基因合成實驗
基因合成可應用于:(1)代謝通路合成;(2)基因網絡構建;(3)疫苗設計。難度系數 2.0共2人點評打分點評實驗,有機會獲丁當獎勵 +收藏 8人收藏基因合成實驗標簽: 基因 合成基因合成可應用于:(1)代謝通路合成;(2)基因網絡構建;(3)疫苗設計。基因合成實驗實驗方法原理基因合成是指在體外人工合成雙鏈DNA分子的技術,與寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是單鏈的,所能合成的最長片段僅為100nt左右,而基因合成則為雙鏈DNA分子合成,所能合成的長度范圍50bp-12 kb。基因合成是用人工方法合成基因的技術,是基因獲取的手段之一,相對于從已有生物中獲取基因來說,基因合成無需模板,因而不受基因來源限制。實驗材料DNA試劑、試劑盒dNTPDAN聚合酶乙醇TE限制性內切核酸酶緩沖液儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟1. 將兩種寡核苷酸各1 μg加入微量離心管中,加水至17 μl,再加2 μl 的1......閱讀全文
基因合成實驗
實驗材料?DNA試劑、試劑盒?dNTPDAN聚合酶乙醇TE限制性內切核酸酶緩沖液儀器、耗材?水浴鍋培養箱實驗步驟 1.? 將兩種寡核苷酸各1 μg加入微量離心管中,加水至17 μl,再加2 μl 的10×測序酶緩沖液。70℃加熱5 min,然后在合適的退火溫度下保溫5? min,取2 μl 留待以后
基因合成實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 基因合成是指在體外人工合成雙鏈DNA分子的技術,與寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是單鏈的,所能合成的最長片段僅為100nt左右,而基因合成則為雙鏈DNA分子合成,所能合成的長度范圍50bp-12 kb。基因合成是用人工方法合
基因合成實驗
基因合成可應用于:(1)代謝通路合成;(2)基因網絡構建;(3)疫苗設計。難度系數??2.0共2人點評打分點評實驗,有機會獲丁當獎勵?+收藏?8人收藏基因合成實驗標簽: 基因 合成基因合成可應用于:(1)代謝通路合成;(2)基因網絡構建;(3)疫苗設計。基因合成實驗實驗方法原理基因合成是指在體外人工
基因合成實驗
基因合成可應用于:(1)代謝通路合成;(2)基因網絡構建;(3)疫苗設計。實驗方法原理基因合成是指在體外人工合成雙鏈DNA分子的技術,與寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是單鏈的,所能合成的最長片段僅為100nt左右,而基因合成則為雙鏈DNA分子合成,所能合成的長度范圍50bp-12 kb。基因合成是用
探針合成實驗
實驗材料 基因試劑、試劑盒 轉錄緩沖液DTTRNA酶抑制劑CTPATPGTPS-UTP乙酸銨乙酸銨乙醇儀器、耗材 水浴鍋離心機培養箱烘箱實驗步驟 1. ?在一個含SP6、T3或T7啟動子的載體中,插入目的基因。在編碼序列下游酶切使質粒呈線性。DNA以酚/氯仿抽提,乙醇沉淀,70%乙醇洗后晾干。以無菌
cDNA-合成實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇 dNTP 隨機引物 來自方案 4 的 RNA 樣品 RNasin 反轉錄緩沖液
cDNA-合成實驗
試劑、試劑盒二硫蘇糖醇dNTP隨機引物來自方案 4 的 RNA 樣品RNasin反轉錄緩沖液儀器、耗材PCR 管子熱循環儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑0.1mol/L 二硫蘇糖醇dNTP(每種 2.5 mmol/L)隨機引物(20~40U/ml)(1034731,RocheApplied
探針合成實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 基因 試劑、試劑盒
探針合成實驗
實驗材料基因試劑、試劑盒轉錄緩沖液DTTRNA酶抑制劑CTPATPGTPS-UTP乙酸銨乙酸銨乙醇儀器、耗材水浴鍋離心機培養箱烘箱實驗步驟1. ?在一個含SP6、T3或T7啟動子的載體中,插入目的基因。在編碼序列下游酶切使質粒呈線性。DNA以酚/氯仿抽提,乙醇沉淀,70%乙醇洗后晾干。以無菌水重溶沉
cDNA-合成實驗
試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇dNTP隨機引物來自方案 4 的 RNA 樣品 RNasin反轉錄緩沖液儀器、耗材 PCR 管子 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑0.1mol/L 二硫蘇糖醇dNTP(每種 2.5 mmol/L)隨機引物(20~40U/ml)(1034731,RocheAp
基因合成產業未老先衰?
