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    脂質體介導的細胞轉染實驗

    實驗概要學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。實驗原理外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入;磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞;病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進入細胞。但是由于電擊法和磷酸鈣法的實驗條件控制較嚴、難度較大;病毒法的前期準備較復雜、而且可能對于細胞有較大影響;所以現在對于很多普通細胞系,一般的瞬時轉染方法多采用脂質體法。利用脂質體轉染法最重要的就是防止其毒性,因此脂質體與質粒的比例,細胞密度以及轉染的時間長短和培養基中血清的含量都是影響轉染效率的重要問題,通過實驗摸索的合適轉染條件對于效率的提高有巨大的作用。本次實驗采用的脂質體是promeg......閱讀全文

    細胞轉染脂質體的選擇

    脂質體靶向制劑及質量控制評價一、靶向制劑的定義與分類  靶向制劑亦稱靶向給藥系統(targeting drug delivery system,TDDS)。系指載體將藥物通過局部給藥或全身血液循環而選擇性地濃集定位于靶組織、靶器官、靶細胞或細胞內結構的給藥系統。  靶向制劑特點:定位濃集、控制釋藥、

    基因療法簡介

    基因療法是指將正常基因植入靶細胞代替病人細胞中的遺傳缺陷基因,或關閉、抑制異常表達的基因,以達到預防和醫療疾病目的的一種臨床醫療技術。在治療遺傳性疾病、惡性腫瘤、癌癥、艾滋病病毒(HIV)、關節炎、糖尿病、腺苷脫氫酶(ADA)缺陷癥、神經系統紊亂、心臟病等疾病方面,基因療法發揮著越來越重要的作用。基

    BI-200SM粒度儀測定脂質體粒徑及分布實例

        脂質體是一種人工合成的磷脂載體。由于其特殊的結構,脂質體可以將親水性的藥物包裹在其內部的水環境中,而疏水性藥物則分布在其磷脂片層中。此外,脂質體具有良好的生物相容性、生物可降解性及低毒性等優點,因此在作為藥物載體方面具有潛在的應用價值。然而,脂質體在穩定性、粒徑分布、規模

    SPOS技術激光粒度儀在脂質體檢測方面的應用

    摘要:磷脂脂質體是由磷脂制成的球形顆粒,用于制藥和化妝品工業。脂質體的大小和表面電荷是兩項重要特征需要檢測和監控。動態光散射(DLS)是用于測量亞微米脂質體的大小最常見的分析技術,而單顆粒光學傳感(SPOS)技術用來測量大于1um的脂質體,不僅可以檢測脂質體的大小還可以進行顆粒計數。美國PSS粒度儀

    脂質體的組成與結構講解

      avestin品牌均質設備可用于細胞破碎、脂質體藥物、乳劑的研制、懸濁液精細分散、飲料、食品等領域。  脂質體是一種人工膜,在水中磷脂分子親水頭部插入水中,疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25-1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合

    阿霉素丙二醇脂質體的制備及體外抗腫瘤作用研究

    化療作為癌癥治療的主要手段,存在兩大問題:一是化療藥物缺乏選擇性,二是多藥耐藥性[1-2]。靶向藥物制劑成為當今抗腫瘤領域的研究主流[3-4]。高通透性和高滯留性[高滲透長滯留效應(EPR效應)]是腫瘤靶向藥物設計的金標準[5]。醇質體是一種新型的柔性脂質體,是在脂質體的雙分子層中加入不同的柔軟劑,

    納米藥物的表征和質量控制(二)

    透射電子顯微鏡法(TEM法) 透射電子顯微鏡法是粒子粒徑分析最常用的方法之一,透射電子顯微鏡可觀察和表征納米粒子的形貌和測定粒徑大小。測定時,將納米粒子制成懸浮液并滴在帶碳支持膜的銅網上,待載液如乙醇揮發后,放入樣品臺。每種納米粒子分別選有代表性的A、B和C三組納米群拍攝高倍電鏡像,每張照

    脂質體的粒度及zeta電位表征研究(一)

