,為發現特定核酸序列與目標分子高度親和結合的適配體提供了強有力的工具。這一技術在諸多領域中展現了突破性的應用,包括藥物開發、診斷技術以及基因治療等。? ?核酸適配體是一類能夠與目標分子特異性結合的寡核苷酸序列,其結構和功能類似于抗體。與抗體相比,核酸適配體具有
SELEX技術
這個技術就是一個文庫技術(library)加一套篩選技術(bio-panning)。當然,SELEX技術僅僅是分子進化工程的一種而已。實際上,理解了文庫技術和篩選技術,不僅selex理解了,其他熱門技術如Phage display等等也懂了。我知道的著作中,趙康等主編的Frontiers of Bi
利用CellSELEX技術識別特定腫瘤細胞的核酸適配體的成果
發現新的生物標志物和發展新的分子探針,在分子水平上探索生命過程和疾病發生發展機制是現代生物醫學領域前沿研究方向之一。 在國家自然科學基金委、科技部和中國科學院的支持下,中科院化學研究所活體分析化學重點實驗室上官棣華課題組研究人員長期致力于生物標志物和分子探針的研究。近年來,他們利用Cell-S
隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗
實驗方法原理 SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的存在,可以形成發夾、假結、凸環、G-四聚體等多種空間結 構,它
隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗
隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗可用于:(1)體外診斷;(2)體內治療等。實驗方法原理SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的
隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的存在,可以形
親和質譜技術:藥物靶標配體的高通量篩選
疾病相關的藥物靶標蛋白與小分子化合物的親和作用研究是當今開發新藥分子的熱點領域。親和質譜技術(Affinity Selection Mass Spectrometry)作為一種間接篩選小分子配體的方法,已經成功應用于許多受體、酶等靶蛋白的配體的篩選,并且得到了廣泛的應用。 親和質譜分析的基本原
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗可用于:(1)體外診斷;(2)體內治療等。實驗方法原理SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。實驗材料3
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
實驗方法原理 SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。實驗材料 3' 引物鏈親和素磁珠儀器、耗材 電泳儀PCR 儀離心機凝膠成像儀
核酸適配體技術主要的應用介紹
1990 年,Tuerk與Ellingtong基于 SELEX 技術率先分別篩選獲得了噬菌體T4DNA聚合酶與有機染料的特異性RNA適配體。自此以來,適配體已經被廣泛應用于細胞成像、新藥研發、疾病治療與微生物檢測等眾多方面。細胞成像:熒光標記適配體或適配體復合物是適配體應用于細胞成像的基礎。流式細胞
SELEX技術——抗體工程的新紀元2
4、異質性程度更高?隨機寡核苷酸文庫中每一條隨機寡核苷酸,其隨機區的每個核苷酸位置都存在四種可能性,如果隨機區有n個核苷酸,那么隨機序列的多樣性有n4種,再加上稀有堿基或人為修飾堿基,隨機序列的多樣性會更多。一般隨機區域的長度為30個核苷酸左右,文庫的容量能達到1014~15。比同等長度的肽熱溫度結
SELEX技術——抗體工程的新紀元1
回顧20世紀,分子生物學及其相關學科的發展給科學研究和人類生活帶來了日新月異的變化,同時也更新了一些傳統概念。比如,自20世紀30年代以來,人們一直認為"所有的酶都是蛋白質"。1986年,Lerner等首次研制成功催化水解羧酸酯的抗體,稱之為抗體酶(Abzyme)。1987 年,Cech等發
概述適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。 基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜
配體印跡法的技術用途
中文名稱配體印跡法英文名稱ligand blotting定 義受體或配體經電泳或層析等方法分離后,轉移到適宜的薄膜上,再與相應的配體或受體結合,是檢測配體與受體相互作用的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
核酸適體分子識別機制及其結構優化策略研究中獲進展
核酸適體(Aptamer)是利用指數富集的配體系統進化( Systematic Evolution of Ligands By Exponential Enrichment, SELEX) 技術篩選得到的能特異性識別靶標分子的單鏈寡核苷酸片段。核酸適體的靶標范圍非常廣泛,包括離子、小分子、大分子
高通量篩選的技術進展相關介紹
我國進行藥物高通量篩選的優勢首先是化合物來源廣泛,且多為天然;其次是對化合物生物活性的篩選目的較明確,無目的合成的化合物較少;第三,我國傳統藥物為篩選研究提供了一個巨大的資源庫,可從中藥中提取分離篩選新的化合物。這些優勢為藥物的高通量篩選打下了堅實基礎。 我國藥物高通量篩選初現規模:藥物高通量
關于核酸適配體簡介
SELEX 技術是20世紀90年代初新興并發展的一種體外指數富集配體的系統進化的組合化學技術,能夠有效地用于核酸結構分析與功能研究。核酸適配體(aptamer)是基于SELEX 技術從隨機寡核苷酸文庫中篩選獲得的對靶物質具有很高特異性與親和力的寡核苷酸序列。人工化學合成一個文庫容量為1014-1
核酸適配體簡介
SELEX 技術是20世紀90年代初新興并發展的一種體外指數富集配體的系統進化的組合化學技術,能夠有效地用于核酸結構分析與功能研究。核酸適配體(aptamer)是基于SELEX 技術從隨機寡核苷酸文庫中篩選獲得的對靶物質具有很高特異性與親和力的寡核苷酸序列。人工化學合成一個文庫容量為1014-101
核酸適配體簡介
SELEX 技術是20世紀90年代初新興并發展的一種體外指數富集配體的系統進化的組合化學技術,能夠有效地用于核酸結構分析與功能研究。核酸適配體(aptamer)是基于SELEX 技術從隨機寡核苷酸文庫中篩選獲得的對靶物質具有很高特異性與親和力的寡核苷酸序列。人工化學合成一個文庫容量為1014-101
抗體篩選技術匯總
近年來,生物藥的市場需求逐年擴容,其中抗體藥物因其靶向性好,治療效果顯著,在生物藥中占據著舉足輕重的地位,目前已經進入了抗體藥物發展的黃金時代。隨著抗體藥的需求越來越大,抗體篩選技術的發展也是日新月異,目前應用較普遍的有雜交瘤技術、抗體文庫篩選技術、納米抗體技術和轉基因小鼠抗體篩選技術。其中抗體
高通量篩選技術的實驗方法介紹
高通量篩選的實驗方法分子水平和細胞水平的實驗方法(或稱篩選模型)是實現藥物高通量篩選的技術基礎。由于藥物高通量篩選要求同時處理大量樣品,實驗體系必須微量化,而這些微量化的實驗方法應根據新的科研成果來建立。第四軍醫大學周四元研究認為,藥物高通量篩選模型的實驗方法,根據其生物學特點,可分為以下幾類:
高通量篩選技術的簡介
高通量篩選(High throughput screening,HTS)技術是指以分子水平和細胞水平的實驗方法為基礎,以微板形式作為實驗工具載體,以自動化操作系統執行試驗過程,以靈敏快速的檢測儀器采集實驗結果數據,以計算機分析處理實驗數據,在同一時間檢測數以千萬的樣品,并以得到的相應數據庫支持運
核酸適配體的基本概念
核酸適配體(Aptamer)是一段DNA(脫氧核糖核酸),RNA(核糖核酸)序列,XNA(核酸類似物)或肽。通常是利用體外篩選技術——指數富集的配體系統進化技術(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX),從核酸分