外周血B細胞的檢測_活性B細胞檢測
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外周血B細胞的檢測_活性B細胞檢測
實驗步驟展開
外周血B細胞的檢測
外周血CD19+、CD20+細胞檢測 活性B細胞檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟
外周血B細胞的檢測
外周血CD19+、CD20+細胞檢測 活性B細胞檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟
機體免疫功能檢測—外周血T細胞、B細胞、NK細胞同步檢測法
實驗步驟展開?
外周血活性T細胞的檢測
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外周血活性T細胞的檢測
外周血活性T細胞的檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 ? ? ?
外周血活性T細胞的檢測
實驗步驟展開
外周血淋巴細胞HLAB27表達檢測
試驗原理??????? HLA-B27屬于1型MHC基因。基本上表達在機體所有有核細胞上，特別是淋巴細胞表面有豐富的含量。使用熒光定量標準微球，校正HLA-B27實驗條件后，測定樣本中T淋巴細胞HLA-B27表達水平。若HLA-B27表達水平大于標準微球設定MARK，則為陽性結果；若HLA-
B細胞功能檢測
（一）B細胞增殖試驗 原理與T細胞增殖試驗相同，但刺激物不同，小鼠B細胞可用細菌脂多糖（LPS）作為刺激物，人則用含SPA的金黃色葡萄球菌菌體及抗IgM抗體等刺激。（二）溶血空斑試驗 原理：將SRBC免疫的小鼠脾臟（或家兔淋巴結）制成單個細胞懸液，與SRBC在瓊脂糖凝膠內混合后傾注于小平皿或玻片上。
B－細胞功能的檢測
實驗步驟基 本 方 案 1 抗原特異性的抗體產生材 料200ul 完全培養基重懸細胞（兩種板）。在測定前將細胞置于冰上。基 本 方 案 2 Jerne-Nordin PFC 測定法材 料2 X R P M I 1640 培養基中含碳酸氫鹽（Invitrogen)SeaPlaque 低 熔 點 瓊 脂
B細胞功能的檢測
一、體內試驗? B細胞受抗原或促有絲分裂原刺激后，可行分裂增殖并分化成熟為抗體生成細胞，且分泌相應的Ig。B細胞功能減低或缺陷，可表現為體內Ig和血型抗體量下降或缺如，患者對外源性抗原的應答能力減弱或缺如，僅產生極低或不能產生特異性抗體，故臨床定量測定受檢者血清中各種Ig量和相應血型抗體，可判斷B
B細胞功能檢測介紹
一、體內試驗?B細胞受抗原或促有絲分裂原刺激后，可行分裂增殖并分化成熟為抗體生成細胞，且分泌相應的Ig。B細胞功能減低或缺陷，可表現為體內Ig和血型抗體量下降或缺如，患者對外源性抗原的應答能力減弱或缺如，僅產生極低或不能產生特異性抗體，故臨床定量測定受檢者血清中各種Ig量和相應血型抗體，可判斷B細胞
B細胞分泌抗體的檢測
基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞（P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板（Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 107?個細
B因子溶血活性的檢測
將RRBC加入正常人血清中，可使B因子活化，激活補體旁路途徑致使BRBC溶解。將正常人新鮮血清加熱使B因子喪失活性（簡稱RB），旁路途徑不能激活，當加入RRBC時不發生溶血。此時再加入含有B因子的待測血清，旁路途徑即被激活，RRBC發生溶血反應。根據溶血程度可測定待測血清中B因子的活性。1、兔紅細胞
BrdU檢測丁細胞和B細胞增殖
基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D N A
外周血T細胞的檢測——外周血T細胞亞群的檢測分析
實驗步驟展開
外周血白細胞HLAB27的表達
? ? ? ? ? ? 實驗材料 CD3 單抗 HLA-B27 單抗 全血 試劑、試劑盒 溶血劑 多聚甲
外周血白細胞HLAB27的表達
? ? ? ? ? ? 實驗材料 CD3 單抗 HLA-B27 單抗 全血 試劑、試劑盒 溶血劑 多聚甲
外周血白細胞HLAB27的表達
實驗材料 CD3 單抗HLA-B27 單抗全血試劑、試劑盒 溶血劑多聚甲醛儀器、耗材 流式細胞儀實驗步驟 1. 取熒光素 PE 標記的 CD3 單抗及 FlTC 標記的 HLA-B27 單抗 30 μl、EDTAK3 抗凝的全血 50 μl，混勻后室溫染色 15 min ( 或 20 min)。2.
外周血免疫細胞檢測
? ? ? ? ? ? 實驗材料 靜脈全血 試劑、試劑盒 肝素 鼠抗人目的單克隆抗體 溶紅細胞液 生理鹽
外周血免疫細胞檢測
? ? ? ? ? ? 實驗材料 靜脈全血 試劑、試劑盒 肝素 鼠抗人目的單克隆抗體 溶紅細胞液 生理鹽
外周血免疫細胞檢測
實驗材料靜脈全血試劑、試劑盒肝素鼠抗人目的單克隆抗體溶紅細胞液生理鹽水儀器、耗材FCM 測量管實驗步驟1. 取 1000 U/ml 肝素 100 ul 抗凝靜脈全血，置于 FCM 測量管中。2. 直接標記法：加入帶熒光標記的鼠抗人目的單克隆抗體試劑 10 ul，充分混勻，在 4℃ 冰箱中反應 30
外周血單個核細胞（PBMC）中，是否包含有B細胞
PBMC中主要包含單核細胞和淋巴細胞，淋巴細胞中包含T和B細胞。
外周血T細胞的檢測
用熒光標記三參數檢測外周血T細胞亞群 用熒光標記雙參數檢測外周血T細胞亞群 用熒光標記單參數檢測外周血T細胞亞群 外周血T細胞亞群的檢測分析 ? ? ? ? ? ?
外周血T細胞的檢測
用熒光標記三參數檢測外周血T細胞亞群 用熒光標記雙參數檢測外周血T細胞亞群 用熒光標記單參數檢測外周血T細胞亞群 外周血T細胞亞群的檢測分析 ? ? ? ? ? ?
人外周血B、T淋巴細胞的分離方法
目前常用Ficoll密度梯度離心法直接分離和純化外周血單個核細胞。方法: 1. 在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。 2. 取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPMI1640充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持清楚的界面。水平離心2000rpm×20分鐘。 3. 離心
外周血T細胞的檢測—熒光標記三參數檢測外周血T細胞亞群
實驗步驟展開
外周血T細胞的檢測—熒光標記雙參數檢測外周血T細胞亞群
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外周血T細胞的檢測—熒光標記單參數檢測外周血T細胞亞群
實驗步驟展開