• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>

  • 2.8.1流感病毒RNA提取

    試劑、試劑盒10×RSB 溶液10%SDS蛋白酶 KlOXLiCI 溶液RSB 飽和的酚氯仿異戊醇2mol L 乙酸鈉 無水乙醇TSE 溶液LiCl 緩沖液平衡酚TSE 飽和酚4mol LLiCL實驗步驟一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LTris,O.OOlmol/LKCl,0.0015mol/LMgCL22)10%SDS3) 蛋白酶 K,5 mg/ml4)lOXLiCI 溶液:5%SDS,0.lmol/L 乙酸鈉,1.4mol/LLiCl。5)RSB 飽和的酚.6) 氯仿:異戊醇 (24:1)7)2mol/L 乙酸鈉。8) 無水乙醇。2.LiCl 提取法1)TSE 溶液。2)10%SDS,3) 蛋白酶 K(10 mg/ml)。4)lOXLiCl 溶液:5%SDS,0.lmol/L 乙酸鈉,1.4mol/LLiCl5)LiCl 緩沖液平衡酚6) 氯仿7)2mol/L 乙酸鈉8) 無水乙醇,3) ......閱讀全文

    全血RNA提取

    摘要:?RNA提取應該說已經成為了一種常見的分子生物學操作步驟了,但是不少科研人員仍然煩惱著如何尋找一種最好的方法,或者找到一種適合于特殊用途方法。比如說傳統的血液標本表達譜芯片實驗需要先把有核細胞從全血中分離出來,加白細胞分離液、離心等步驟,比較繁瑣,如果能進行全血的提取,那就再好不過。RNA提取

    TRIzol-RNA提取方法

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構

    RNA提取與純化

    實驗概要掌握RNA提取的基本技術,了解RNA提取過程中的各種注意事項。實驗原理RNA提取是分子生物學實驗中難度較大的實驗技術。?RNA提取和DNA提取有類似的地方,因為它們都是核酸,都具有較好的水溶性。提取RNA首先破碎細胞,然后用提取液將RNA溶出,反復抽提去除蛋白質,加入乙醇沉淀RNA,將RNA

    RNA提取技術概述

    RT-PCR是將RNA的反轉錄(Reverse Transcription,RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術,近年來得到快速發展和廣泛應用。首先,經反轉錄酶的作用,以RNA為模板,合成互補的DNA鏈(cDNA),再以cDNA為模板,通過PCR擴增合成目的片段。RT-PC

    總RNA的提取(Trizol法提取)

    在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase的作用。1.????? 提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml

    動物RNA提取實驗——SV總RNA試劑盒提取法

    動物RNA提取可用于:(1)研究生物體基因調控機制;(2)分子克隆和基因表達以獲得該性狀基因;(3)可以對特定的基因表達進行定量的檢測,從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。實驗方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養

    動物RNA提取實驗——Trizol試劑提取法

    實驗方法原理Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液,其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性,隨后加入氯仿,酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中,RNA則分布在上層的水相中,最后用異丙醇沉淀水相中的RNA,并用70

    乙型腦炎病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酚 氯仿 異戊醇 ?乙醚 ?KAc ?乙醇 ?DEPC 處理水

    小麥總RNA的提取

    實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片,迅速在液氮中研磨成粉末,轉入已準備好的離心管中,劇烈震蕩。

    小麥總RNA的提取

    實驗概要從黃化小麥苗中提取總RNA,可以為cDNA文庫的構建做好準備。實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃

    樣品總RNA的提取

    實驗概要本實驗介紹了樣品總RNA的提取方法。完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點,即:樣品細胞或組織的有效破碎;有效地使核蛋白復合體變性;對內源RNA酶的

    乙型腦炎病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 酚氯仿 異戊醇 乙醚 KAc 乙醇 DEPC 處理水 TBE 緩沖液 上樣液 KCI。儀器、耗材 透析袋實驗步驟 一 材料與設備1) 酚:氯仿:異戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 處理水6)TBE 緩沖液7〕上樣液:40% 甘油,0.

