皮層/海馬神經元的原代培養實驗
實驗方法原理神經元在發育過程中早于膠質細胞,因此通常選擇胎鼠做腦內神經元培養。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神經元培養。新生1d的仔鼠也可以用來培養神經元,但培養成功后雜細胞較多,有時需要進一步純化。這兩個部位的細胞培養方法類似實驗材料El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小鼠新生Id的仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基神經元維持培養基(Neurobasal+B27+谷氨酰胺)儀器、耗材培養瓶實驗步驟1.根據離心前細胞計數的結果,先用少量神經元維持培養基重懸細胞,充分重懸后,補加液體至合適體積,按照(2-4)x104/cm2的密度在培養板、玻片等介質上接種細胞,并置于37℃孵箱培養。2.培養過程中接觸細胞要注意動作輕柔,接種Id后應避免把細胞從孵箱中拿出,可根據培養液的顏色和亮度觀察污染情況(污染的細胞,培養液混濁、發黃;正常應該是清亮透明的)。3d后1/3量換液,并可利用神經元標志物的免疫化學......閱讀全文
皮層/海馬神經元的原代培養實驗
實驗方法原理神經元在發育過程中早于膠質細胞,因此通常選擇胎鼠做腦內神經元培養。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神經元培養。新生1d的仔鼠也可以用來培養神經元,但培養成功后雜細胞較多,有時需要進一步純化。這兩個部位的細胞培養方法類似實驗材料El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小鼠新
皮層/海馬神經元的原代培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 神經元在發育過程中早于膠質細胞,因此通常選擇胎鼠做腦內神經元培養。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神經元培養。新生1
皮層/海馬神經元的原代培養
實驗方法原理 神經元在發育過程中早于膠質細胞,因此通常選擇胎鼠做腦內神經元培養。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神經元培養。新生1d的仔鼠也可以用來培養神經元,但培養成功后雜細胞較多,有時需要進一步純化。這兩個部位的細胞培養方法類似實驗材料 El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小
小鼠原代海馬神經元細胞的分離培養方法
原代小知識——小鼠原代海馬神經元細胞的分離培養方法海馬體主要負責記憶和學習,日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。神經元是構成神經系統結構和功能的基本單位。神經元具有長突起,由細胞體和細胞突起構成。小鼠海馬神經元細胞的組織來源于實驗小鼠的正常腦組織,因為海馬神經元細胞類似于干細胞屬于高分度分化的細胞
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
原代神經元培養
Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons?Solutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution?-?pdfDM/KY?-?pdfOptim
皮層星形膠質細胞的原代培養
實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的貼附力最強。用這種方法獲得的星形膠質細胞純度很高(95%以上),且細胞具有較好的增
小腦顆粒神經元的原代培養實驗
實驗方法原理小腦顆粒神經元的體外培養受取材部位、特殊培養條件等因素的影響,易于獲得純度較高的培養物。該細胞為雙極突起,常用來研究神經突起的生長。其培養條件具有高濃度鉀離子依賴特性,常用來作為誘導神經元凋亡的研究模型。當成熟顆粒神經元的培養液由高KCl(通常是25-30mmol/L)換為低KC!(基本
小腦顆粒神經元的原代培養實驗
基本方案實驗方法原理小腦顆粒神經元的體外培養受取材部位、特殊培養條件等因素的影響,易于獲得純度較高的培養物。該細胞為雙極突起,常用來研究神經突起的生長。其培養條件具有高濃度鉀離子依賴特性,常用來作為誘導神經元凋亡的研究模型。當成熟顆粒神經元的培養液由高KCl(通常是25-30mmol/L)換為低KC
小腦顆粒神經元的原代培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 小腦顆粒神經元的體外培養受取材部位、特殊培養條件等因素的影響,易于獲得純度較高的培養物。該細胞為雙極突起,常用來研究神經突起的生長。其
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗——貼附差異法
皮層星形膠質細胞的原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)皮層星形膠質細胞功能研究。實驗方法原理利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的
大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗
機械性劃割培養 酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d ,微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元,依劃割程度不同
大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗
機械性劃割培養 酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d ,微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元,依劃割程度不同
