PCR技術概論
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研 究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑。 PCR技術簡史 PCR的最早設想 核酸研究已有100多年的歷史,本世紀60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術,Korana于1971年最早提出核酸體外擴增的設想:“經過DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復該過程便可克隆tRNA基因”。PCR的實現 1985年美國PE-Cetus公司......閱讀全文
PCR技術概論
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一
PCR技術(一):PCR技術概論
?PCR技術概論PCR技術簡史PCR技術的基本原理PCR反應體系與反應條件PCR反應特點PCR擴增產物的分析 聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自動化等突出
入門:PCR技術概論
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一
貧血概論
凡單位容積血液內血紅蛋白低于正常參考值下限即為貧血。成年男性
色譜泵使用操作的技術要點分析闡述概論
為了延長色譜泵的使用壽命和維持其輸液的穩定性,必須按照下列注意事項進行操作:防止任何固體微粒進入泵體,因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相zui好在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2m或0.4
抗菌藥物概論
第三十四章???抗菌藥物概論第一節??抗菌藥物與化學療法一、????????????常用術語1、抗菌藥:對病原菌有抑制或殺滅作用,用于防治細菌感染性疾病的藥物。僅抑制病原菌生長繁殖而無殺滅作用的藥物為抑菌藥。不僅抑制病原菌的生長繁殖,而且具有殺滅作用的藥物為殺菌藥。2、抗菌譜:抗菌藥的抗菌范圍。又分
光學薄膜概論
光學薄膜概論光學工業除了鏡片的研磨,系統之設計以外,有一項科技是發展高級光學儀器所不可缺的,就是光學薄膜的蒸鍍技術。何謂光學薄膜,就是在鏡片上鑲上一層或多層非常薄的特殊材料,使鏡片能達到某種特定的光學效果。我們所常見的太陽眼鏡,抗反射鏡片就是一個光學薄膜在日常生活上zui簡單的應用 。其他如各種反射
離心機概論
離心機是利用離心力,分離液體與固體顆粒或液體與液體的混合物中各組分的機械。? 離心機主要用于將懸浮液中的固體顆粒與液體分開;或將乳濁液中兩種密度不同,又互不相溶的液體分開(例如從牛奶中分離出奶油);它也可用于排除濕固體中的液體,例如用洗衣機甩干濕衣服;特殊的超速管式分離機還可分離不同密度的氣體混合
儀器分析概論(二)
二.電化學分析法電化學分析法是根據被測物質溶液的各種電化學性質(電極電位、電流、電量、電導或電阻等)來確定其組成及其含量的分析方法。1.電位分析法是用一個電極電位與被測物質活(濃)度有關的指示電極和另一個電位保持恒定的參比電極與試液組成化學電池,根據測量電池電動勢或指示電極電位進行分析的方法稱為電位
儀器分析概論(一)
儀器分析法根據被測量的物理和物理化學性質可分為以下幾類:光學分析法電化學分析法色譜分析法質譜分析法熱量分析法放射化學(又稱活化)分析法分析化學是研究物質的化學組成,測定有關成分的含量以及鑒定物質化學結構的科學。隨著科學技術的發展,分析化學分支為化學分析和儀器分析。其中化學分析是以化學反應為基礎的分析
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill?Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase?chain?reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。這也
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
滴定分析法概論
滴定分析法和滴定方式 1.化學計量點、滴定終點、滴定誤差(TE)的概念要知道 滴定誤差(TE):取決于滴定反應的完全程度和指示劑的選擇是否恰當。 滴定曲線的特點:(1)曲線的起點取決于被滴定物質的性質或濃度,一般被滴定物質的濃度越高,滴定曲線起點越低(2)滴定開始時,曲線平緩;至化學計量點
PCR技術(六):PCR技術應用進展
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途.?原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應,它結
PCR技術(七):mRNA差異PCR技術
生物界的豐富多彩很大程度上取決于嚴格調控下的基因的選擇性表達。高等生物的細胞內約含有105個不同的基因,而主 基因在某個特定的細胞中,只有占15%的一小部分表達。而且在不同的細胞中,選擇性表達的基礎也是不同的。正是這些基因的選擇不同決定了整個生命的過程:如細胞的生長分化,激素和細胞困子對細胞的作用、
激光清洗技術概論及其在輪胎業上的應用
一、引言在工業生產、文物保護以及牙科疾病的治療中,常常需要用到清洗技術。例如:工業制品在電鍍、磷化、噴涂、焊接、包裝以及集成線路的裝配時,為保證下道工序中工件的質量,必須除去產品表面上的油脂、灰塵、銹垢或殘留的溶劑、粘結劑等污物。由于環境污染和保護不善等原因,很多的文物和藝術品正逐漸被銹蝕和污損,為
PCR技術
1 導論?多聚酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction, PCR)是美國Perkin-Elmer/Cetus公司人類遺傳研究室Mullis K. B.等人于1985年發明的一種快速體外DNA片段擴增技術,是八十年代分子生物學資源領域的一項革命性突破,被譽為分子生物學資源發展史上
PCR技術
?PCR常見問題總匯?PCR產物的電泳檢測時間 一般為48h以內,有些最好于當日電泳檢測,大于48h后帶型不規則甚致消失。?假陰性,不出現擴增條帶 PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及,?④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。 模板:①模
PCR技術
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依賴于DNA聚合酶的酶促反應。PCR技術的特異性取決于引物和模板結合的特異性。反應分為變性、退火、延伸三步,經過一定的循環,介于兩個引物之間的特異DNA片段得到大量擴增。?
