脫氧核酶實驗
隨著體外分子實驗技術的發展，近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子，這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應，而且還具有 DNA 激酶活性。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理隨著體外分子實驗技術的發展，近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子，這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應，而且還具有 DNA 激酶活性。實驗材料脫氧核酶試劑、試劑盒脫氧核酶切割緩沖液終止緩沖液脂質體儀器、耗材聚丙烯酰胺凝膠電泳裝置放射自顯影用具水浴實驗步驟一、材料與設備1. 聚丙烯酰胺凝膠電泳裝置。2. 放射自顯影用具。3. 水浴。4. 脫氧核酶 ( 修飾或未修飾）由化學合成獲得。5. 脫氧核酶體外切割的底物 RNA 由體外轉錄獲得。6. 2X 脫氧核酶切割緩沖液：50 mmol/L Tris ......閱讀全文
脫氧核酶實驗
隨著體外分子實驗技術的發展，近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子，這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應，而且還具有 DNA 激酶活性。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理隨著體外分子實驗技術的發展，近年
脫氧核酶實驗
實驗方法原理 隨著體外分子實驗技術的發展，近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子，這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應，而且還具有 DNA 激酶活性。實驗材料 脫氧核酶試劑、試劑盒 脫氧核酶切割緩沖液終止緩沖液脂質體儀器、耗材
脫氧核酶實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 隨著體外分子實驗技術的發展，近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子，這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應，而且還具有 DNA 激酶活性。
?脫氧核酶的分類
根據催化功能的不同，可以將脫氧核酶分為5大類：切割RNA的脫氧核酶、切割DNA的脫氧核酶、具有激酶活力的脫氧核酶、具有連接酶功能的脫氧核酶、催化卟啉環金屬螯合反應的脫氧核酶。其中以對RNA切割活性的脫氧核酶更引人注意，不僅能催化RNA特定部位的切割反應，而且能從mRNA水平對基因進行滅活，從而調控蛋
脫氧核酶的分類介紹
根據催化功能的不同，可以將脫氧核酶分為5大類：切割RNA的脫氧核酶、切割DNA的脫氧核酶、具有激酶活力的脫氧核酶、具有連接酶功能的脫氧核酶、催化卟啉環金屬螯合反應的脫氧核酶。其中以對RNA切割活性的脫氧核酶更引人注意，不僅能催化RNA特定部位的切割反應，而且能從mRNA水平對基因進行滅活，從而調
?脫氧核酶的功能介紹
1、RNA切割作用脫氧核酶最重要的一種性質，也是目前研究最活躍的一個方面，是具有通過酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA這種獨特的性質，使其有可能應用于破壞體內細胞和病毒的RNA，具有潛在的體內治療作用。脫氧核酶發揮RNA切割作用有以下幾種形式：（1）以金屬離子為輔因子：用“催化洗脫”的方法從一個
脫氧核酶的功能介紹
1、RNA切割作用脫氧核酶最重要的一種性質，也是目前研究最活躍的一個方面，是具有通過酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA這種獨特的性質，使其有可能應用于破壞體內細胞和病毒的RNA，具有潛在的體內治療作用。脫氧核酶發揮RNA切割作用有以下幾種形式：（1）以金屬離子為輔因子：用“催化洗脫”的方法從一個
關于脫氧核酶的簡介
