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    IgG的分離與提純:硫酸銨沉淀法

    實驗概要實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱,比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。實驗原理以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性,不應含有非抗體的血清蛋白。因此,為了濃縮和提高抗體的效價,或為制備免疫球蛋白特異性抗體時,通常也需要分離和純化免疫球蛋白。γ球蛋白(IgG)是血清免疫球蛋白的主要成分,約占全部免疫球蛋白的75%,因此,抗體的分離純化主要是分離純化IgG。純化IgG小量幾十ml的話,用protein A或protein G就可以,疏水柱等也可以純化;大量的話,上百ml,可以使用streamline protein A。之前根據載量估計一下需要的柱子體積。主要試劑1. 硫酸銨飽和溶液 硫酸銨800g~850......閱讀全文

    三種方法檢測孕婦血清IgG抗A(B)效價的結果比較

    用經典法/改良法和微柱凝膠法檢測孕婦血清IgG抗A(B)效價的結果比較:作者:張慶俠,郝建華,倪琳婷,程瓊,周天祥作者單位:深圳市第六人民醫院,廣東 深圳 518052【摘要】  目的:比較經典法、改良法和微柱凝膠法抗人球蛋白試驗檢測孕婦血清中IgG抗A(B)效價的差異。方法:用經典法、改

    三種方法檢測孕婦血清IgG抗A(B)效價的結果比較

    作者:張慶俠,郝建華,倪琳婷,程瓊,周天祥作者單位:深圳市第六人民醫院,廣東 深圳 518052【摘要】  目的:比較經典法、改良法和微柱凝膠法抗人球蛋白試驗檢測孕婦血清中IgG抗A(B)效價的差異。方法:用經典法、改良法和微柱凝膠法分別檢測136例孕婦血清中IgG抗A(B)效價 ,計算其

    一種關于治療手足口病的雙特異性抗體的研究

      手足口病(HFMD)是由腸道病毒引起的疾病,引發手足口病的腸道病毒有20多種,其中腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇病毒A16(CA16)是手足口病的主要致病因子,可導致嚴重的中樞神經系統并發癥。最近針對EV71病毒感染的疫苗和抗體的開發取得了突破性的進展,然而,針對EV71和CA16同時感染的

    Jackson ImmunoResearch 二抗選用指南

    Jackson ImmunoResearch 公司二抗選用指南(此部分內容來源于Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc網站,如有疑問,請參考原網站)親和層析法純化的二抗用親和層析法純化的抗體是指,利用耦聯到瓊脂糖凝膠上的抗原將抗血清中的抗體親和層析下

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    Jackson ImmunoResearch  公司二抗選用指南( 此部分內容來源于 Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc  網站,如有疑問,請參考原網站)親和層析法純化的二抗    用親和層析法純化的抗體是指,利用耦

    常見傳染病保護性抗體IgG檢測在疾病預防控制中的作用

    一、常見傳染病的危害:縱觀人的一生,無論是胚胎發育期,還是從幼年到老年的各個時期,都受到各類傳染病(破傷風、白喉、百日咳、麻疹、腮腺炎、風疹、脊髓灰質炎、結核、乙腦、流腦、甲肝、乙肝等)的嚴重威協,給人類健康造成嚴重危害。如:胚胎期:當育齡期婦女或孕婦自身沒有常見傳染病特異性保護抗體IgG時,在受孕

    免疫球蛋白提取技術(Immunoglobulin isolation technique)

    免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。 隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很

    優生四項(TORCH檢測)的臨床結果解讀

    “TORCH”一詞最早由Andre Nahmia在上世紀70年代提出,指的是一組在孕期感染會導致胎兒先天畸形、死胎 、 早產 、 流產、 智力發育異常等的病原微生物。在提倡優生優育的今天,對于備孕或已經懷孕的女性來說,TORCH檢測已不陌生。今天,我們主要來了解下TORCH檢測的臨床意義、結果解讀及

    TORCH感染篩查、診斷與干預原則和工作流程專家共識

    近年來,國內外均發表了與TORCH感染相關的臨床實踐指南,但仍有內容需要加以補充和明確。國內部分專家就TORCH感染篩查、診斷及干預的臨床路徑進行了專題研討,達成共識如下:(1)不是所有的TORCH病原體都需要孕前或孕期篩查;對圍孕期婦女不需要進行單純皰疹病毒抗體分型檢測,若無臨床癥狀,不需要等待其

    免 疫 球 蛋 白 G (IgG) 片 段 的 水 解

    一個新的抗體需要片段化的時候往往要進行摸索性的試驗。選擇反應時間的時候寧可保留部分抗體不被完全降解,這樣可以避免蛋白酶過分裂解后導致抗體結合位點的破壞 。實驗步驟木 瓜 蛋 白 酶 水 解 IgG 成 Fab 片段摸索性試驗此 法 適 用 于 小 鼠(任何亞類)、大鼠、人 、山羊、綿羊、馬 、雞 、

    免疫球蛋白(IgG)臨床相關意義及檢測試劑

    免疫球蛋白(IgG)是人體免疫的主要作用分子,在健康人血漿中占免疫球蛋白總量的75%。人IgG分為4組不同的亞型:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。人IgG亞型的相對血清濃度是 IgG1>IgG2>IgG3>IgG4。這4種IgG 亞型在重鏈不變區的氨基酸序列95%以上相同,在絞鏈區(hi

