流式細胞儀檢測實驗_TUNEL組織切面中的凋亡細胞原位雜交
實驗材料要分析的新鮮組織試劑、試劑盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低溫攬拌溶解過夜用之前過濾)Tris緩沖鹽（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反應液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)馬血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初級抗體溶液HRP共軛的抗羊二級抗體溶液AEC底物工作液Mayer 蘇木精儀器、耗材Crystal Mount 封固介質疏水的棚欄載玻片標志（如 PAP Pen)Coplin廣口瓶或染色托盤加濕箱實驗步驟1) 準備5?8μm的冰凍切片，室溫過夜晾干載玻片。石蠟切片也可以用；切片應該事先制備，水化，然后真空干燥。2) 用PAP筆在每個切片周圍的玻璃上劃一條疏水界線。3) 用1%多聚甲醛完全覆蓋整個切片，在一個密閉的箱內室溫孵育30 min。4) 倒掉多聚甲醛，洗滌載玻片在含TBS的廣口瓶或含染色托盤內室溫孵育5 min，在孵育過程中，載玻片......閱讀全文
流式細胞儀檢測實驗_TUNEL組織切面中的凋亡細胞原位雜交
實驗材料要分析的新鮮組織試劑、試劑盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低溫攬拌溶解過夜用之前過濾)Tris緩沖鹽（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反應液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)馬血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初級
流式細胞儀檢測實驗TUNEL組織切面的凋亡細胞的原位雜交
實驗材料要分析的新鮮組織試劑、試劑盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低溫攬拌溶解過夜用之前過濾)Tris緩沖鹽（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反應液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)馬血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初級
細胞凋亡檢測實驗——TUNEL法
實驗方法原理脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報告酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）的抗地高辛抗體結合。在適合底物存在下，過氧化物酶可產生很強的顏色反應，特異準確
流式細胞儀檢測實驗_用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞
實驗材料要分析的細胞試劑、試劑盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反應液TdT 生物素-dUTP混合液異硫氰酸熒光素（FITC)-鏈霉親和素（streptavidin)結合物儀器、耗材12 mm×75 mm圓底離心管配有269模型轉子的IEC 6R6000離心機（或相當的
流式細胞儀檢測實驗用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞
實驗材料要分析的細胞試劑、試劑盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反應液TdT 生物素-dUTP混合液異硫氰酸熒光素（FITC)-鏈霉親和素（streptavidin)結合物儀器、耗材12 mm×75 mm圓底離心管配有269模型轉子的IEC 6R6000離心機（或相當的
細胞凋亡（TUNEL，TUNEL染色）檢測技術
細胞凋亡是指為維持內環境穩定，??生物體內細胞在特定的內源或外源信號誘導下，其死亡途徑被激活，并在有關基因的調控下發生的程序性死亡過程。細胞凋亡是程序性死亡過程的一種主要形式，它涉及染色質凝聚和外周化、細胞質減少、核片段化、細胞質致密化、與周圍細胞聯系中斷、內質網與細胞膜融合，最終細胞片段化形成許多
TUNEL細胞凋亡檢測程序
實驗概要本實驗用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒檢測了組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。實驗原理其原理是熒光素（fluorescein）標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
原理 在細胞凋亡的過程中，基因組DNA會斷裂產生雙鏈、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段，這些DNA鏈的缺口可以利用沒標記法來識別。試劑盒就是通過催化DNA斷端，來標記缺口。酶底物顯色后，可以光鏡檢查被染色的細胞。
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
? ? ? ?細胞凋亡中染色體DNA的斷裂是個漸進的分階段的過程，染色體DNA首先在內源性的核酸水解酶的作用下降解為50-300kb的大片段。然后大約30?﹪的染色體DNA在Ca?2?和Mg2?依賴的核酸內切酶作用下，在核小體單位之間被隨機切斷，形成180～200bp核小體DNA多聚體。??????