生物行業比較窄,集中在基因合成上就更窄了。 輸入已知的基因序列,核苷酸合成儀就能合成大量脂肪型脂肪酸結合蛋白基因用于研究。很多研究機構紛紛購買了這種用來合成基因的實驗儀器,價格幾萬美元到幾十萬美元不等。但是,科學家們很快發現,自己合成基因成本仍然太高。 獨立出的“基因合成產業” 基因合成是
線粒體基因的合成原理
線粒體基因組能夠單獨進行復制、轉錄及合成蛋白質,但這并不意味著線粒體基因組的遺傳完全不受核基因的控制。線粒體自身結構和生命活動都需要核基因的參與并受其控制,說明真核細胞內盡管存在兩個遺傳系統,一個在細胞核內,一個在細胞質內,各自合成一些蛋白質和基因產物,造成了細胞核和細胞質對遺傳的相互作用;但是,核
蛋白質合成實驗
實驗步驟 材料無菌細胞培養,如 1X104~ 1X106 個細胞,24 孔板3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特異活性并不重要,因為它將由培養基中的亮氨酸濃度決定)非無菌SLS 或 SDS,1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH
蛋白質合成實驗
實驗步驟材料無菌細胞培養,如 1X104~ 1X106?個細胞,24 孔板3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特異活性并不重要,因為它將由培養基中的亮氨酸濃度決定)非無菌SLS 或 SDS,1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三
蛋白質合成實驗
實驗步驟 材料 無菌 細胞培養,如 1X104~ 1X106 個細胞,24 孔板 3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特異活性并不重要,因為它將由培養基中的亮氨酸濃度決定) 非無菌 SLS 或
蛋白質合成實驗
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 材料 無菌 細胞培養,如 1X104~ 1X106 個細胞,24 孔板 3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特異活性并不重要
有機合成實驗入門指南-實驗裝置設置
實驗檢查玻璃儀器和反應設備。反應瓶是否有裂紋,滴液漏斗是否滲漏,油浴和磁力攪拌是否正常等。搭建裝置要重心平穩、安全,并保持十字平衡,各種反應一定在反應瓶下面放置保護的容器,以防發生意外泄漏(攪拌子打破瓶子,反應過速外溢)而無法回收原料及產品。選擇合適的反應瓶:對于均相反應,液面不超過容器的2/3;對
合成培養基配制實驗
實驗方法原理 干粉型培養基是用球磨機或噴霧法將各種培養液成分混合后制成,具有性質穩定、便于貯存和運輸、使用方法簡便等優點。具有維持細胞生存和代謝需要的效果,與傳統方式制備的合成培養基一樣好。干粉培養基因顆粒極細,很容易完全溶解于水,配制培養液方法極易掌握,只要按照說明書將規定重量的干粉溶解在一定量的
單鏈-cDNA-的合成實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去除 RNA 酶的雙蒸水10XRT-PCR 緩沖液(去除 RNA 酶的雙蒸水,100 mmol/LTris-HCl、pH8.3,500 mmol/LKC1,15 mmol/LMgCl2)2. 酶和酶緩沖液
合成培養基配制實驗
合成培養液的配制 無血清培養基的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 干粉型培養基是用球磨機或噴霧法將各種培養液成分混合后制成,具有性質穩定、便于貯存和運輸、使用方法
單鏈-cDNA-的合成實驗
一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去除 RNA 酶的雙蒸水10XRT-PCR 緩沖液(去除 RNA 酶的雙蒸水,100 mmol/LTris-HCl、pH8.3,500 mmol/LKC1,15 mmol/LMgCl2)2. 酶和酶緩沖液MMLV 逆轉錄酶(100~200U/ul)SUPERaseIN
單鏈-cDNA-的合成實驗
本方案利用的是總RNA,因為如果使用18SrRNA作內對照,在后續實驗中就不能使用帶poly(A)的RNA。并且必須用DNA酶處理RNA,以去除所有污染的基因組DNA。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去除 RNA 酶的雙蒸水10X
非程序DNA合成檢測實驗
實驗方法原理非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis:UDS)即S期外的DNA合成。在一般情況下細胞內DNA合成只見于S期,但當處于非S期細胞DNA受損傷時,隨著DNA損傷的修復也將發生DNA合成現象,即UDS。在化學致突變物、致癌物作用誘發細胞DNA損傷時,也誘導DNA
非程序DNA合成檢測實驗
實驗方法原理 非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis:UDS)即S期外的DNA合成。在一般情況下細胞內DNA合成只見于S期,但當處于非S期細胞DNA受損傷時,隨著DNA損傷的修復也將發生DNA合成現象,即UDS。在化學致突變物、致癌物作用誘發細胞DNA損傷時,也誘導DN
簡述芋螺毒素的基因合成
芋螺毒素是基因直接表達的產物,現代基因工程技術也促進了芋螺毒素的研究與開發。在研究芋螺毒素基因的結構和生物合成過程,尋找新芋螺毒素基因,研究其分子遺傳學機制,蛋白質折疊機制方面有重要的應用,且已取得了較快的進展。構建芋螺毒素cDNA文庫,從中篩選新芋螺毒素基因已成為研究新芋螺毒素及其分子特征的重
全基因能合成多長的片段?
全基因合成理論上沒有長度限制。但是由于克隆技術,載體容量等因素存在,一般全基因合成長度不超過10kb。
全基因合成的步驟是什么?
全基因合成包括:設計合成引物;PCR拼接序列;克隆到載體;測序驗證。
基因探針合成的注意事項
①合成探針的長短,一般在20~50個核苷酸之間。合成過長成本高,且易出現聚合酶合成錯誤,雜交時間長,合成太短則特異性下降。 ②堿基組成G-C應含40%~60%,一種堿基連續重復不超過4個,以免非特異性雜交產生。 ③探針自身序列內應無互補區域,以免產生“發夾”結構,影響雜交。總之,一個好的探針
基因探針合成的注意事項
①合成探針的長短,一般在20~50個核苷酸之間。合成過長成本高,且易出現聚合酶合成錯誤,雜交時間長,合成太短則特異性下降。 ②堿基組成G-C應含40%~60%,一種堿基連續重復不超過4個,以免非特異性雜交產生。 ③探針自身序列內應無互補區域,以免產生“發夾”結構,影響雜交。總之,一個好的探針
合成培養基配制實驗——合成培養液的配制
合成培養基是根據研究和了解細胞所需成分基礎上配制而成的。目的在于創制出與體內相似的生存環境。合成培養基有固定的組成成分,利于控制實驗條件標準化。內容來源:組織培養和分子細胞學技術。(北京出版社)實驗方法原理干粉型培養基是用球磨機或噴霧法將各種培養液成分混合后制成,具有性質穩定、便于貯存和運輸、使用方