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  • 電泳技術臨床應用

    隨著新的電泳技術的出現,各種自動化電泳分析儀問世并相繼被引入臨床實驗室,電泳技術在臨床疾病的診斷中正發揮越來越多的作用,特別是為各種體液蛋白質、同工酶等的檢測提供了新的手段。 1. 血清蛋白電泳:新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后,常見白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。血清蛋白質電冰圖譜是了解患者血清蛋白質全貌的有價值的方法,可用為初篩試驗。急性炎癥或急性時相反應時常以α1、α2 區帶加深為特征;妊娠型α1 區帶增高,伴有β區帶增高;腎病綜合征、慢性腎小球腎炎時呈現白蛋白下降,α1、β球蛋白升高;缺鐵性貧血時可由于轉鐵蛋白的升高而呈現β區帶增高,而慢性肝病或肝硬化呈現白蛋白顯著降低,γ球蛋白升高2~3倍,示免疫球蛋白( Ig)多克隆高,甚至可見β~γ橋,還可在γ區呈現細而密的寡克隆區帶;單克隆Ig異常癥(M蛋白血癥)則在電冰區帶α~γ區呈現致密而深染,高度集中的蛋白克隆增生區帶(M蛋白區帶) 。2. 尿蛋......閱讀全文

    電泳技術介紹及影響電泳的因素

      一、基本知識和種類   電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極

    電泳儀電泳漕的正確操作規范

    電泳儀電泳漕的正確操作規范1.首先把凝膠密封條框放在平板上,然后必須使平板玻璃與凹型玻璃板重疊2.再把兩塊玻璃豎立起來,使底端接觸到桌面,用手將兩塊玻璃板夾住放入電泳槽內,然后插入斜楔板(直面對玻璃,斜面對槽)到適中程度,便可灌膠。3.凝膠凝結后,再小心取下。4.將手夾住2塊玻璃板,上提斜楔板,使其

    電泳分析儀紙電泳方法簡介

       紙電泳  紙電泳(Paper Electrophoresis,PE)指用濾紙作為支持介質的電泳方法,是最早使用的區帶電泳。在對某些蛋白質(如糖蛋白、脂蛋白等)的分離尤其對氨基酸混合物的分離非常有效。  將濾紙條水平架設在兩個裝有緩沖溶液的容器之間,樣品點于濾紙中央。當濾紙條被緩沖液潤濕后,再蓋

    電泳儀/電泳槽的操作使用

    1. 首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯接,注意極性不要接反。2. 電泳儀電源開關調至關的位置,電壓旋鈕轉到zui小,根據工作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流范圍。3. 接通電源,緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止,設定電泳終止時間,此時電泳即開始進行。4. 工作完畢后,應將各旋

    電泳分離技術--電泳時間過長的原因

    ?可能由于凝膠緩沖系統和電級緩沖系統地PH選擇錯誤,即緩沖系統地PH和被分離物質的等電點差別太小,或緩沖系統的離子強度太高。

    電泳分析儀等速電泳簡介

      等速電泳  等速電泳(Isotachophoresis,ITP)采用兩種不同濃度的電解質組成,一種為前導電解質,充滿整個毛細管柱;另一種為尾隨電解質,置于一端的電泳槽中。前導電解質的遷移率高于任何樣品組分,后者則低于任何樣品組分,被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間,在強電場的作用下,各被分離組

    電泳技術介紹及影響電泳的因素

    一、基本知識和種類電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。電泳現

    對角線電泳的對角電泳原理

    對角電泳原理:蛋白質樣品先在非還原條件下進行電泳;切下凝膠條,暴露于還原劑,并正交放置在SDS-PAGE凝膠上。缺乏二硫化物的蛋白質遷移形成對角線,因為它們在還原和非還原條件下進行相同的電泳。具有鏈間二硫化物的蛋白質分解為單獨的多肽(如P1和P2)遷移在對角線下方,而具有鏈內二硫化物的蛋白質(如P4

    等電聚焦電泳與普通電泳區別

    兩者的原理上的區別:等電聚焦是根據被分離的蛋白質組分間的等電點的差異被分離,具有不同等電點的蛋白質會停留在相應的pH區帶,而普通的SDS-PAGE凝膠電泳是根據蛋白質組分間的分子量大小差異進行分離的,分子量不同的蛋白質會停留在相應孔徑的凝膠層。

    電泳技術介紹及影響電泳的因素

      一、基本知識和種類   電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極

    影響電泳分析儀電泳的因素

      1. 電場強度  電場強度越大,電泳速度越快。但增大電場強度會引起通過介質的電流強度增大,從而造成電泳過程中產熱過多,引起介質溫度升高,影響電泳效果。降低電流可以減少產生熱量,但會延長電泳時間,減慢待分離生物大分子的擴散而影響分離效果。  2. 溶液性質  主要體現為樣本溶液的pH、離子強度和黏

    單向定量免疫電泳(火箭免疫電泳)