    為成功實現藥物傳輸,理想的途徑是將治療制劑靶向傳輸至所需位置,實現對受藥組織與藥物間相互作用的監測。可廣泛運用于全身及局部給藥的脂質體對這一應用的需求不斷上升。由于具備液體、固體、半固體配方攜載能力,脂質體已應用于針對真菌感染、甲肝、急性淋巴細胞白血病等疾病的治療實踐中。脂質體的物理表征對配方改良及

    用于給藥系統的脂質體表征

        脂質體是一種重要的給藥載體,已獲批用于多種治療配方。脂質體由磷脂質組成,具有單層或多層結構,擁有親水內層和疏水外層,可制成不同大小的顆粒。這些顆粒可進行生物降解,基本無毒。最為重要的是,它既能封裝親水物質,又能封裝疏水物質。此外,通過修飾脂質體表面,還可對特定生理部位進行

    用于給藥系統的脂質體表征

    脂質體是一種重要的給藥載體,已獲批用于多種治療配方。脂質體由磷脂質組成,具有單層或多層結構,擁有親水內層和疏水外層,可制成不同大小的顆粒。這些顆粒可進行生物降解,基本無毒。最為重要的是,它既能封裝親水物質,又能封裝疏水物質。此外,通過修飾脂質體表面,還可對特定生理部位進行靶向給藥,延長脂質體在

    微納激光粒度分析技術在藥物制劑研究和產業化中的應用

    藥物劑型是藥物存在和給入機體的形式。藥物制劑技術的優劣標志著一個國家醫藥和醫療科學水平的高低。這項技術的研究和應用在醫療衛生實踐和工業實踐中占據著極其重要的地位,起著推動醫、藥科學向前發展的作用。近年來,由于藥物新制劑已經成為了醫藥產業的增長點,全世界新釋藥系統銷售額穩步增長,約占整個醫藥市場的10

    微納激光粒度儀在藥物制劑研究和產業化中的應用

    藥物劑型是藥物存在和給入機體的形式。這項技術的研究和應用在醫療衛生實踐和工業實踐中占據著極其重要的地位,起著推動醫、藥科學向前發展的作用。近年來,藥物新制劑已經成為了醫藥產業的重要增長點,濟南微納高效可靠的激光粒度分析技術在藥物制劑研究和生產的各個方面獲得廣泛應用,加速推動了國內藥物制劑技術的革新和

    微納激光粒度分析技術應用于藥物制劑研究和產業化

        藥物劑型是藥物存在和給入機體的形式。藥物制劑技術的優劣標志著一個國家醫藥和醫療科學水平的高低。這項技術的研究和應用在醫療衛生實踐和工業實踐中占據著極其重要的地位,起著推動醫、藥科學向前發展的作用。近年來,由于藥物新制劑已經成為了醫藥產業的增長點,全世界新釋藥系統銷售額穩步

    激光粒度分析技術在藥物制劑研究和產業化中的應用

         藥物劑型是藥物存在和給入機體的形式。藥物制劑技術的優劣標志著一個國家醫藥和醫療科學水平的高低。這項技術的研究和應用在醫療衛生實踐和工業實踐中占據著極其重要的地位,起著推動醫、藥科學向前發展的作用。近年來,由于藥物新制劑已經成為了醫藥產業的增長點,全世界新釋藥系

    微納激光粒度儀在藥物制劑研究和產業化中的應用

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    激光粒度儀在制藥研究及產業化中的分析應用

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    使用ProteOn XPR36蛋白相互作用陣列系統

    使用ProteOn XPR36蛋白相互作用陣列系統分析抗體-膜結合蛋白以及蛋白-脂類物質間的相互作用介紹:研究細胞膜、膜結合蛋白和抗體間的相互作用以及這些作用的互相影響是藥物研發中非常值得關注的事情。膜蛋白和膜相關蛋白以及多肽類物質在很多生物過程中的地位都非常重要,同時還參與到一些諸如癌癥等疾病的關

    流通池法——阿霉素脂質體的溶出研究

      流通池法(流池法)一直被認為是研究微粒和脂質體溶出行為的方法,有不少文獻對此進行了深入的研究和探討。所以,今天跟大家分享Wenmin Yuan等人利用流通池法,研究復合阿霉素(DOX)脂質體制劑溶出的案例。   本研究指出,流通池法是一種可靠的復雜脂質體產品溶出分析方法,該方法受到操作誤差的影