PCR技術
實驗方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依賴于DNA聚合酶的酶促反應。PCR技術的特異性取決于引物和模板結合的特異性。反應分為變性、退火、延伸三步,經過一定的循環,介于兩個引物之間的特異DNA片段得到大量擴增。實驗材料 轉基因水稻葉片DNA引物試劑、試劑盒 礦物油MgCl2Pri
PCR技術
? ?PCR技術www.runwelltac.comPCR技術的基本原理與操作流程聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,為zui常用的分子生物學技術之一。典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿
PCR技術(十四):反向PCR
描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法,使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴 增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列,但其方向性,使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引
肺念珠菌病概論
肺念珠菌病是念珠菌屬引起的急性、亞急性或慢性支氣管、肺部感染,多為院內感染。臨床分為支氣管炎型、肺炎型和過敏型。【診斷要點】見三級診斷標準。1.癥狀:咳嗽、咳白色粘液痰或膿痰、咯血、氣急等。2.體征:檢查口腔、咽部可見覆蓋點狀白膜,肺部可聞干、濕性啰音。3.輔助檢查:胸片可見小片狀或斑點狀陰影,部分
溶血性貧血概論
1)定義、分類?溶血性貧血是限指那些紅細胞呈病理性的破壞增加,而骨髓對貧血的刺激反應良好的疾病,即是以紅細胞的破壞和活躍的紅細胞生成同時并存為特征的一組疾病。正常骨髓其紅系統增生的能力可以達到正常時的6到8倍。所以,紅細胞的壽命從正常的120天降低到15-20天時仍無貧血發生,此稱為代償性溶血性疾病
分配色譜儀概論
分配色譜儀是利用被分離組分在固定相和流動相中的溶解度差別進行分離的。一、固定相:分配色譜儀的固定相由載體和固定液組成。1、載體:為表面積大的惰性物質,起負載一定量固定液的作用。常用載體有吸水硅膠、纖維素和多孔硅藻土等。2、固定液:應是樣品的良好溶劑,不溶或難溶于流動相。3、化學鍵合相固定相:分配色譜
分配色譜儀概論
分配色譜儀是利用被分離組分在固定相和流動相中的溶解度差別進行分離的。一、固定相:分配色譜儀的固定相由載體和固定液組成。1、載體:為表面積大的惰性物質,起負載一定量固定液的作用。常用載體有吸水硅膠、纖維素和多孔硅藻土等。2、固定液:應是樣品的良好溶劑,不溶或難溶于流動相。3、化學鍵合相固定相:分配色譜
免疫PCR技術(ImmunoPCR)
免疫PCR技術(Immuno-PCR)?免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年將免疫學反應和PCR技術相結合而創建的一種新的檢測技術,具有抗原、抗體反應的特異性和PCR技術的高效性。它運用PCR的高度敏感性來放大抗原抗體反應的特異性,使實驗中只需數百個抗原分子即可檢測,甚
PCR技術(十六):PCR產物測序
PCR技術代替了為測序而反復進行的分子克隆和模板制備步驟。PCR技術與自動測 序技術相結合后,它將成為一種最快、最有效的測定核苷權序列的方法。本章主要綜 述各種測模板的制備以及如何完成PCR產物的直接測序。與傳統的將PCR片段克隆入質 粒或病毒基因組相比,直接序列分析有兩個主要的優點:1)由于它是一