海馬神經元細胞的分離及培養
實驗概要從海馬體中分離到神經元細胞,然后進行培養細胞以便進行其他的實驗研究。主要試劑解剖液MEMHBSS主要設備L-多聚賴氨酸包被的平皿或蓋玻片實驗材料出生24h內的乳鼠實驗步驟1. 用冷卻的解剖液(0℃,最高2-3℃)沖洗海馬兩次。2. 在冷卻解剖液(2-3℃)中解剖無腦膜的海馬。3. 加入胰蛋白
神經元原代培養方法
從孕17-18天的雌鼠的胎兒分離神經元細胞。孕雌鼠麻醉然后解剖,胎兒收集到HBSS-1中然后快速斷頭。剝離腦膜和白質后,大腦皮質收集入 HBSS-2 液中機械磨碎。皮質碎片移到有0.025%胰酶的HBSS-2液中37°C消化15分鐘。胰酶消化后,細胞用含有10%胎牛血清的HBSS-2液沖洗兩
大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗——機械性劃割培養
實驗方法原理SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d ,微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元,依劃割程度不同分為輕、中、重3組,對照組除不進行機械性劃割,其余處理同損傷組,傷后不同時間點(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)檢測細胞存活率及培養液上清乳酸脫氫酶(LDH)含量。
小腦顆粒神經元的原代培養
實驗方法原理 小腦顆粒神經元的體外培養受取材部位、特殊培養條件等因素的影響,易于獲得純度較高的培養物。該細胞為雙極突起,常用來研究神經突起的生長。其培養條件具有高濃度鉀離子依賴特性,常用來作為誘導神經元凋亡的研究模型。當成熟顆粒神經元的培養液由高KCl(通常是25-30mmol/L)換為低KC!(基
細胞技術專題:大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗
大鼠大腦皮層神經元細胞培養可以:(1)獲得大鼠大腦皮層神經元細胞;(2)用于神經元細胞定向分化研究;(3)用于神經元細胞凋亡研究。實驗方法機械性劃割培養 酶消化法 實驗方法原理SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d,微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元,依劃割程度不同分為輕、中、重
大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗——酶消化法
實驗材料小鼠試劑、試劑盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培養液儀器、耗材培養箱實驗步驟一、小鼠大腦皮層神經元原代培養步驟1. ?于無菌條件下切取鼠頭并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠腦。2. ?預冷解剖液中分離去除軟膜、血管、取大腦皮質漂洗,用眼科剪將皮質反復剪切成碎塊。3.
大鼠大腦皮層神經元細胞培養
實驗方法原理 SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d ,微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元,依劃割程度不同分為輕、中、重3組,對照組除不進行機械性劃割,其余處理同損傷組,傷后不同時間點(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)檢測細胞存活率及培養液上清乳酸脫氫酶(
小鼠海馬神經元細胞分離培養的步驟詳解
??小鼠神經元細胞中神經元是構成神經系統結構和功能的基本單位。細胞體位于腦、脊髓和神經節中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。? ?(1)75%(體積分數)酒精消毒新生24h內的健康C57小鼠,在無菌條件下脫頸處死,剪開頭皮及顱骨,取出腦組織,置于盛冷的pH7.2,無鈣、鎂的D-Hank'
淺談大鼠海馬神經元細胞的分離培養方法
大鼠海馬神經元細胞分離自海馬體,海馬體,又名海馬回、海馬區、大腦海馬,海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經元細胞是海馬區的主要細胞組成,主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。 海馬屬于大腦的邊緣系統,在學習、記憶、情緒反應及神經系統疾病的病理生理變化
小鼠神經元原代細胞培養步驟
小鼠大腦皮層神經元原代培養步驟: 1、 于無菌條件下切取鼠頭并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠腦; 2、 預冷解剖液中分離去除軟膜、血管、取大腦皮質漂洗,用眼科剪將皮質反復剪切成碎塊; 3、 移入培養皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培養箱中消化30min; 4、
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞原代培養實驗
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法胰酶消化法組織塊直接培養法實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入
細胞的原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散
原代培養的實驗步驟
以胚胎小鼠為例1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的消毒器械。最后取出雙角子宮置于無菌平皿內。2.用Hanks液洗滌3次,剪開子宮取出胚胎。除去子宮、血液和筋膜等組織