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    免疫PCR

    免疫PCR (Immuno PCR, Im-PCR) 是利用抗原抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性而建立的一種微量抗原檢測技術。是用一段已知DNA分子標記抗體作為探針,用此探針與待測抗原反應,PCR擴增粘附在抗原抗體復合物上的這段DNA分子,電泳定性,根據特異性PCR產物的有無,來判斷待測抗原是否存在。實驗方法原理主要由兩個部分組成,第一部分的免疫反應類似于普通的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的測定過程;第二部分即通常的PCR檢測,抗原分子的量最終由PCR產物的多少來反映。第一步中,首先用待測抗原(如牛血清白蛋白(ESA))包被微滴板孔,再加入相應的特異抗體,于是抗體就與固相上的抗原結合形成抗原抗體復合物,蛋白A-鏈親合素(Protein A-Streptavidin)嵌合體(重組融合蛋白)中的蛋白A部分可與固相上抗原抗體復合物中的抗體IgG結合,而鏈親合素部分可與生物素化的pUC19(質粒DNA) (Biotin-p......閱讀全文

    定量PCR的新技術

    1992年,Sano等人將免疫測定技術與PCR結合,創建了一種全新的極其敏感的抗原分子檢測技術,即免疫-PCR(Immuno-PCR),隨著這種技術的不斷發展,2000年,Sim等使用熒光定量PCR代替普通PCR,發展了免疫定量PCR技術(real-timeimmuno-PCR)。該技術把抗原抗體反

    免疫PCR的基本原理

        免疫PCR的基本原理1.定義  免疫PCR(immuno polymerase chain reaction,IM-PCR)是1992年Sano建立的一種檢測微量抗原的高靈敏度技術。該技術把抗原抗體反應的高特異性和聚合酶鏈反應的高敏感性有機結

    免疫PCR法檢測有哪些特點?

    免疫PCR法檢測有哪些特點?:免疫PCR綜合了固相免疫反應和PCR兩者的特點。因而在保證免疫測定特異性的同時,又具有極高的檢測靈敏度。免疫PCR的基本原理與執業護士網常規標記免疫技術相似,只不過在免疫PCR中所用的抗原或抗體標記物為DNA,在固相免疫結合反應完成后,再采用PCR技術對標記DNA進行擴

    免疫PCR(Immuno-PCR)概念、組成和免疫PCR產物的檢測

    (一) 免疫PCR技術的概念免疫PCR是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR集PCR的高靈敏度與抗體和抗原反應的特異性于一體。其突出的特點是指數級的擴增效率帶來了極高的敏感度,能檢出濃度低至2ng

    免疫PCR[Im-PCR, Immuno PCR]基本原理、試驗程序和操作方法-1

    一、定義;免疫PCR是利用抗原抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性而建立的一種微量抗原檢測技術。用抗體檢測抗原是免疫學的最基本方法,用酶或同位素標記抗體可使檢測的敏感性提高,常用的定量檢測方法ELISA和RIA均基于標記分子可以使檢測的信號增強。免疫PCR是在ELISA的基礎上建立起來的新方

    免疫PCR實驗

    實驗方法原理 免疫PCR主要由兩個部分組成,第一部分的免疫反應類似于普通的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的測定過程;第二部分即通常的PCR檢測,抗原分子的量最終由PCR產物的多少來反映。第一步中,首先用待測抗原(如牛血清白蛋白(ESA))包被微滴板孔,再加入相應的特異抗體,于是抗體就與固相上的抗原結

    免疫PCR[Im-PCR, Immuno PCR]基本原理、試驗程序和操作方法-4

    3 PCR產物的檢測與定量技術 1)凝膠檢測系統 用凝膠掃描儀或計算機輔助視頻設備對溴化乙錠染色的瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠進行定量,放射性標記的擴增產物可通過放射自顯影定量測定,最近用自動DNA 測序儀檢測熒光標記的核酸,這種方法可準確測量擴增產物的大小,而且其檢測靈敏度達fg水平,

