從克隆猴的成功談中國創新
克隆猴誕生的消息讓媒體蜂擁而上，可愛的“中中”“華華”萌態不斷刷屏，讓2018年新春多了一道創新大禮。 這一成果所體現的是具有中國特色的創新活動正在不斷深入，盡管仍然缺乏具有領軍性質的原始創新，通俗地講就是具有潛力問鼎諾獎的成果，但結合不斷取得的成績，我們可能也要轉變一下——對科學本身而言，問鼎諾獎一定是最重要的目標嗎？ 同樣的問題也可以用來探討工業界的創新路徑。今日中國盡管已經成為了高技術產品的最大生產國，電信設備等領域在國際上已一言九鼎，但很多創新政策學者仍然認為我們原始創新能力不足。產業界創新與“中中”“華華”的成功誕生看似風馬牛不相及，但背后的邏輯可能一致，中國社會對兩者的影響因素也高度相似。 豐收克隆猴 克隆猴這一重大成功得益于中國在科研方面的優勢，那就是跟蹤、模仿和利用后發優勢以及技術優勢實現超越。克隆技術發展了20年，靈長類動物的體細胞克隆一直進展不順利。中國科學家通過持續努力和技術攻關突破了細胞遺傳物......閱讀全文
單克隆抗體技術：克隆化(有限稀釋法、軟瓊脂克隆化、...
經過抗體測定的陽性孔，可以擴大培養，進行克隆，以得到單個細胞的后代分泌單克隆抗體。克隆的時間一般說來越早越好。因為在這個時期各種雜交瘤細胞同時旺盛生長，互相爭奪營養和空間，而產生指定抗體的細胞有被淹沒和淘汰的可能。但克隆時間也不宜太早，太早細胞性狀不穩定，數量少也易丟失。?克隆化的陽性雜交瘤細胞，經
關于單克隆抗體的克隆方法介紹
1．配2.5%的瓊脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。 2．將117ml完全DMEM液和3ml10倍濃度的DMEM液混合，置45℃水浴預熱。 3．將瓊脂糖與DMEM液混合，即為含0.5%瓊脂糖的完全DMEM液，并加75×108脾細胞。 4．每塊平皿加10ml，于室溫中凝固。 5．
單克隆抗體(monoclonal－antibody)克隆化技術
經過抗體測定的陽性孔，可以擴大培養，進行克隆，以得到單個細胞的后代分泌單克隆抗體。克隆的時間一般說來越早越好。因為在這個時期各種雜交瘤細胞同時旺盛生長，互相爭奪營養和空間，而產生指定抗體的細胞有被淹沒和淘汰的可能。但克隆時間也不宜太早，太早細胞性狀不穩定，數量少也易丟失。?克隆化的陽性雜交瘤細胞，經
克隆經驗—幫助新手快速做出克隆3
酶切直接在回收PCR產物的試管中配置酶切體系：PCR產物酶切－制作插入片斷公用Buffer 6μL酶 I 3μL酶 II 3μLPCR產物 ——雙蒸水 48μL合計 60μL要將PCR產物接入的質粒載體A，取A質粒3μL進行酶切。A質粒酶切－制作載體片斷公用Buffer 3μL酶 I 1μL酶 II
克隆心得：幫助新手快速做出克隆1
本方法的核心部分是醫科院基礎所的生化脂蛋白組的吳剛老師所創，我在其基礎上進行了一些改動，主要是DNA回收上采取了更簡單的方法。（本方法最適用于雙酶切制作片斷并進行克隆的情況。對于分步酶切制作片斷，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）一、片斷平移的克隆（也適用于多片斷連接）簡介：將用作載
克隆心得：幫助新手快速做出克隆2
酶切直接在回收PCR產物的試管中配置酶切體系：PCR產物酶切－制作插入片斷公用Buffer 6μl酶 I 3μl酶 II 3μlPCR產物 ——雙蒸水 48μl合計 60μl要將PCR產物接入的質粒載體A，取A質粒3μl進行酶切。A質粒酶切－制作載體片斷公用Buffer 3μl酶 I 1μl酶 II
克隆經驗:幫助新手快速做出克隆1
本方法的核心部分是醫科院基礎所的生化脂蛋白組的吳剛老師所創，我在其基礎上進行了一些改動，主要是DNA回收上采取了更簡單的方法。（本方法最適用于雙酶切制作片斷并進行克隆 的情況。對于分步酶切制作片斷，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）一、片斷平移的克隆 （也適用于多片斷連接）簡介：將用
克隆經驗—幫助新手快速做出克隆4