    實驗原理單向定量免疫電泳又稱火箭電泳(rocket immunoelectrophoresis)。在瓊脂內摻入適量的抗體,在電場作用下,定量的抗原泳動遇到瓊脂內的抗體,形成抗原—抗體復合物沉淀下來。走在后面的抗原繼續在電場作用下向正極泳動,遇到瓊脂內沉淀的抗原—抗體復合物,抗原量的增加造成抗原過

    自由電泳和區帶電泳的相關介紹

      根據電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區帶電泳。  自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后全部移動,不出現界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質集中在某一層,形成各自的界面而進行

    制備電泳實驗

    洗脫 連續電泳 等電聚焦制備電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品

    電泳技術

    電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具 有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷, 在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在 蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。  電泳現象早在1

    sdspage電泳原理

    聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡稱Acr)和交聯劑N,N’一亞甲基雙丙烯酰胺(簡稱Bis)在催化劑過硫酸銨(AP),N,N,N’,N’?四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交聯形成的具有網狀立體結構的凝膠,并以此為支持物進行電泳。由于SDS PAGE可設法將電泳時蛋白質電荷差異這一因素除去或減小到可

    自由流動電泳

    中文名稱自由流動電泳英文名稱free flow electrophoresis定  義不用固相支持物而是在溶液中進行的電泳。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    免疫電泳

    一、操作步驟1.取一塊干凈的玻璃板,用少量75%乙醇沖洗,晾干后置于水平臺,將1%瓊脂糖融化,56℃水浴中保溫。2.將瓊脂糖鋪于玻璃板上,厚度約為1㎜。凝固后,打孔。3.在孔內加入抗原,其中一孔內加電泳指示劑。4.將凝膠板放在電泳槽中進行電泳,確定電泳時間。5.電泳后在凝膠板上沿電泳方向平行挖2㎜寬

    電泳帶型分析

    DNA電泳需要進行帶型分析,在實驗過程中常會發現所得的帶型出現在這樣那樣的問題。在此,我們對DNA帶型做了相應的分析。帶型原因分析解決辦法弱帶或無帶上樣的DNA量不夠增加DNA的上樣量,聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高DNA降解避免DNA的核酸酶污染電泳時間過長,DNA跑出減短電泳時間,降低

    免疫電泳

    實驗概要蛋白質是一種兩性電解質,它同時具有游離氨基和羧基。每種蛋白質都有自己的等電點。在等電點時,蛋白質所帶的正負電荷相等。在pH值大于等電點的溶液中,羧基解離多,此時蛋白質帶負電荷,帶負電荷的蛋白質在電場中向正極移動;在pH值小于等電點的溶液中,氨基解離多,此時蛋白質帶正電荷,在電場中向負極移動。

    電泳系統Biometra

      Biometra為您提供各種核酸/蛋白質電泳設備,其中TGGE系統是獨家生產的新一代產品,并享受ZL保護。該系統能夠產生穩定而有效的溫度梯度,基于生物大分子在不同溫度下分子構象發生變化,進而發生電泳行為變化的原理,用于研究生物大分子突變、分子內或分子間相互作用、蛋白熱穩定性及其他相關研究。  

    電泳儀

    電泳儀于1937年研發,常用支持物體有濾紙、醋酸纖維薄膜等。電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。

    制備電泳實驗

    實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品通過某種電泳方法進一步分離純化后,再用擴散洗脫或電泳洗脫收集純樣品,繼而用作其他分析的需要。實驗材料 凝膠切片儀器、耗材 解剖刀勻漿器實驗步驟 1. 擴散洗脫擴散洗脫是用解剖刀或勻漿器將凝膠切片搗

    電泳系統原理

    電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團,它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電,在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質以

    甲醛變性電泳

    實驗概要本實驗介紹了RNA電泳(即甲醛變性電泳)的原理及操作步驟等。實驗原理提取樣品的總RNA后,一般根據RNA的凝膠電泳圖來判斷RNA的質量。由于RNA容易形成二級結構,因此常用甲醛變性膠來進行RNA電泳,得到的電泳圖能真實反映RNA的質量狀況。將RNA通過凝膠電泳使之在凝膠中分離出來,通過加入標

    凝膠電泳

    以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。其中聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大,對一般蛋白質不起分子篩作用,但適用于分離同工酶及其亞型,大

    雙向電泳

    實驗概要本實驗介紹了雙向電泳技術,先進行等電聚焦電泳(按照pI分離),然后再進行SDS-PAGE(按照分子大小),經染色得到二維分布的蛋白質圖。實驗原理雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離,第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離,把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上

    核酸電泳實驗

    瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶EB(德元國際Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外

    免疫電泳

    實驗概要本實驗介紹了免疫電泳(immunoelectrophoresis,IE)實驗原理及操作流程。蛋白質是一種兩性電解質,它同時具有游離氨基和羧基。每種蛋白質都有自己的等電點。在等電點時,蛋白質所帶的正負電荷相等。在pH值大于等電點的溶液中,羧基解離多,此時蛋白質帶負電荷,帶負電荷的蛋白質在電場中

    火箭電泳實驗

    實驗方法原理在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。實驗材料待檢血清試劑、試劑盒巴比妥緩沖液瓊脂粉儀器、耗材微量進樣器打孔器玻璃板電泳儀實驗步驟1. ?抗體瓊脂板的

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