    免疫PCR

    免疫PCR             實驗方法原理 主要由兩個部分組成,第一部分的免疫反應類似于普通的酶聯免疫吸附試驗(EL

    免疫PCR(Immuno-PCR)概念和基礎

    (一) 免疫PCR技術的概念免疫PCR是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR集PCR的高靈敏度與抗體和抗原反應的特異性于一體。其突出的特點是指數級的擴增效率帶來了極高的敏感度,能檢出濃度低至2ng

    免疫PCR系列五-免疫PCR要點與注意事項

    一、免疫PCR要點(1)連接分子免疫PCR需要適當的連接分子連接報告分子和抗原抗體復合物。1 992年Sano用重組的鏈親和素-蛋白A嵌合體作為連接分子,創立了免疫PCR技術。該融合蛋白的蛋白A可結合抗體的Fc段,鏈親和素可結合DNA分子上的生物素,Sano利用此連接分子把一段生物素化的DNA(PU

    免疫PCR[Im-PCR, Immuno PCR]基本原理、試驗程序和操作方法-2

    4DNA和PCR系統 免疫PCR中的DNA是一指示分子,用DNA聚合酶將結合于固相上的DNA特異放大,由此定量檢測抗原。免疫PCR的敏感性高于ELISA主要是應用了PCR強大的擴增能力。免疫PCR中的DNA分子可以選擇任何DNA,但要保證DNA的純度,且有較好的均質性,盡可能不選用受檢樣品

    定 量 P C R

    定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指

    生物技術在食品檢測中的應用研究

      摘 要:當代社會人類對食品安全的關注度越來越高,相應的食品檢測技術也得到不斷改善。其中生物技術揮了重要的作用,PCR技術、酶聯免疫吸附技術(ELISA)、PCR-免疫技術(PCR-ELISA)、免疫親合色譜(IAC)、生物芯片(Biochips) 等技術以各自的優點,被廣泛地運用于食品檢測領域。

    略談生物技術在食品檢測中的應用

      摘要:當代社會人類對食品安全的關注度越來越高,相應的食品檢測技術也得到改善。其中生物技術也揮了重要的作用,PCR技術、酶聯免疫吸附技術(ELISA)、PCR-免疫技術(PCR-ELISA)、免疫親合色譜(IAC)、生物芯片(Biochips)等技術以各自的優點,被廣泛地運用于食品檢測領域。&nb

    免疫多聚酶鏈反應

    實驗概要免疫多聚酶鏈反應(PCR)是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。由于PCR具有強大的擴增能力,因而比常規的免疫學檢測法,如ELISA和放射免疫測定(RIA)的敏感性提高好幾個數量級。實驗原理免疫PC

    免疫多聚酶鏈反應

    實驗概要免疫多聚酶鏈反應(PCR)是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。由于PCR具有強大的擴增能力,因而比常規的免疫學檢測法,如ELISA和放射免疫測定(RIA)的敏感性提高好幾個數量級。實驗原理免疫PC

    原位免疫PCR的IHC增敏方法原理和操作流程

    (一)基本原理Sano等(1992)率先利用基因工程的方法表達了A蛋白與鏈霉親和素的嵌合體分子獲得成功,建立了免疫PCR技術。這是一種新的抗原檢測系統,利用細胞工程和基因工程技術,巧妙地將抗原抗體反應的特異性同PCR的敏感性相結合,通過構建單克隆抗體與重組核酸的嵌合體分子,使得利用PCR技術檢測蛋白

    PCR技術應用進展

       PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術  原位PCR就是在組織

    PCR技術(六):PCR技術應用進展

    PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術  原位PCR就是在組織細胞里進行PCR

    免疫PCR技術(Immuno-PCR)

    免疫PCR技術(Immuno-PCR) 免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年將免疫學反應和PCR技術相結合而創建的一種新的檢測技術,具有抗原、抗體反應的特異性和PCR技術的高效性。它運用PCR的高度敏感性來放大抗原抗體反應的特異性,使實驗中只需數百個抗原分子即

    免疫PCR技術材料方法和注意事項(二)