9. 在一新1.5mL 離心管中加入 900μL 預冷 無水乙醇、20μL 3M的醋酸鈉。將步驟8的上清小心加入本步驟離心管中。顛倒數次混勻。12000rpm 4℃ 離心15分鐘。（提示 吸取步驟8中的上清時，千萬不要將有機相吸入，寧可放棄一些上清，否則影響后面的連接反應。 另外，本方法
克隆經驗—幫助新手快速做出克隆5
1. 連接產物10μL、5×KCM溶液10μL、雙蒸水30μL，（共50μL）混勻，置冰上。2. 從-70℃冰箱中取 1支感受態細胞，置冰上。融化后立即取50μL，加入步驟1中的混合液中，輕輕吹打數次混勻（不可用力過大，不可渦旋）， 立即置冰上。3. 冰上放置20 分鐘。4. 室溫放置10分鐘。5.
克隆經驗:幫助新手快速做出克隆2
（提示 關于酶量的問題。通常的內切酶效價在10U/μL左右，3μL內切酶相當于30U，足夠切10μL的質粒。因為通常小提質粒的濃度在200－600ng /μL，一般濃度達不到1μg/μL。根據1U酶切1μg質粒的原則，這一酶量是足夠的。）1%瓊脂糖回收膠回收（碎膠、酚氯仿抽提法）1. 酶切產物加入1
PCR擴增產物的克隆——TA克隆法
實驗方法原理TA克隆 系統由Invitrogen公司（San Diego，CA）發展而來的商業性試劑盒，它用于PCR 產物的克隆 和測序。其原理是利用Taq酶能夠在PCR 產物的3'末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3'T突出端的載體，在連接酶作用下，可以快速地、一步到位
華人科學家開發埃博拉出血熱新療法獲進展
埃博拉病毒致死率非常高,且缺乏有效療法。加拿大華人生物學家邱香果等人在美國《科學轉化醫學》雜志上報告說,他們開發出一種三聯單克隆抗體與干擾素聯合療法,在動物實驗中可挽回受病毒感染的實驗猴生命,為治愈由埃博拉病毒導致的出血熱帶來新希望。 埃博拉病毒于上世紀70年代在中非被首次發現,它能在很短
我國成功實施豬猴間肝移植
記者從第四軍醫大學西京醫院獲悉：5月7日，在該院肝膽胰脾外科主任竇科峰教授的主持下，成功實施了亞洲首例轉基因豬—藏酋猴異種異位脾窩輔助性部分肝移植手術，標志我國在異種器官移植、解決人體移植器官短缺方面取得新的進步。 據了解，我國每年有150萬人等待器官移植，而成功移植不足1萬例，器官來源嚴
臺灣首見本地猴痘確診病例
臺灣首見本地猴痘確診病例。臺當局衛生福利部門“疾病管制署”1日公布，新增兩例猴痘本地確診個案，近期皆未出境，也與之前境外移入個案無關。 綜合中央社、聯合新聞網等臺灣媒體報道，兩例個案分別為臺灣北部一名40多歲男子、南部一名20多歲男性，居住地分別為新竹、高雄。兩人2月下旬陸續出現發燒、丘狀癢疹
猴痘病毒已發生人際傳播
據聯合國官網22日消息，世界衛生組織表示，自5月13日以來，全球12個未流行猴痘病毒的國家已報告了92例確診病例和28例疑似病例。現有信息表明，與有癥狀的病例發生密切身體接觸的人群中正在發生人際傳播。 數據顯示，這些確診和疑似病例主要來自英國、西班牙和葡萄牙，其余分布在澳大利亞、比利時、加拿大、
猴菇口服液的用法用量
口服,一次10ml,一日3次。
猴痘mRNA疫苗或效果顯著
最常用的猴痘疫苗能提供部分免疫，但并不總能預防重癥或疾病傳播。一項新研究發現，與目前市面流通的改良型安卡拉牛痘病毒（MVA）疫苗相比，一種新候選疫苗mRNA-1769能更有效地限制感染猴痘病毒致死株的靈長類動物的癥狀和疾病持續時間。相關研究9月4日發表于《細胞》。“這項研究是第一次在非人類靈長類動物
多國報告首例猴痘確診病例
以色列衛生部21日發表聲明說，該國確診首例猴痘病例。荷蘭和澳大利亞20日分別確診了本國首例猴痘病例。多國衛生部門呼吁民眾在出現癥狀后及時就醫。 以色列衛生部的聲明說，這名患者是一名30多歲的男子，日前從西歐返回以色列。該男子在與國外的猴痘患者接觸后，出現癥狀就醫，并被確診為猴痘。以衛生部呼吁從國
猴耳環消炎顆粒的用法用量介紹
開水沖服。一次2袋，一日3次。1歲以下半袋，1~3歲2/3袋，4~7歲1袋，8~14歲4/3袋，15歲以上2袋。不良反應
克隆的種類
1.由同一個祖先細胞分裂繁殖而形成的純細胞系（每個基因彼此相同）。2.先將含有遺傳物質的供體細胞的核移植到去除了細胞核的受體卵細胞中，利用微電流刺激等使兩者融合為一體。（與提供細胞者基因相同）
