巨噬細胞吞噬功能和殺傷功能的檢測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核細胞增多性利斯特氏菌Li說 腦 E G D ) ，過夜培養，活菌 或 加 熱 滅 活（見輔助方案）正常血清，新鮮分離或新鮮融解，置冰上備用含 5 % (v/v) FCS的 PBS，冰上預冷含 30% (m A O 蔗糖的PBS (濾過除菌， 4°C可保存數月）Diff-Quik 染 液（ Baxter Healthcare)10 mmX75 mm聚丙烯塑料試管或聚苯乙烯塑料試管，帶蓋型載玻片及蓋玻片振 蕩 器（Labindustries)Cytospin 2 型細胞甩片機（Shandon/Lipshaw)1 . 加入1〇ml PBS,......閱讀全文
巨 噬 細 胞 吞 噬 功 能 和 殺 傷 功 能 的 檢 測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核
小 鼠 巨 噬 細 胞 的 分 離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細
巨 噬 細 胞 一 氧 化 氮 的 檢 測
實驗步驟基本方案材料展開
小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型 檢 測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管，將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
NK/L A K 細 胞 殺 傷 活 性 的 檢 測
實驗步驟基 本 方案?51C r 釋 放 法檢 測 NK/LA K 細胞殺傷活性材 料展
巨 噬 細 胞 抗 腫 瘤 活 性 的 檢 測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
B 細 胞 功 能 的 增 殖 檢 測 方 法
實驗步驟基 本 方 案 抗 I g M 與 L P S 刺激的 B 細胞增殖材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)純化的靜息 B 細 胞（單 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度離心制備V D M E M -10 完全培養基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
ELISPOT方 法 檢 測 分 泌 細 胞 因 子 的 細 胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基（或其他適宜培養基）分泌細胞因子的細胞（小鼠或人的）絲裂原，抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
細 胞 毒 性 T 淋 巴 細 胞 的 誘 導 及 檢 測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
流 式 細 胞 儀 檢 測 全 血 的 人 淋 巴 細 胞
實驗步驟基本方案材 料（打 V 項 目 見 附 錄 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉，過濾除菌單 克 隆 抗 體（標記的，未標記的或生物素化的），通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗（僅用于未標記的一抗）F T T C 標記的鏈霉