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  • 發布時間:2016-09-12 14:45 原文鏈接: FEBS發布CRISPR技術特刊

      《FEBS Journal》雜志近日發布了一份介紹如何使用CRISPR/Cas9的特刊,它包含9篇綜述文章,由知名研究人員撰寫,包括哈佛大學的George Church和Norbert Perrimon,西班牙阿利坎特大學的Francisco Mojica,以及Sloan Kettering紀念癌癥中心的Ralph Garippa。

      這份特刊覆蓋了CRISPR的發現、CRISPR篩選、表觀遺傳編輯、模式生物和疾病模型中的CRISPR、向導RNA(gRNA)設計、脫靶效應,以及在治療應用中與RNAi的比較。

      “我們希望這些綜述就像它們介紹的技術一樣將是有用的,立足于科學事實,并為探索提供指導,”Broad研究院遺傳擾動平臺的主管John Doench在文中寫道。

      如今,科學界對CRISPR技術的熱情日益高漲。論文的數量在呈指數增長。然而,許多研究人員仍在苦苦掙 扎,不能很好地使用它。“即使是十分成熟的工具,如限制性內切酶、抗體和Sanger測序,日常應用中仍時有失敗,需要進行故障排查,”Doench寫 道。“每篇綜述頭腦冷靜地評估了如何最好地應用這項技術、它的優勢以及它的局限性。”

      CRISPR最早是在細菌中發現的,作為細菌的適應性免疫系統。20多年前,Francisco Mojica發現了細菌中的CRISPR結構。這一次,他與米格爾?埃爾南德斯大學的Francisco Rodriguez-Valera一起介紹了這項技術的一些背景。

      CRISPR/Cas9系統也作為一種新穎的篩選方法,來鑒定生物過程中的重要蛋白。Sloan Kettering紀念癌癥中心的Ralph Garippa和John Poirier以及約翰?霍普金斯大學的Linde Miles為這一應用提出了一些建議。

      George Church以及他實驗室的一些成員討論了CRISPR革命的下一站:RNA指導的表觀遺傳調控。最近,Cas9蛋白與效應物的融合,如轉錄激活子、抑制 子和組蛋白修飾物,實現了可編程的轉錄和表觀遺傳調控。這篇綜述討論了基因調控的CRISPR工具,以及使用這些工具的最佳做法。

      還有幾篇綜述主要介紹了CRISPR在疾病建模和模式生物中的應用。Sloan Kettering紀念癌癥中心的Geulah Livshits及其同事介紹了利用CRISPR來研究體內的基因功能,重點在小鼠的疾病建模;西北大學的Erik Andersen和Mostafa Zamanian介紹了CRISPR在線蟲中的應用,以研究熱帶疾病;賓夕法尼亞大學的Kiran Musunuru和Jennie Lin則介紹了利用CRISPR建立疾病模型時的注意事項。

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