核糖克隆實驗
試劑、試劑盒 ATEN 緩沖液DNA 緩沖液（TEN)KLA 緩沖液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K儲存緩沖液 RNA 酶 A設計好的載體已經進行 5'端生物素-TEG 修飾并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修飾過的引物卡那霉素（Sigma)四
核糖克隆實驗
試劑、試劑盒ATEN 緩沖液DNA 緩沖液（TEN)KLA 緩沖液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K儲存緩沖液RNA 酶 A設計好的載體已經進行 5'端生物素-TEG 修飾并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修飾過的引物卡那霉素（Sigma)四環素Ticarci
制備克隆實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 ATP -巰基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 連接緩沖液 T4DNA 連接酶 平末
核糖克隆實驗
—、材料1. 緩沖液、溶液和試劑.10XATEN 緩沖液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化鈉0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜堿（SigmaB-2629)藍色葡聚糖（bluedextran)(SigmaD
PCR產物克隆
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切與連接法，雜交法和近期開發出來的特異性重組法等。但因為TA克隆法操作最簡單，快速和高效的原因，成為Taq聚合酶PCR產物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen發明，并擁有全球TA Cloning商標的ZL權。TA克隆方法（Original TA Cl
制備克隆實驗
試劑、試劑盒ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱水浴箱實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇（可選擇）IPTG(100 mmol/L
核糖克隆實驗
這個方案只是用 RNA 酶處理 PCR 產物的一種方法。有很多可選擇和有效的途徑來純化 PCR 產物以除去引物，接著用酶處理 PCR 產物，然后再除去酶。值得注意的是用 PCR儀設置溫浴程序是很方便的。可以在加熱步驟完成后選擇加上“冷卻”步驟，即在冷模塊中放置 5 min 甚至過夜。本實驗來源于 P
細胞克隆染色
做克隆形成率的染色非常非常簡單,因為克隆產生的細胞集落非常清晰,大的甚至肉眼可辯.對染色方法只有一個基本要求,染細胞不染培養容器就可以了.非常多的染料可以用作此用途.像是一樓所說的結晶紫也可以.
定位候選克隆
當前，人類基因組研究的重心正在由“結構”向“功能”轉移，一個以基因組功能研究為主要內容的所謂“后基因組時代”(post-genomics)，也即功能基因組(functional genomics)時代，即將到來。如何獲取基因的功能信息，即與人類重大疾病和重要生理功能相關的基因信息，就擺在了我們面前。
miRNA－－克隆實驗
實驗方法原理 在細胞中表達的 RNA 除了我們所熟悉的 mRNA 以外，還有大量不編碼蛋白質的非編碼 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非編碼 RNA 在細胞中起著非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 維持著基因的表達，還有一部分則起著調控基因表達的作用。實驗材料 寡核