    RNA提取實驗方法

    總RNA(total RNA)和信使RNA(mRNA)的抽提(自己的總結)1、實驗目的提取人體細胞的總RNA和mRNA。?2、本實驗所需試劑1)、CNE-2細胞及培養細胞的一系列條件,2)、PBS緩沖液, TRIZOL試劑,3)、DEPC處理過的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管,4)、新的

    全血RNA提取實驗

    實驗材料 鮮血液試劑、試劑盒 抗凝劑紅細胞裂解液RLB去蛋白液RW1乙醇漂洗液RW儀器、耗材 制冰機離心機離心管移液槍移液管針頭注射器水浴鍋實驗步驟 一、在適合大小的RNase free離心管中加入1體積(

    全血RNA快速提取

    操作步驟:(實驗前請先閱讀注意事項)提示:??第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇!??使用前將10X紅細胞裂解液RLB用DEPC處理水稀釋到1X。??操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巰基乙醇。此裂解液最好現用現

    細胞總RNA的提取

    提取細胞RNA的步驟:1)??六孔板每孔細胞中加入1ml Trizol,冰上放置5min,槍頭吹打。2)??將各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中,加入氯仿0.2ml/管,用力振搖15s。15-30℃下孵育2-3min,離心(4℃,12,000g,15min)。3)??離心后液體分為三層(上層-無色

    流感病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 ?10%SDS ?蛋白酶 K ?lOXLiCI 溶液 ?RSB 飽和的酚 ?氯仿

    全血RNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂

    RNA病毒類型提取方法

    試劑準備1、 TROzlo試劑、氯仿、75%乙醇(0.1% DEPC配制)。2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡。3、 0.1%DEPC水:100ml dd水中加入DEPC0.1ml,充分振蕩,37℃孵育12h以上,121℃高壓滅菌20min,于4℃保存。操作步驟1、 樣品處理(1) 組織:5

    組織/細胞RNA快速提取

    ?操作步驟:(實驗前請先閱讀注意事項)提示:??第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇!??操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巰基乙醇。此裂解液最好現用現配。配好的RLT 4℃可放置一個月。1.?組織培養細胞a.?收

    甲型肝炎病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 TSES 緩沖液TSES 緩沖液飽和酚氯仿辛醇乙酸鉀乙醇緩沖液 Almol LNaH2P04 緩沖液氯胺 T 溶液Na125I5 mmol LNa2S2O5lOOmmol LKINET 緩沖液酵母 tRNA蔗糖纖維素柱平衡液三重蒸餾水0.1mol LNaOH5 mmol L

    全血RNA提取實驗

    全血RNA的提取可用于:(1)研究RNA干擾機制等;(2)用作反轉錄模板;(3)分子生物學其他研究。實驗方法原理紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快

    甲型肝炎病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 TSES 緩沖液 TSES 緩沖液飽和酚 氯仿 辛醇 乙酸鉀 乙醇 緩沖液 A lmol L

    肝臟細胞RNA的提取

    一.原理RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是至關重要的,

    Omega真菌RNA提取流程

    實驗概要Omega真菌RNA提取試劑盒中文說明書(E.Z.N.A. Fungal RNA Kit)。主要試劑1. 取適量RB裂解液,按1ml裂解液加入20ul 2-疏基乙醇。該混合液可于室溫放置一周。2. 用DEPC水配置一小瓶70%乙醇。3. 按下表用無水乙醇稀釋RNA Wash Buffer I

    細胞RNA的提取方法

    (一)細胞總RNA的提取1、6孔板細胞匯合度為90-100%時,取出無菌室,去其上清,用PBS洗兩次后,每孔加TRIZOL試劑 1 ml,搖勻,無菌罩內消化3-5 min。2、將各孔內消化好的細胞裂解液吸到一DEPC處理過的1.5 ml EP管中,加新開的氯仿0.2 ml,輕搖15 s。3、室溫靜置

    如何改善RNA提取質量

    1.在收獲組織及細胞死亡之后,應立即滅活內源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是:組織塊必須保證足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結,以確保瞬間令RNA酶失活3)立即將樣品置

    總RNA提取實驗步驟

    一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?(1)發酵3~4天(或對數生長期)的菌體,離心收集菌絲體(動植物材料無需此步處理)。?(2)用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次,并盡量除去殘存的水。?(3)加液氮充分研磨,使其成為粉末,以釋放RNA。?(4)研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。

    流感病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 10%SDS 蛋白酶 K lOXLiCI 溶液 RSB 飽和的酚 氯仿 異戊醇 2mol L 乙酸鈉 無水乙醇 TSE 溶液 LiCl 緩沖液平衡酚 TSE 飽和酚 4mol LLiCL實驗步驟 一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LT

    RNA-和-DNA-提取:洗脫

    DNA 提取方案的還剩余IDE步驟步就是從硅膠中釋放純 DNA 或 RNA。對于 DNA 制備,通常使用 pH 值為 8-9 的 10 mM Tris。DNA 在弱堿性 pH 值下更穩定,在緩沖液中溶解得更快。即使對于 DNA 顆粒也是如此。水的 pH 值往往較低,低至 4-5,并且高分子量 DNA

  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载