1994年，Gerald.F.Joyce等報道了一個人工合成的35bp的多聚脫氧核糖核苷酸能夠催化特定的核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸形成的磷酸二酯鍵，并將這一具有催化活性的DNA稱為脫氧核酶或DNA酶（DNA enzyme，DE）。 1995年，Cuenoud等在Nature報道了一個具有連接酶
脫氧核酶的研究前景
對于脫氧核酶的研究有望成為基因功能研究、核酸突變分析、治療腫瘤、對抗病毒及腫瘤等疾病的新型基因治療藥物的新型核酸工具酶。盡管自然界沒有發現脫氧核酶，但實驗已證明DNA具有酶活性。由于脫氧核酶比核酶更加穩定，且相對生產成本低廉，脫氧核酶的開發應用已成為新藥開發的熱門課題。目前對脫氧核酶的結構和功能已有
?脫氧核酶的基本信息
脫氧核酶（deoxyribozyme）是利用體外分子進化技術合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段，具有高效的催化活性和結構識別能力。自 1994年首次發現脫氧核酶以來，迄今已發現了幾十種脫氧核酶。根據其功能可分為7大類：具有RNA切割活性，具有DNA連接酶活性，具有卟啉金屬化酶和過氧化酶活性，具有
關于脫氧核酶的基本介紹
脫氧核酶（deoxyribozyme）是利用體外分子進化技術合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段，具有高效的催化活性和結構識別能力。自 1994年首次發現脫氧核酶以來，迄今已發現了幾十種脫氧核酶。根據其功能可分為7大類：具有RNA切割活性，具有DNA連接酶活性，具有卟啉金屬化酶和過氧化酶活性，
脫氧核酶的作用和主要類型
脫氧核酶（deoxyribozyme）是利用體外分子進化技術合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段，具有高效的催化活性和結構識別能力。自 1994年首次發現脫氧核酶以來，迄今已發現了幾十種脫氧核酶。根據其功能可分為7大類：具有RNA切割活性，具有DNA連接酶活性，具有卟啉金屬化酶和過氧化酶活性，具有
核酶實驗——錘頭型核酶實驗
核酶（ribozyme ) 是一類具有酶特性的 RNA 分子，通過催化靶位點 RNA 鏈中磷酸二酯鍵的斷裂，特異性地剪切底物 RNA 分子，從而阻斷基因的表達。核酶廣泛存在于從低等到高等的多種生物中，參細胞內 RNA 及其前體的加工和成熟過程。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法
核酶實驗——發夾型核酶實驗
實驗方法原理作為有催化活性的 RNA，發夾型核酶在生物體內的作用是位點特異的核酸酶以及 RNA 連接酶。發夾型核酶的催化基序最先是在煙草環斑病毒負鏈的衛星 RNA 中發現的，它表現一種可逆的自切割反應，最終使滾環復制的產物形成成熟的病毒核酸。發夾型核酶與錘頭型核酶都能催化產物的連接，但是發夾型核酶的
根據催化功能將脫氧核酶分類
根據催化功能的不同，可以將脫氧核酶分為5大類：切割RNA的脫氧核酶、切割DNA的脫氧核酶、具有激酶活力的脫氧核酶、具有連接酶功能的脫氧核酶、催化卟啉環金屬螯合反應的脫氧核酶。其中以對RNA切割活性的脫氧核酶更引人注意，不僅能催化RNA特定部位的切割反應，而且能從mRNA水平對基因進行滅活，從而調控蛋
脫氧核酶的DNA切割作用介紹
脫氧核酶不僅具有RNA切割作用，而且也能切割DNA 分子。已篩選出了兩類具有DNA自我切割作用的脫氧核酶，Ⅰ類自我切割脫氧核酶需要Cu2+和維生素C參與，而Ⅱ類脫氧核酶只需要Cu2+。Ⅱ類脫氧核酶以順式方式切割DNA靶分子，與不加酶的反應相比，它提高催化效率106倍。多數脫氧核酶只能與底物形成二
核酶實驗
實驗方法原理 錘頭型核酶是最簡單的一類核酶，而且其靶序列也比較簡單。錘頭型核酶發現于幾種植物病毒的衛星 RNA、一種類病毒 RNA 和蠑螈核衛星 DNA 的轉錄產物中。它催化一些類病毒 RNA 和一些與類病毒 RNA 相似的只復制產物的不可逆自我剪切?實驗材料 ATPT4多核苷酸激酶RNasinDT
核酶實驗
錘頭型核酶實驗 發夾型核酶實驗 其他類型的核酶 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 錘頭型核酶是最簡單的一類核酶，而且其靶序列也比較簡單。錘頭型核酶發現于幾種植
核酶實驗——其他類型的核酶
