實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光色素的選擇 可以產生明亮熒光的染料物質,稱熒光色素 (fluorochrome) 。目前常用的熒光色素有以下幾種:(1) 異硫氰酸熒光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在堿性條件下, FITC 的異硫氰酸基在水溶液中與免疫球蛋白的自由氨基經碳酰胺化而形成硫碳氨基鍵,成為標記熒光免疫球蛋白,即熒光抗體。一個 Ig分子上最多能標記 15-20個FITC 分子。(2) 四乙基羅丹明 (tetraethylrhodamine B200, RB200) :不能直接與蛋白質結合,需在五氯磷 (PCl5) 作用下轉變成磺酰氯 (S02Cl, 在堿性條件下與蛋白質的氨基反應結合而標記在蛋白分子上。熒光效能較低,一般不單獨使用,多用于與 FITC 標記抗體作雙標記或對比染色。(3) 四甲基異硫氰酸羅丹明 (tetramethylrhodamine isothio......閱讀全文
免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質和定位,以及
針對外來抗原的抗體分子(Ab1)可變區上Id可刺激機體產生相應的抗Id抗體(Ab2)。Ab2β具有與外來抗原相似的氨基酸排列順序或空間構型,它能夠在體內模擬始動抗原的作用。應用Ab2β的這一特性,可有目的地制備Ab2β,將其作為抗原的替代物用于基礎和臨床醫學研究。 一、抗獨特抗體的制
近期爆發的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19,對應的病毒為SARS-CoV-2)突出了開發有效治療方法的重要性。在近期的公眾號中,我們向大家介紹了“人民的希望”瑞德西韋的工作機制[1],在此,我們結合疫苗、血清、多肽和單抗的研究案例,向大家繼續介紹靶向病毒的大分子治療和我們的解決方案是如何推動下
酶聯免疫檢測技術的應用 真菌毒素的檢測:黃曲霉毒素 B 1 、 M 1 以及 T-2 毒素,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素 DON ),二乙酰草鐮刀菌烯醇( DAS ),玉米赤霉烯酮,赫曲霉毒素 A ( OA )。 農藥的檢測:主要有除草劑與殺蟲劑兩大類,例如殺暝松( FN )、甲
免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:直接法基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。 試劑與儀器 磷酸鹽
免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:直接法基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。 
免疫熒光技術(immunofluorescence technique)是一種以熒光物作為標記物的免疫分析技術,熒光物質分子在特定條件下吸收激發光的能量后,分子呈激發態而極不穩定,其迅速回到基態時,可以電磁輻射形式釋放出所有的光能,發射出波長較照射光長的熒光。用熒光素與已知的抗體(或抗原,較少用
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成
外周血是臨床檢驗中的重要標本。FCM分析外周白細胞的主要目的是了解各種白細胞的數目與分群情況。這些數字的變化與臨床的某些疾病有一定的關系。近年來,由于多種識別白細胞膜表面抗原的單克隆抗體的發現,以及對這些單克隆抗體的直接或間接熒光標記物的出現,使得利用FCM的熒光組織化學分析獲得被測細胞的多指標的更
外周血是臨床檢驗中的重要標本。FCM分析外周白細胞的主要目的是了解各種白細胞的數目與分群情況。這些數字的變化與臨床的某些疾病有一定的關系。近年來,由于多種識別白細胞膜表面抗原的單克隆抗體的發現,以及對這些單克隆抗體的直接或間接熒光標記物的出現,使得利用FCM的熒光組織化學分析獲得被測細胞的多指標的更
為了消滅豬瘟,需要快速而確實的診斷技術。流行病學、癥狀學和病理解剖學等方 面的資料,具有重要的參考價值,但確診必須采取病料,進行病毒的分離鑒定或作抗體 測定。 疫情調查時,除需注意流行情況,還應了解是否已經進行免疫接種, 所用疫苗有無 殘余毒力?非典型豬瘟在成年豬中大多表現為輕癥疾病
如今,單克隆抗體藥物以其獨特的作用機制及高效性,在腫瘤和自身免疫疾病的治療中發揮了不可估量的作用,成為全球的研發熱點,目前已有2400個單克隆抗體藥物處于研發及商業化階段。 1975年雜交瘤技術問世[1]。1986年鼠源單克隆抗體藥物Muromonab的上市拉開了單克隆抗體發展的序幕。
第一節 免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用范圍在腎臟疾病時,免疫細胞化學技術主要應用于腎臟穿刺組織的檢查,也可應用于血清或腎臟洗脫液及尿液的特殊檢查,茲分述如下:一、腎臟組織的檢查腎穿刺組織一般應切割為三小塊,分別作冰凍切片、石蠟切片及超薄切片,進行熒光顯微鏡、光學顯微鏡及透射電鏡觀察。所應用的免疫
