活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗方法原理活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。實驗材料抗體血清試劑、試劑盒RPMI1640DPBS洗滌液固定液儀器、耗材玻璃管塑料管離心機顯微鏡實驗步驟1. 制備活性高的細胞懸液(培養細胞系、外周血單個核細胞、胸腺細胞、脾細胞等均可用于本法) 2. 用10 %FCS RPMI1640調整細胞濃度為5×106~1×107 /ml 3. 取40 μl細胞懸液加入預先有特異性McAb(5~50 μl)的小玻璃管或塑料離心管,再加50 μl 1∶20(用DPBS稀釋)滅活正常兔血清,4 ℃ 30 min 4. 用洗滌液洗滌2 次,每次加洗滌液2 ml左右,1000 rpm×5 min ......閱讀全文
活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗方法原理活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。實驗材料抗體血清試劑、試劑盒RPMI1640DPBS洗滌液固定液儀器、耗材玻璃管塑料管離心機顯微鏡實驗步驟1. ?
活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗方法原理活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒兔血清第二抗體單克隆抗體FCS-RPMI1640DPBS儀器、耗材玻璃管塑料管離心機熒
流式細胞儀標本的制備
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行精確分類,還能分離純化某一群或亞群細
流式細胞儀標本的制備
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行分類,還能分離純化某一群或亞群細胞。
流式細胞儀標本的制備
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行精確分類,還能分離純化某一群或亞群細
流式細胞儀標本的制備
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行精確分類,還能分離純化某一群或亞群細
流式細胞儀標本制備1
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行精確分類,還能分離純化某一群或亞群細
流式細胞儀標本制備熒光標記法
實驗方法原理活細胞免疫熒光技術是用于FCM檢測的標本準備,染色后也能在熒光顯微鏡下進行觀察,在某些實驗條件下,活細胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優于滴片固定的常規間接免疫熒光的結果。活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,
病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備
實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類,選擇敏感細胞進行培養,如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞)培養,森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞)培養,登革熱病毒用白紋伊蚊
正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點,掌握其體外生長動態,取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面:1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變,包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有
流式細胞儀原理及操作步驟
流式細胞儀原理及操作步驟:流式細胞儀是集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行精確分類,還能分離純化某一群
流式細胞儀原理及操作步驟
流式細胞儀原理及操作步驟: 流式細胞儀是集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行精確分類,還能分離純
活細胞間接免疫熒光法
一.實驗器材:1.??器材:40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等2.??試劑:單抗隆抗體(單抗)、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、疊氮鈉(NaN3)等二.方法(微量法)1.??將分離好的單個核細胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分鐘
基因擴增技術的標本制備
在將Taq DNA聚合酶引入PCR反應,并使之達到自動化之后,PCR反應已變得十分的簡單了。但是PCR樣品的采集及制備卻并非同樣簡單,而且,許多PCR的失敗都歸因于標本的制備不當。用于PCR的標本必須經適當處理后才能使用,因為標本中的許多雜質能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外,處理標本可使待擴增
免疫熒光技術的標本的制作過程
免疫熒光技術在實際應用上主要有直接法和間接法。直接法是在檢測樣品上直接滴加已知特異性熒光標記的抗血清,經洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結果。免疫熒光直接法可清楚地觀察抗原并用于定位標記觀察。間接法是在檢測樣品上滴加已知的細菌特異性抗體,待作用后經洗滌,再加入熒光標記的第二抗體。如研制成的抗沙門氏菌熒光抗體
正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備
實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質,使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片,然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞
流式細胞儀的簡要介紹與注意事項
一、流式細胞儀的檢測范圍1.流式細胞儀可以檢測細胞結構,包括:細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、RNA含量、蛋白質含量。2.流式細胞儀可以檢測細胞功能,包括:細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性、細胞內細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體。二、流式細胞儀的
流式細胞儀的簡要介紹與注意事項
一、流式細胞儀的檢測范圍1.流式細胞儀可以檢測細胞結構,包括:細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、RNA 含量、蛋白質含量。2.流式細胞儀可以檢測細胞功能,包括:細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性、細胞內細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體。二、流式細胞儀
流式細胞儀的簡要介紹
一、流式細胞儀的檢測范圍1、流式細胞儀可以檢測細胞結構,包括:細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、RNA 含量、蛋白質含量。2、流式細胞儀可以檢測細胞功能,包括:細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性、細胞內細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體。二、流式細胞儀
流式細胞儀的簡要介紹(質量控制、樣品制備)
一、流式細胞儀?的檢測范圍1、流式細胞儀?可以檢測細胞結構,包括:細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、RNA 含量、蛋白質含量。2、流式細胞儀可以檢測細胞功能,包括:細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原?、細胞活性、細胞內細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體。二、流式
免疫標記電鏡技術標本制備的要求
為保持組織的抗原性,固定劑不宜過強。 1.包埋前染色 優點是切片染色前不經過鋨酸固定、脫水及樹脂包埋等過程,抗原未被破壞,易于獲得良好的免疫反應。特別適用于含抗原量較少的組織。 2.包埋后染色 優點是超微結構保存較好,方法簡便,陽性結構有高度的可重復性,能在同一張切片上進行多重免疫染色。
流式細胞儀原理
生物實驗中的封閉劑流式細胞實驗總結:內容包括流式細胞儀 流程、原理、各種類型的樣本操作、樣本準備,以同型對照的理解,及不同情況下如何使用封閉劑等。是本人相當一段時間來的收集以及修正的內容。流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免
流式細胞儀檢測的免疫熒光樣品標記
用于流式細胞儀檢測的常用熒光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5,PE和PI,在以上各種熒光染料中,PE熒光最強,適用于弱表達抗原;FITC最便宜,適用于強表達抗原,適用范圍廣。??? 1.直接免疫熒光標記法 取一定量的細胞懸液(濃度約l×l06個/m1),直接加入熒光素標記抗體進行免疫反應(
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養人淋巴細胞染色體標本制備腫瘤細胞的染色體標本制備人體染色體常規核型的分析實驗方法原理采用微量全血培養人體外周血中淋巴細胞,在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細胞在再培
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理????人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細
活細胞成像技術活細胞工作站介紹
我們知道以往的固定組織揭示了非常多的自然秘密,給了我們很大的啟示,現在的科學研究則向在最真實的條件下觀察自然發展。縱觀顯微鏡的歷史,直到15年前,科學家主要還是處理死細胞。現在,活細胞的應用已經非常普及了。 加拿大McGill大學成像實驗室主任Claire?M.Brown表示,要達到這個研究目的,我
臨床物理檢查方法介紹流式細胞DNA分析介紹
流式細胞DNA分析介紹:?流式細胞DNA分析是可以研究間期細胞,并不受細胞增殖狀態的影響,對檢測胸腔積液中的惡性細胞的有重要意義的一種檢查方法。 ?流式細胞儀的檢測范圍: ?(1) 流式細胞儀可以檢測細胞結構,包括:細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、RNA 含量、蛋白