實驗方法原理除錘頭型核酶與發夾型核酶以外，還有肝炎 δ 核酶和 Neurospara VS 核酶等小分子核酶。此外，自然界中還存在著大分子核酶，包括 Ⅰ 型內含子、Ⅱ 型內含子和 RNaseP 的 RNA 亞基。實驗材料RNase T1RNase U2試劑、試劑盒上樣緩沖液終止緩沖液儀器、耗材聚丙烯
脫氧核酶切割－RNA－專一位點
實驗材料 脫氧核酶無RNA酶的DMA酶切割底物RNA試劑、試劑盒 5X反應緩沖液5X乙酸鎂或氯化鎂無水乙醇水飽和酚實驗步驟 一、材料與設備1) 脫氧核酶 (其設計與制格參見脫氧核酶相關章節）2)5X 反應緩沖液：750Tnmol/LNaCl，200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5
脫氧核酶DNA激酶活性功能的介紹
脫氧核酶還具有DNA激酶活性，類似T4多核苷酸激酶的作用，能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基團轉移到DNA的5′-OH上。從一個隨機單鏈DNA庫中篩選出50個不同序列類型的具有自我磷酸化作用的脫氧核酶，都能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基團轉移到DNA的5′-OH上，實現DNA分子5′-OH端自
關于脫氧核酶的研究前景和展望介紹
對于脫氧核酶的研究有望成為基因功能研究、核酸突變分析、治療腫瘤、對抗病毒及腫瘤等疾病的新型基因治療藥物的新型核酸工具酶。 盡管自然界沒有發現脫氧核酶，但實驗已證明DNA具有酶活性。由于脫氧核酶比核酶更加穩定，且相對生產成本低廉，脫氧核酶的開發應用已成為新藥開發的熱門課題。目前對脫氧核酶的結構和
脫氧核酶切割－RNA－專一位點
? ? ? ? ? ? 實驗材料 脫氧核酶 無RNA酶的DMA酶 切割底物RNA 試劑、試劑盒 5X反應緩沖液
關于脫氧核酶的RNA切割作用介紹
脫氧核酶最重要的一種性質，也是目前研究最活躍的一個方面，是具有通過酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA這種獨特的性質，使其有可能應用于破壞體內細胞和病毒的RNA，具有潛在的體內治療作用。脫氧核酶發揮RNA切割作用有以下幾種形式： （1）以金屬離子為輔因子：用“催化洗脫”的方法從一個隨機序列庫
3.8－脫氧核酶切割－RNA－專一位點
脫氧核酶是一類由三十幾個脫氧核苷酸構成的寡聚脫氧核糖核苷酸，制備容易，使用方便，是體外在特定位點切割 RNA 的有效方法。常用于體外切割 RNA 底物的脫氧核酶是「10~23」型脫氧核酶。實驗材料脫氧核酶無RNA酶的DMA酶切割底物RNA試劑、試劑盒5X反應緩沖液5X乙酸鎂或氯化鎂無水乙醇水飽和酚實
核酶種類哪些核酶屬于天然核酶
目前發現的天然核酶其化學本質均為RNA,其催化作用主要有：①核苷酸轉移作用,②水解反應,即磷酸二酯酶作用,③磷酸轉移反應,類似磷酸轉移酶作用,④脫磷酸作用,即酸性磷酸酶作用,⑤RNA內切反應,即RNA限制性內切酶作用.而人工合成的核酶其化學本質為DNA,故又稱為脫氧核酶,其催化作用為水解RNA分子的
脫氧核酶的卟啉金屬螯合作用和過氧化物酶活性
已篩選出一個只有24 nt富含鳥嘌呤G的脫氧核酶“PS5M”，PS5M形成一個G四聚體結構的催化活性中心，結合一個扭曲的卟啉分子，使卟啉分子類似于金屬螯合反應的中間過渡態，從而促進了金屬的螯合作用，PS5M還能與血紅素結合，形成的復合物具有過氧化物酶活性，能催化氯高鐵血紅素-氫過氧化物的分解。
雙脫氧法DNA測序實驗
測序酶進行標記測序反應 α-標記核苷酸進行熱循環測序反應 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA
雙脫氧法DNA測序實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 寡核苷酸引物測序酶終止混合液測序酶緩沖液焦磷酸酶混合液儀器、耗材 離心機離心管微量滴定板實驗步驟 1. ?對于每個單鏈模板：將下列試劑混合于0.5 ml 微量離心管中（1）0.5 pmol 單鏈DNA模板（2）0.5 pmol 引物（3）1 μl 10×測序酶緩沖液（4
核酶的作用特點及天然核酶種類介紹
核酶是具有催化活性的RNA?，主要參加RNA的加工與成熟。天然核酶可分為四類：（1）異體催化剪切型，如RNaseP；（2）自體催化的剪切型，如植物類病毒、擬病毒和衛星RNA；（3）第一組內含子自我剪接型，如四膜蟲大核26SrRNA；（4）第二組內含子自我剪接型。利用反義技術研制的藥物稱反義藥物。反義