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實驗材料ECM試劑、試劑盒蒸餾水儀器、耗材濾膜實驗步驟1. 選擇適宜的培養基質（ECM），先制備成貯存干液；2. 使用前，貯存干液用高純度的蒸餾水稀釋成0.1 mg/ml 濃度的使用液；3. 使用液用0.22 μm 孔徑的微孔濾膜過濾除菌；4. 用吸管吸取使用液，均勻涂于消毒滅菌的細胞培養器皿的細胞生長表面。使用液的用量可按每平方厘米表面加50 μl的溶液，為保證其表面全部被溶液浸濕，用量可適當增減；5. 室溫下靜置5 分鐘（使用膠原做基質時，可適當延長時間至24 小時），然后吸出多余的溶液；6. 再用滅菌蒸餾水（100 μl/cm2）洗滌涂有ECM的表面，然后盡量將水分吸凈控干；7. 根據不同細胞生長特點，接種適宜濃度的細胞進行培養。展開 注意事項1. 制備過程要在嚴格無菌條件下進行。其他一、自制無血清培養基舉例1. &n......閱讀全文
實驗概要 經歷了天然培養基、合成培養基后，無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。 實驗原理 無血清培養基(serum free medi
經歷了天然培養基、合成培養基后，無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。 無血清培養基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是
無血清培養基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養基加少量血清所配制的完全培養基可以滿足大部分細胞培養的要求，但對有些實驗卻
經歷了天然培養基、合成培養基后，無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。 無血清培養基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是它們
細胞培養（cell culture）就是從機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養基 中，讓這些細胞生長和增殖。體外細胞培養最常見的是合成培養基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清進行培養；但是大量使用牛血清制品有許多缺陷，如，動物源成分，無法用于臨床研究；成分復雜
細胞培養（cell culture）就是從機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養基 中，讓這些細胞生長和增殖。體外細胞培養最常見的是合成培養基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清進行培養；但是大量使用牛血清制品有許多缺陷，如，動物源成分，
㈠無血清培養基和試劑被廣泛的應用于培養哺乳動物和無脊動物細胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數的無血清產品含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質如清蛋白，纖連蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細胞培養中發揮各種不同功能，如吸附毒性化合物，抗生物反應器剪切力，提
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白為淡黃色粉末，雖易潮解結塊，但不影響使用。 不同批號和牌號質量有差異。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解后的產物，含有豐富的氨基酸。開始時它是專為猴腎細胞培養設計的，而實際上它對許多細胞系(株)，如Hela細胞和原代細胞都是一種優良培養基。使用時用Hanks液配制成0
㈠無血清培養基和試劑被廣泛 的應用于培養哺乳動物和無脊動物細胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數的無血清產品含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節葡萄糖攝取量的胰 島素，以及一些蛋白質如清蛋白，纖連蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細胞培養中發揮各種不同功能，如吸附毒性化合物，抗
一、細胞培養基礎和步驟細胞培養基大全細胞原代培養步驟細胞傳代培養步驟二、細胞培養常見問答1、加到培養基中的血清 必須滅活嗎？答：不是必須的，看做什么實驗了。2、四季青胎牛血清滅活是56 ℃30分鐘嗎？答：如果用于培養大多數的腫瘤細胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長因子
細胞培養常見問答 1、加到培養基中的血清 必須滅活嗎？ 答：不是必須的，看做什么實驗了。 2、四季青胎牛血清滅活是56 ℃30分鐘嗎？ 答：如果用于培養大多數的腫瘤細胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長因子 。但是如果用于培養一些表面具
實驗原理： 轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。 常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝
線型PEI（Line PEI，LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（Branched PEI，BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有
食品微生物實驗室規劃設計方案一、選址：實驗室應選擇在清潔安靜的場所，遠離生活區，鍋爐房與交通要道；實驗室應選擇在光線充足，通風良好的場所，要與生產加工車間有一定距離；實驗室應選擇在方便扦樣與檢驗，距離車間較近的工作場所。二、結構和布局：根據生產實際需要，一般工廠應設置細菌與理化檢驗兼有的綜合實驗室，
2.2.1 水水是唯一一種在凝固時膨脹的化合物。因此在選擇凍存細胞的容器時應考慮到這個因素。容器因水的膨脹而發生破裂是引起試劑污染的重要原因。為了避免金屬離子、有機分子、細胞內毒素等物質對水的污染，在配制液體，清洗容器時必須使用不含雜質的超純水。需要注意的是，超純水放置過久其純度會下降。在高壓蒸氣滅
（一）一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊，先用固定劑（fixative）固定（fixation），使組織中的蛋白質迅速凝固，防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等，一般常將幾種固定劑配制成混
合成培養液的配制 無血清培養基的制備 實驗方法原理 干粉型培養基是用球磨機或噴霧法將各種
動物細胞與胚胎工程實驗常用培養液配制與檢測，可用于（1）動物細胞的培養（2）胚胎工程的發展（3）分子生物學的研究。溶液配制法實驗方法原理動物細胞工程的主要操作對象是離體條件下動物有機體的各部分組織、器官或細胞，這些用來進行離體培養的組織或器官稱為外植體；動物胚胎工程的主要操作對象是配子和胚胎。要滿足
◇濕熱消毒的注意事項①不可用安全閥摘子排氣。②消毒的過程中若出現漏氣現象，可調節消毒器蓋內的膠墊的位置。③滅菌完畢，不要急于取出消毒品，可利用消毒器的余熱去除物品部分濕氣，待半小時左右再移入干燥箱烘干。2.干熱消毒 這種消毒方法主要用于玻璃器皿消毒，一般溫度在160℃維持90—120分鐘就可以殺死
實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠 肌
近期，上海公衛臨床研究中心的一位研究生應用兩種轉染試劑Turbofect transfection reagent（Thermo）和EntransterTM-R4000（Engreen）進行了一次RNA轉染比較。比較情況如下：實驗方法轉染試劑：Turbofect transfection reage
實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 細胞 TgSVA 細胞 Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞 NS20Y 細胞 人肝癌來源的 HepG2 細胞試劑、試劑盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等滲
正常人包皮成纖維細胞的培養實驗材料：1. 細胞來源：新生兒包皮；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2；3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液：兩者比例為1：1，用D-Hanks液配制；4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制劑：用DM
用哺乳動物細胞 S10 抽提物翻譯脊髓灰質炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技術。實驗材料ATPGTP質粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 膠肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 細胞TgSVA 細胞Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞NS20Y 細胞人肝癌來源的 HepG2
隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展，新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應，已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力，已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法
隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展，新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應，已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力，已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法，
隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展，新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應，已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力，已創建不少快速、簡便、特
方案20.1 冷凍細胞 實驗方法原理 細胞生長至對數晚期，以培養基制
方案20.1 冷凍細胞 實驗方法原理 細胞生長至對數晚期，以培養基制
實驗方法原理細胞生長至對數晚期，以培養基制備高濃度細胞懸液，加入細胞保護劑，等份轉移至凍存管中，緩慢冷凍（圖 20.8）。細胞用胰酶消化后，加入含有細胞保護劑的培養基，分裝至凍存管中，然后將其夾到鋁條上，用紙質管包裹，放入隔熱儲存管中。將儲存管及其內容物于-70℃或-80℃存放4h或過夜，最后將含有