組織切片的免疫過氧化物酶標記實驗
實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PBS過氧化氫PAP二氨基聯苯胺儀器、耗材離心機加濕盒培養箱實驗步驟1. 將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。 2. 待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3. 室溫下在含0.25%過氧化氫的PBS中溫育30 min，以PBS洗3次。4. 稀釋的第一杭體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每一載玻片上加40~50 μl 抗體，應能蓋住切片）。 5. 用與泵相連的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并從另一端加上抗體，蓋上加濕盒，室溫溫育1 h。6. 以PBS冼玻片3次（5 min/次），從切片一端加入新的PBS緩沖液，由另一端吸去舊的緩沖液。 7. ......閱讀全文
組織切片的免疫過氧化物酶標記實驗
實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PBS過氧化氫PAP二氨基聯苯胺儀器、耗材離心機加濕盒培養箱實驗步驟1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片
組織切片的免疫過氧化物酶標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 PBS過氧化氫PAP二氨基聯苯胺儀器、耗材 離心機加濕盒培養箱實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒免疫金標記物儀器、耗材培養箱顯微鏡實驗步驟1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理 利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 免疫金標記物儀器、耗材 培養箱顯微鏡實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
間接免疫熒光顯微鏡檢術可使兩種或更多種抗原可以在同一切片，同一時間內被顯示出來，可用于（1）細胞標記；（2）免疫熒光篩選干細胞。實驗方法原理通過使用激發波長及發射波長均不相間的熒光染料而進行的。通常限用兩種熒光染料，最常見的是羅丹明（綠光激發，發射紅光）和熒光素（藍光激發、發綠光）聯合使用。實驗材料
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PB
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 PBS抗體儀器、耗材 玻片加濕盒實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3. ?稀釋的第
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 第一抗體IgG實驗步驟 1. ?當進行雙標記實驗時，最重要的準則是：第一抗體應為不同類型，從而使第二抗體能分別識別之。第一抗體最好是來源于不同免疫動物。但如使用單克隆抗體，這一要求就有可能達不到，當使用單抗時，不同型的抗體如IgG和IgM，可被第二抗體確切區分
免疫組織化學法實驗——組織切片的免疫熒光標記
實驗材料組織樣本冰凍切片置于載玻片上試劑、試劑盒PBS第一抗體5?10μg mL第二抗體特異性針對第一抗體的抗體突光染料結合物封片介質（如Gelvatol)儀器、耗材塑料玻片盒或加濕盒實驗步驟1) 將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒。從冰凍切片機或冰箱取出載有切片的載玻片，交叉放入玻片盒（每邊約6片
LSCM冷凍組織切片的免疫熒光標記
冷凍組織切片的免疫熒光標記?將冷凍組織切片從?-80℃?冰箱中取出，室溫放置?10 min，待切片回溫并干燥，浸于?PBS?中?10 min洗去OCT，可以無需?Triton?處理，即可進行免疫熒光抗體標記，操作步驟與培養細胞反應方法相同。反應在避光濕盒中進行，反應結束時用無熒光封固劑封片，4℃保存
LSCM組織切片的細胞核標記
組織切片的細胞核標記目前仍然采用?DAPI(4，6-聯脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特點是專一性強、靈敏度高、穩定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激發，獲取明亮的核標記熒光圖像。PI(碘化丙啶?ex 536nm / em 617nm)也可以用于核標記，因
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修復工作液（pH8.0，稀釋50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀釋10倍使用） DAB顯色液（臨用前配制：試劑盒A、B、C各50ul，于1ml水中混勻）。方法1.? 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜 2.?
