農桿菌介導水稻轉化
實驗概要本實驗介紹了農桿菌介導的水稻轉化。主要試劑GUS染色液：100 mmol/L NaPO4 (pH7.0)；0.1% Triton X-100；10 mmol/L EDTA；0.5 mmol/L亞鐵氰化鉀頭抱霉素，乙醇，次氯酸鈉溶液主要設備高速離心機，培養箱，人工氣候室實驗材料水稻種子實驗步驟1. 幼胚愈傷組織的誘導取開花后12-15天的種子，70%乙醇消毒1分鐘，無菌水沖洗2-3遍；再用2%有效氯的次氯酸鈉溶液振蕩消毒60分鐘以上，無菌水沖洗4-5遍，然后在無菌條件下分離出幼胚，接在N6D2培養基上，于28℃暗培養4天。2. 根癌農桿菌的培養從YEB固體培養基上挑取根癌農桿菌單克隆接種到20ml含Km 50mg /l的YEB液體培養基中28℃搖菌培養至對數生長晚期；再從中取0.5mI轉接至50mI同樣的YEB培養基中，同樣條件下培養至OD600為0.5左右。3. 共培養及轉化、篩選、分化 1) 將......閱讀全文
植物基因轉化技術
相關知識植物基因轉化技術是指將外源基因導入植物細胞或組織，獲得轉基因植物的技術。植物基因轉化技術總體上可分為兩大類：1 以生物體為介導的基因轉移法；2 DNA直接導入法。前者如農桿菌介導法，植物病毒介導法；后者如基因槍法、電擊法、聚乙二醇法、脂質體法及花粉管通道法。其中應用最廣的是根癌農桿菌介導法。
植物基因轉化常用方法
一 植物遺傳轉化的方法 植物遺傳轉化技術可分為兩大類：一類是直接基因轉移技術，包括基因槍法、原生質體法、脂質體法、花粉管通道法、電激轉化法、PEG介導轉化方法等，其中基因槍轉化法是代表。另一類是生物介導的轉化方法，主要有農桿菌介導和病毒介導兩種轉化方法，其中農桿菌介導的轉化方法操作簡便、成本低、轉
植物基因轉化常用方法
一. 植物遺傳轉化的方法 植物遺傳轉化技術可分為兩大類：一類是直接基因轉移技術，包括基因槍法、原生質體法、脂質體法、花粉管通道法、電激轉化法、PEG介導轉化方法等，其中基因槍轉化法是代表。另一類是生物介導的轉化方法，主要有農桿菌介導和病毒介導兩種轉化方法，其中農桿菌介導的轉化方法操作簡便、成本低、轉
基因槍法轉化大麥實驗
實驗材料麥穗試劑、試劑盒植物凝膠乙醇次氯酸鈉蒸餾水亞精胺儀器、耗材EP 管移液槍實驗步驟1. 組織培養基的準備( 1 ) 首先準備所需濃度 2 倍的植物凝膠，高壓滅菌（見注 2 ) 。( 2 )? 所有的組織培養基都要過濾滅菌，因此除了無菌的儲備液，其他培養基成分按所需濃度 2 倍的量混勻，調到合適
基因槍法轉化大麥實驗
實驗材料麥穗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒植物凝膠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 乙醇 ? ? ? ?
轉基因技術的轉化過程
(1）提取目的基因 從生物有機體復雜的基因組中,分離出帶有目的基因的DNA片段，或者人工合成目的基因，或從基因文庫中提取相應的基因片段和PCR技術進行目的基因的增殖。 (2)將目的基因與運載體結合 在細胞外, 將帶有目的基因的DNA片段通過剪切、粘合連接到能夠自我復制并具有多個選擇性標記的運輸
植物基因轉化常用方法-2
（二）Ti質粒轉化植物細胞的戰略 １?. Ti質粒的改造 有以下理由使天然的Ti質粒不能作為表達載體使用： a.?生長在培養基上的植物轉化細胞產生大量的生長素和分裂素阻止了細胞再生長為整株植物，因此，必須除去生長素和分裂素基因。 b.?有機堿的合成與T-DNA的轉化無關，而且可能會影響植物細
植物基因轉化常用方法-3
（三）改良植物性狀的策略 基因克隆技術提供了一種新的改良植物的方法，它可以直接的改變植物的基因型。有兩種策略可以應用。 1） 基因附加：通過添加1個或多個基因改變植物的性狀。 2） 基因扣除：利用基因工程技術使一個或多個植物已經存在的基因失活。 滅活植物基因是通過反義技術來實現的。將外源基因
植物基因轉化常用方法-4
1.2?其它的基因附加工程在水稻、棉花、馬鈴薯、番茄和其它作物上也進行了δ-內毒素工程，獲得昆蟲抗性也不僅僅是指有著一種方法。蛋白酶抑制劑也是較好的選擇，它可以一只昆蟲腸道內的蛋白酶活性，阻止或減緩害蟲生長，許多植物能產生蛋白酶抑制劑，如豇豆和common bean,?他們的基因已經被成功的轉移到其
基因槍法轉化小麥實驗
實驗材料幼胚盾片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒乙醇 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?漂白消毒劑 ? ?