羅氏TUNEL細胞凋亡檢測程序
一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素（fluorescein）標記的 dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT Enzyme）的作用下，
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
實驗方法原理 實驗材料 要分析的細胞在FACS緩沖液中試劑、試劑盒 FACS緩沖液冰冷的100%乙醇（如果細胞是抗體標記的則用70%乙醇）1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙錠（PI)的PBS儀器、耗材 流式細胞儀實驗步驟 1)凋亡刺激后，從培養液中沉淀所要分析的細胞，同樣沉淀一
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變zui具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：?1. ?細胞核的改變?由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
流式細胞儀檢測細胞凋亡可以： 鑒定細胞凋亡形態； 可以準確的進行凋亡細胞的計數； 可以進行特異的定性分析和定量分析。 實驗原理 細胞凋亡時，在細胞、亞細胞和分子水平上會發生的特征性改變，這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
用次GoZG1 DNA峰值計算細胞凋亡 用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞 通過TUNEL組織切面中的凋亡細胞的原位雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和經驗總結
一、TUNEL法的實驗原理細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端，從而可進行凋亡細胞的檢測，這類方法稱為脫
實驗時間_流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
流式細胞儀檢測細胞凋亡可以：鑒定細胞凋亡形態；可以準確的進行凋亡細胞的計數；可以進行特異的定性分析和定量分析。實驗原理細胞凋亡時，在細胞、亞細胞和分子水平上會發生的特征性改變，這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性。通過流式細胞儀檢測這
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗protocol
40年來，流式細胞術一直由多色流式主導。 盡管Fulwyler發明的初代儀器基于庫爾特體積，但熒光在短短幾年內成為流式細胞儀主導技術。 從20世紀80年代初到現在，技術開發人員一直致力于構建能夠測量更多熒光參數（我們通常將其稱為“顏色”）的儀器。 最開始，G?hde在1968年首次發表關于熒光
羅氏公司TUNEL細胞凋亡檢測程序
（In situ cell death detection kit-POD法）一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素（fluorescein）標記的dU
hoechst－和tunel法檢測細胞凋亡的區別
hoechst法看凋亡，主要是看sub-G1期的細胞數量。原理就是凋亡的細胞，由于DNA正在降解，所以含量比正常細胞要少。在以PI熒光強度（代表DNA量）為橫坐標的柱狀圖上，一般會有2個峰，G1和G2，G1就是正常細胞，G2是正在分裂的2倍體。2者間是S期細胞。如果有凋亡的細胞，在G1前會有細胞出現
Tunel－Procedure－in－Bovine－Embryos－牛胚胎TUNEL檢測凋亡
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution:?Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go highe
TUNEL分析實驗——組織切片的－TUNEL－染色
實驗材料組織試劑、試劑盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液儀器、耗材Parafilm 膜實驗步驟1. 取下組織，立即用新制備的 4% 甲醛固定，室溫過夜。用多聚甲醛制備 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通風櫥中加熱至 50~60℃，加幾滴 1
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒說明
TUNEL?(TdT?mediated?dUTP?Nick?End?Labeling)是檢測細胞凋亡的經典方法。本試劑盒采用TUNEL法，應用高活性的基因重組末端脫氧核糖核苷酸轉移酶（Terminal?Deoxynucleotidyl?Transferase,?TdT）在凋亡細胞斷裂的DNA?3’-
流式細胞儀細胞凋亡檢測
一 PI單染色法??基本原理? 其原理主要是根據細胞?凋亡時在細胞、亞細胞和分子?水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1.?細胞核的改變：由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料
流式細胞儀檢測細胞凋亡
細胞凋亡的檢測方法眾多，流式細胞儀檢測凋亡，是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此，具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下，首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體，線粒體的功能發生衰退；后是cas
細胞凋亡檢測：流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術?一、固定細胞的染色方法?1?）?PI?單染色法?方法一1．?收集細胞（?1?～?5?）×?106?個，?500?～?1000r/min?離心?5min?，棄去培養液。2．?3ml PBS?洗一次。3．?離心去?PBS?，加入冰預冷的?70?％的乙醇固定，?4?℃，?1h
細胞凋亡檢測：流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術一、固定細胞的染色方法1）PI單染色法方法一1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。2．3ml PBS洗一次。3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。5．40
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1）PI單染色法?方法一?1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。?2．3ml PBS洗一次。?3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。?4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。?5．400目的篩網過濾