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
組織病理實驗_冰凍切片
組織病理實驗廣泛應用于生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等實驗方法原理冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑，將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程，大大縮短了制片時間。同時，由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等
冷凍組織切片的制作實驗
實驗試劑液氮，干冰，1％明膠，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀釋抗體，辣根過氧化物酶標記的二抗，DAB／金屬鹽試劑，3％過氧化氫，0.3％(W／V)氯化鎳貯存液，Harris蘇木精，乙醇實驗設備載玻片，Whatman 1＃濾紙，低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織
實驗技術：組織切片的制備
【目的】組織標本必須首先被制成組織切片，再經過染色處理，然后才能在顯微鏡下進行臨床診斷和科學研究。【原理】蘇木素染色結合伊紅染色是常規組織學染色技術，也稱為H & E染色。蘇木素是堿性染色，細胞核被染成深紫或蘭色，常用作核染色；伊紅是酸性染色，細胞漿染呈紅色，常用作胞漿染色。【材料】1.試劑和溶液（
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的，具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求，冰凍片要求較高（低溫環境，液氮，冰凍切片機，OCT包埋劑等等），石蠟片的制作就比較簡單，試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話，一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話，都可以的，冰凍切片比較容
非標記抗體免疫酶組織化學實驗
實驗方法原理 首先用酶免疫動物制備成效價高、特異性強的抗酶抗體。在特異性抗體與抗酶抗體之間利用第二抗體作「橋梁」，將它們連接起來，再將酶結合在抗酶抗體上，經顯色顯示抗原的定位。其基本流程為：抗原+特異性抗體 → 第二抗體（橋抗）→ 抗 HRP 抗體 → HRP → DAB+H2O2（顯色）。因為橋抗
組織病理實驗_石蠟切片法
實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術，冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法（簡稱H.E.對染法）是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛，對組織細胞的各種成分都可著色，便于全面觀察組織構造，而且適用于各種固定液固定的材料，染色后不易褪色可長期保存。實驗
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟1. ?將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰凍，燒杯中加CryoKwik（或異戊烷）。2. ?在濾紙條一端以鉛筆注明標簽，用鑷子將樣品放于另一端。?3. ?保證C
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料?冰凍組織試劑、試劑盒?異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材?濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟?1.? 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰凍，燒杯中加CryoKwik（或異戊烷）。2.? 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽，用鑷子將樣品放于另一端。?3.?
冷凍組織及切片的準備實驗
為了獲得較好的結果，應當用新鮮的組織，因為在-80°C 中保存超過 24 h 的樣品，其RNA 的產量和完整性將大打折扣。盡管有幾個實驗小組曾經報道用 LCM 技術從石蠟包埋的組織中獲得了沒有降解的 RNA, 但作者還是推薦使用冷凍的組織塊。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮
冷凍組織及切片的準備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 新鮮的組織 試劑、試劑盒 丙酮 蒸餾水 干冰 磷酸鹽緩沖液（PBS
冷凍組織及切片的準備實驗
實驗材料 新鮮的組織試劑、試劑盒 丙酮 蒸餾水 干冰磷酸鹽緩沖液（PBS) Tek OCT 組織復合物儀器、耗材 封閉容器燒杯 恒冷裝置 解剖工具 平盤組織模子載玻片刀片實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液（PBS)Tek OCT 組織復合物（Sakura Finet
TUNEL分析實驗——組織切片的－TUNEL－染色
實驗材料組織試劑、試劑盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液儀器、耗材Parafilm 膜實驗步驟1. 取下組織，立即用新制備的 4% 甲醛固定，室溫過夜。用多聚甲醛制備 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通風櫥中加熱至 50~60℃，加幾滴 1
撫生試劑免疫組織化學組織細胞的組織切片
一、載玻片的處理??? 免疫組化染色時間長，特別是雙PAP、免疫金銀染色等方法，所需時間更長，并要反復洗滌，切片在試劑中長時間浸泡，經多次洗滌，極易造成脫片而影響實驗的結果。需采用以下方法處理：載玻片先置于洗潔液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min，清水洗干凈后放人清潔液中浸泡12—24h，漂洗，用蒸餾
非標記抗體免疫酶組織化學實驗——PAP－法
實驗方法原理與酶橋法相似，不同的是酶橋法分四步，而 PAP 法分三步。PAP 法將酶橋法的步驟（3）、步驟（4）合二并為一，用 PAP 復合物替代，故稱 PAP 法（圖 4-9）。PAP 復合物中的抗 HRP 抗體和第一抗體必須為同一種屬動物的 IgG，這樣橋抗體才能作為「橋」將 PAP 復合物連接
非標記抗體免疫酶組織化學實驗——ABPAP－法
實驗方法原理ABPAP 法是 PAP 法和 ABC 法的聯合應用，使更多的酶分子結合到抗原-抗體復合物上，目的就是增加方法的敏感性。其原理見圖 4-11。作者應用了 30 余種特異性一抗、鼠源性和兔源性 PAP 復合物以及 ABC 檢測系統，結果 ABPAP 法比單一的 PAP 法要敏感 7～8 倍
石蠟切片免疫組織化學染色
主要試劑染色缸；染色架；保濕盒；晾片盤；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘；2.?????脫蠟和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(