隨著分析方法的飛速發展,無論是食品中有毒有害物質,還是環境中痕量元素的檢測,或者生物體內功能因子的分析,都迫切需要一種靈敏度高、快速準確、性能穩定的痕量分析方法。時間分辨熒光免疫分析技術(time-resolved fluoroimmunoassay,簡稱為TRFIA)是20世紀80 年代中期發展起
抗血清的制備 【原理】:用抗原刺激機體可以產生抗體,抗原的性質、純度和活性影響其免疫動物后獲得的抗體的的特異性和效價。在體外有目的的制備抗原,經初次、再次免疫的過程可以獲得高質量的抗體。 【注意事項】 ①制備佐劑時,一定要順著同一方向用勁磨。 ②檢查油包水的方法:培養皿內加水,滴入混勻液
《血液透析及相關治療用水》等90項醫療器械行業標準已經審定通過,現予以公布。其中,強制性醫療器械行業標準自2017年1月1日起實施,推薦性醫療器械行業標準自2016年1月1日起實施。 特此公告。 食品藥品監管總局 一、強制性行業標準(共14項) (一)YY 0572-201
正粘病毒診斷 根據流感的典型臨床癥狀及其高度的接觸傳染性、急性發作和迅速傳播等特點,常可作出初步診斷。但為了弄清是由哪一型或哪一亞型病毒引起的,則必須進行實驗診斷,即必須進行病毒分離和鑒定或作血清學檢查,才能獲得確診,尤其是在首次發現疫情的地區。 (1)病毒的分離和鑒定&n
艾滋病(AIDS)又稱獲得性免疫缺陷綜合征,是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一種免疫缺陷性疾病。HIV感染的診斷是艾滋病預防控制 工作的重要組成部分,建立敏感實用的檢測方法對于監測、診斷或血液篩查,控制艾滋病的流行顯得尤為重要。以下本文就HIV的檢測技術現狀及進展做一綜述。1
英國Huges首先提出邊界病是一種獨立的疾病。 由于首先發 生于蘇格蘭和威爾士的邊界地區,故有此名。 Dickinson應用典型病羔的腦、脾乳劑,經腹腔、 皮下或肌肉接種于懷 孕早期的母羊,使其流產或產出邊界病羔羊,從而證明邊界病是一種可以傳遞的疾病, 可由感染母羊經胎盤傳給胎兒。病
國家衛生健康委疾控局: 按照國家衛生健康委《全國艾滋病檢測工作管理辦法》要求,我中心組織完成了2018年全國艾滋病病毒(HIV)抗體診斷試劑臨床質量評估工作。本次評估的對象是從國內市場隨機抽取的43種HIV抗體篩查試劑(按檢測標志物和原理分為3類),主要情況如下: 一、評估結果 (一)HI
人類免疫缺陷病毒(HIV)檢測的主要目的是用于獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)即艾滋病的病原體診斷。本文就近年來HIV檢測的研究進展綜述如下。 1 抗原檢測 &
曾毅(1929年— ) 曾毅,廣東揭西人。1952年畢業于上海第一醫學院。1956~1960年,從事脊髓灰質炎病毒,減毒性疫苗免疫,腸道病毒、麻疹病毒的研究。1960年起從事腫瘤病毒研究。從1973年開始研究EB病毒與鼻咽癌的關系,建立了一系列鼻咽癌的血清學診斷方法,并獲得衛生部的試劑生產證。在
發光免疫分析是一種靈敏度高、特異性強、檢測快速及無放射危害的分析技術。70年代末以來得到了迅速發展,目前在國際上已經實現商品化和產業化的發光免疫分析產品,基本上可以分為:化學發光、時間分辨熒光(也稱時間延遲光致發光)、電化學發光(也稱場致發光和電致發光)幾種。 &n
郝繁運 綜述 中國誤診學雜志 2007年 第一期 第五次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編 摘要:本文主要介紹了酶免疫分析的發展現狀,從酶免疫分析標記技術若干環節的技術進步、在方法學上與現代化技術的融合與發展、酶免疫分析技
來自國家自然科學基金委員會的消息,8月17日國家自然科學基金委員會公布了2016年國家自然科學基金申請項目評審結果,其中面上項目16934項、重點項目612項、創新研究群體項目38項、優秀青年科學基金項目400項、青年科學基金項目16112項、地區科學基金項目2872項、海外及港澳學者合作研究基
日前,國際學術刊物Journal of Virological Methods在線發表了中國科學院上海巴斯德研究所黃忠課題組關于成功制備針對腸道病毒EV71的中和性單克隆抗體的最新研究成果。 腸道病毒EV71是引起手足口病的主要病原體。手足口病是常發于5歲以下兒童的傳染性疾病,部分患者
免疫學技術的迅速發展對精度的要求越來越高,一般的酶免檢測技術已逐漸無法適應這種形勢的需要。現今發展的主流已不再是用放射性同位素標記的測定方法(避免污染環境及對人體損害),而是轉向于能在任何地方操作的快速均相和固相測定,最終趨向于能夠檢測到皮克或10負18摩爾級的、非同位素的、自動或半自動的實驗室測定
1、染色過強 原因 解決辦法抗體的濃度過高或抗體孵育時間過長 降低抗體滴度(一般指濃縮性抗體)抗體 孵育時間:室溫1小時或4℃過夜 孵育溫度過高,孵育溫度超過37℃ 一般室溫20-28℃ DAB顯色時間過長或DAB濃度過高 顯色時間不能超過5-10分鐘,以顯微鏡下 觀察
基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。試劑與儀器l  
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混