    細胞轉染

    脂質體介導法 磷酸鈣沉淀法             實驗方法原理 外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣

    高低溫超高壓納米均質機應用舉例

    高低溫超高壓納米均質機的應用案例:1)食品工業:目前高壓均質技術主要應用在乳制品生產。牛奶含有多種人體所需的礦物元素和幾乎所有已知的維生素,是我們膳食的重要組成部分。隨著生活水平的提高和商品供給的日益豐富,消費者的需求也不僅僅局限于普通白奶了,而對各種高品質的乳制品的需求越來越大。為使乳制品獲得良好

    細胞轉染實驗介紹

    一、實驗目的學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖,它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質體介

    納米顆粒跟蹤分析技術以及光散射技術在表征脂...(二)

    顆粒的運動速度與由斯托克斯-愛因斯坦方程(圖3)計算出來的球體等效流體力學半徑相關。NTA技術能逐粒計算粒度,且因有影像片段作分析基礎,用戶可精確表征實時動態。 圖3:斯托克斯-愛因斯坦方程 NTA技術能讓研究人員在同一時間觀察單個納米顆粒,因此除基礎的粒度分析以外,還能測定每個

    細胞生物學名詞解釋(五)

    9. 帶3蛋白(band 3 protein)與血型糖蛋白一樣都是紅細胞的膜蛋白,因其在PAGE電泳分部時位于第三條帶而得名。帶3蛋白在紅細胞膜中含量很高,約為紅細胞膜蛋白的25%。由于帶3 蛋白具有陰離子轉運功能,所以帶3蛋白又被稱為“陰離子通道”。帶3蛋白是由兩個相同的亞基組成的二聚體,

    顧臻《Angewandte Chemie》解析新的藥物傳遞方法

      目前,北卡羅拉納州立大學和北卡羅拉納大學教堂山分校的生物醫學工程研究人員,開發出一種新的抗癌藥物傳遞方法,基本上可在藥物觸發其釋放之前,將其傳遞癌細胞中。該方法可以比作具備一個抗癌炸彈,直到它們進入癌細胞才會引爆,在那里它們將結合摧毀細胞。  本文第一作者莫然(Ran Mo),博士畢業于中國藥科

    siRNA的轉染

    將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞中的方法主要有以下幾種: 1.磷酸鈣共沉淀 將氯化鈣,RNA(或DNA )和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA 且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA 復合物粘附到細胞膜并通過胞飲進入目的細胞的細胞質。沉淀物的大小和質量對于磷酸鈣轉

    RNA干擾實驗技術

    實驗概要本文介紹了RNA干擾的原理及基本實驗方法,包括了siRNA的設計、siRNA的制備和siRNA的轉染等方法,及RNA干擾實驗中的注意事項。實驗原理近年來的研究表明,將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞,可以使mRNA發生特異性的降解,導致其相應的基因

    RNA干擾(RNAi)實驗原理與方法(3)

    3.DEAE-葡聚糖和polybrene帶正電的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚體復合物和帶負電的DNA分子使得DNA可以結合在細胞表面。通過使用DMSO或甘油獲得的滲透休克將DNA復合體導入。兩種試劑都已成功用于轉染。DEAE-葡聚糖僅限于瞬時轉染。4.機械法轉染技術也包括使用機械的方法,

    RNAi的實驗原理和操作實用技術(3)

    3.DEAE-葡聚糖和polybrene帶正電的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚體復合物和帶負電的DNA分子使得DNA可以結合在細胞表面。通過使用DMSO或甘油獲得的滲透休克將DNA復合體導入。兩種試劑都已成功用于轉染。DEAE-葡聚糖僅限于瞬時轉染。4.機械法轉染技術也包括使用機械的方法,

    RNA干擾實驗技術介紹(二)

    dsRNA消化法的主要優點在于可以跳過檢測和篩選有效siRNA序列的步驟,為研究人員節省時間和金錢(注意:通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜)。不過這種方法的缺點也很明顯,就是有可能引發非特異的基因沉默,特別是同源或者是密切相關的基因。現在多數的研究顯示 這種情況通常不會造成影

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