    4. 免疫PCR 將生物素標記的抗體與親和素按等分子濃度混合于含有1mg/mlBSA的PBS中,室溫孵育30min,再加入兩倍分 (1) 按常規ELISA方法,用飽和緩沖液稀釋抗原,加到96孔塑料板或0.5mlPCR管中,4℃過夜。 (2) 用PBS洗三次,然后每孔加2

    免疫PCR技術

    (一)材料與方法1. 生物素標記特異性抗體的制備  免疫球蛋白(如IgG、IgM)的Fc片段上有糖基存在,因而可用能與糖基結合的Biotin-hydrazide作生物素標記。(1) 將純化的抗體(IgM或IgG, 0.1~1.0ml)在標記緩沖液(0.1Mol/L NaAc,pH

    IVD行業之分子診斷產業鏈分析

      上游是原料供應商,包括診斷酶、引物、反轉酶、探針等生物制品,高純度氯化鈉、無水乙醇等精細化學品,以及提取介質材料;  中游是分子診斷試劑和儀器制造商,包括羅氏、賽默飛、達安基因、科華生物、之江生物、湖南圣湘等;  下游是使用儀器或試劑的用戶,包括醫院、 第三方醫學實驗室、血站、體檢中心等。  從

    原位免疫PCR的IHC增敏方法

    (一)基本原理Sano等(1992)率先利用基因工程的方法表達了A蛋白與鏈霉親和素的嵌合體分子獲得成功,建立了免疫PCR技術。這是一種新的抗原檢測系統,利用細胞工程和基因工程技術,巧妙地將抗原抗體反應的特異性同PCR的敏感性相結合,通過構建單克隆抗體與重組核酸的嵌合體分子,使得利用PCR技術檢測蛋白

    免疫PCR試驗方法全解析

    *、材料與方法【生物素標記特異性抗體的制備】  免疫球蛋白的Fc片段上有糖基存在,因而可用能與糖基結合的Biotin-hydrazide作生物素標記。  ① 將純化的抗體(IgM或IgG,0.1~1.0ml)在標記緩沖液(0.1Mol/L NaAc,pH值5.5,0.1Mol/L

    ACG找到提高幽門螺旋桿菌檢測率的方法

    根據美國胃腸病學會(ACG)2011年度科學會議和研究生課程的一項研究結果稱,2011年11月1日(國家海港/華盛頓) - 應用聚合酶鏈反應(PCR)檢測到的幽門螺旋桿菌患者數量是免疫組化法(IHC)的兩倍以上。本文的第一作者,馬里蘭州消化中心醫療顧問,巴爾的摩的約翰霍普金斯大學醫學院的醫學助理教授

    試管嬰兒植入前遺傳學診斷單細胞PCR的方法(1)

    聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)簡稱PCR技術,是近年來發展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術,由于其可使特定DNA片段在數量上呈指數增加至可檢測范圍,故成為基因診斷的重要方法。在PCR基礎上衍生的一些擴增技術已用于基因突變的診斷。目前單基因疾病P

    我國體外診斷行業(IVD)市場與需求

      1. 什么是體外診斷(IVD)行業?  IVD是指在人體之外通過對人體的血液等組織及分泌物進行檢測獲取臨床診斷信息的產品和服務。我國醫院里俗稱的“檢驗檢查”中的“檢驗”包括了IVD的大多數細分種類——如①生化診斷(clinical chem)、②免疫診斷(immunoassay)、③分子診斷(M

    試管嬰兒植入前遺傳學診斷單細胞PCR的方法

      聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)簡稱PCR技術,是近年來發展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術,由于其可使特定DNA片段在數量上呈指數增加至可檢測范圍,故成為基因診斷的重要方法。在PCR基礎上衍生的一些擴增技術已用于基因突變的診

    大腸桿菌的檢測方法

      隨著人們生活水平的提高,食品安全問題受到越來越多的重視,在不斷被報道的食品安全事故中,大腸桿菌是引起這些事件的主要的影響因素之一,是判斷食品污染程度的一個重要參數,因此采用快速、可靠、簡便的方法來準確檢測食品中大腸桿菌數量是否超標是至關重要的。本文綜述了大腸桿菌的傳統檢測方法以及最新的

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