    EB病毒不同感染階段的抗體陽性情況以及免疫檢測策略

    1. 實驗目的:采用德國IBL的EB病毒不同抗原的抗體檢測試劑盒對不同感染階段的病人樣本進行檢測,統計出,不同階段各種抗體的陽性率。為臨床EB病毒的診斷,特別是EB病毒的免疫學診斷提供方法和策略依據。 2. 材料與方法 為了確定IBL EBV ELISA試劑盒的臨床靈敏度和特異性,我們總共做了242

    igg和igm區別

      新型冠狀病毒肺炎(Coronavirus disease 19,COVID-19)是由2019新型冠狀病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)感染引起的傳染病。在造成全國數萬人感染的同時,這一疫情也迅速向全球多個國家開始蔓延。2020年3月4日,國家衛生健康委員會

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    第一步:選擇抗體。三種二抗抗體:Whole IgG,F(ab&;rsquo;)2片段,Fab片段。 Whole IgG抗體適用于多數情況,是性價比最高的。Whole IgG是完整的抗體分子,有一個Fc部分和兩個與抗原結合的Fab部分 (Figure 1, Jackson Immun

    戊型肝炎病毒IgA抗體的研究進展

    作者:周越球 陸松堯 梁立敏【摘要】  戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的經消化道傳播的急性傳染病,發病率逐年升高,目前尚無特效治療方法,也無特異性被動和主動免疫制劑可供預防。在急性戊型肝炎患者中,血液或糞便中HEV

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    一種基于DNA的通用型蛋白檢測系統

    摘要:基于抗體的蛋白質檢測方法,主要有western blot、ELISA、點雜交以及免疫組化等,這些方法被廣泛地應用于科研和診斷領域。在蛋白質的免疫檢測過程中,樣品蛋白首先結合與特異性一抗上,然后再用攜帶標簽(諸如:熒光染料,放射性元素,酶等)的二抗進行檢測。然而,為了避免種間內的交叉反應,必

    人體血清免疫球蛋白IgG是什么?

    人體血清免疫球蛋白IgG是什么?人體血清免疫球蛋白IgG是初級免疫應答中最持久、最重要的抗體,它僅以單體形式存在。血清中含量最高的免疫球蛋白,是血液和細胞外液中的主要抗體。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗體屬于IgG,它在抗感染中起到主力軍作用,它能夠促進單核巨噬細胞的吞噬作用(調理作用),中和細菌毒

    雙水相萃取分離免疫球蛋白和單克隆抗體研究

    抗體廣泛用于疾病治療、醫療診斷和免疫分離,具有廣闊的市場需求和發展前景。抗體主要從動物血液、腹水和細胞培養液中分離得到,尤其是動物細胞培養制備單克隆抗體,已實現規模化生產。然而,目前抗體分離過程的成本仍舊較高,成為抗體產業發展的一個瓶頸,開發經濟高效的抗體分離新方法,具有重要意義。雙水相萃取具有生物

    細胞系開發過程中IgG檢測流程的簡化

      介   在不同的研究人員中,以抗體為基礎的治療藥物的細胞系開發過程可能有很大不同。最終目標是找到可以穩定產生大量單克隆抗體的細胞克隆。IgG 產物檢測在開發和生產單克隆抗體的多個階段都是非常重要的一步 ( 圖 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要專門的儀器和技術人員,例如 HPLC 和表面干

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    免疫球蛋白提取技術(二)

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      新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠狀病毒(SARS-CoV-2或2019-nCoV)感染引起的主要經呼吸道傳播的急性病毒性疾病。截至4月23日23時30分,全球新冠肺炎累計確診超過兩百萬,達到了2664262例,現有確診達到了1748245例。死亡病例超過18萬,達到186245例。

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    本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定雞血清,血漿及相關液體樣本中雞馬立克氏病病毒抗體IgG(MDV IgG)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中雞馬立克氏病病毒抗體IgG(MDV IgG)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入馬立克氏病病毒抗體Ig

    臨床標本中的干擾物質(免疫)

    干擾物是臨床實驗室檢測誤差的一個很重要的來源,它們在某種程度上對病人來說表現為是一種危害。常規工作中精密度通過室內質控監控,準確性通過與參考物質作比較試驗進行驗證,但實驗室不能很容易的檢測干擾物質引起的誤差。廣義上干擾物是導致分析物濃度或催化活力出現偏移的物質,如免疫法干擾常由交叉反應所致,因此,干

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        問題 1:TORCH 篩查能診斷出生缺陷嗎?    不能。TORCH 篩查是對孕婦感染的診斷,由此對胎兒有否感染及發育缺陷提供關注。篩查是在人群(孕婦)中篩選出某種疾病(病毒)的高危個體(感染者),對后者進行診斷(胎兒感染的診斷),對患者(胎兒)或疾病

    二抗如何選擇-論一抗與二抗種屬及類型區別

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    免疫熒光三標實驗如何做?如何選擇二抗?

    免疫熒光三標?——藍色熒光的AMCA與Dylight 405標記二抗做免疫熒光實驗中,經常要進行免疫熒光的雙標記實驗,也就是在同一個樣本上同時進行兩種蛋白的免疫熒光檢測。具體的實驗時,可以選擇不同來源的一抗,然后再選擇分別針對一抗的二抗,同時二抗上標記有不同的熒光團。一般的雙標記實驗里,都會選擇一個

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